杂交鲍人工繁育技术要点

福建省连江是南方地区最早开展日本盘鲍与皱纹盘鲍杂交育苗的地方。1989年福州市水产科学研究所将日本盘鲍与大连的皱纹盘鲍进行人工育苗并获得成功，杂交鲍现比较明显的杂交优势，尤其是对高温的适应性优于皱纹盘鲍。人工育苗成功后，杂交鲍养殖成效突显，以福建为代表的南方地区鲍鱼养殖业发展迅速。     

日本盘鲍与皱纹盘鲍杂交育种技术研究

<正>我国鲍的养殖技术研究始于20世纪70年代。人工育苗技术的突破,为鲍大规模养殖生产提供了行之有效的途径,进而掀起了鲍人工养殖的高潮,并取得了显著的经济效益和社会效益。但随着养殖规模的不断扩大、养殖环境的日趋恶化,导致鲍病害频发、种质严重下降,     

应用RAPD技术研究4种鲍的亲缘关系

应用RAPD技术研究 4种鲍的亲缘关系结果表明 ,4种鲍群体中 2 0个有效引物共扩增出 5 38条DNA带 ,平均每个引物扩增的条带数为 2 6 .9;扩增的多态性条带数 136 ,平均每个引物扩增的多态性条带数为 6 .8;多态位点百分数为 2 5 .3%。盘鲍群体和皱纹盘鲍群体之间遗传距离与遗传一致度分别为 0 .2 8和 0 .72 ,杂色鲍群体和九孔鲍群体之间遗传距离与遗传一致度分别为 0 .32和 0 .6 8。聚类分析把盘鲍群体和皱纹盘鲍群体聚为 1组 ,二者亲缘关系较近 ;杂色鲍群体和九孔鲍群体聚为 1组 ,二者亲缘关系也较近     

日本盘鲍育苗技术

日本盘鲍原产地为日本、韩国一带，分布在潮间带0～20米。是福建、广东替代杂色鲍工厂化人工养殖的新品种。日本盘鲍的特征：壳呈长卵圆形，最大壳长约200毫米。壳表呈绿黑色，螺旋部高。螺肋较平，粗糙均匀，具放射状瘤肋。呼吸孔呈锥状，前端4～5个开孔。壳口内唇遮缘宽，自后向前延伸至壳口3／4处。壳内珍珠光泽略带绿色，右侧壳肋痕明显，卵圆形。     

皱纹盘鲍与盘鲍杂交效果分析

从杂种优势的角度对皱纹盘鲍♀与盘鲍♂杂交子一代的经济性状进行分析。结果表明,4月龄杂交鲍子一代(F1)活体重比皱纹盘鲍增加36.87%,软体部干重增加33.21%,总干重增加29.20%,其它性状也显著优于皱纹盘鲍。杂交鲍F1的壳长、壳宽、活体重、软体部干重和总干重等主要性状的变异系数为12.94%~44.51%,其中软体部干重的变异系数最大,壳长的变异系数最小;且杂交鲍各性状的变异系数均大于皱纹盘鲍。杂交鲍子一代的变异有助于定向选择,提高杂交育种的效果。     

杂色鲍与盘鲍种间杂交受精率的影响因素

研究卵子排放后的时间、精子排放后的时间、授精精子浓度、胰蛋白酶、钙离子、pH和水温等因子对杂色鲍(Haiotisdiversicolor,以下简称S)与盘鲍(H.discus discu,以下简称J)种间杂交受精率的影响。结果表明,卵子排放后的时间和授精精子浓度是影响杂交受精率两个最重要的因素。与自繁组合相比,正反杂交受精率均较低且下降速度快得多。水温21.5℃时,两亲本自繁对照组中,卵子排放1 h对受精率均无显著影响。而SJ杂交,卵子排放时间2 min时,受精率为55.9%±8.1%,4.7 min时受精率已下降了50%;JS杂交,卵子排放时间为4 min时,受精率为31.5%±9.7%,10 min时受精率下降至4 min时的29.1%。相比之下,精子排放时间对杂交受精率的影响小得多,3 h内对正反交杂交受精率没有显著影响。杂交适宜精子浓度约为母本自繁的100倍,其中SJ杂交适宜授精精子浓度为6.0×106~2.4×107mL-1,JS杂交适宜授精精子浓度为3.8×107~7.5×107mL-1。水温对于杂交受精率也有影响,短时间内将水温控制在26~29℃可以得到较高受精率。其他实验因素,如添加胰蛋白酶、Ca2+或改变授精体系pH对杂交受精率均无正向作用。     

片状人工配合饲料喂养盘鲍试验

近年来，鲍粉状配合饲料已普遍应用于稚鲍与幼鲍的培育，但对成鲍仍以投喂大型海藻为主，2003年4月13日至7月12日笔者在连江县官坞海洋开发公司鲍鱼养殖场，利用直接形成的加工工艺和不同的粘合剂自制三种片状饲料饲养盘鲍（Haliotis discus discus），观测饲料的稳定性和适口性，并对鲍的生长效果与投喂天然饵料进行比较，现将试验情况报告如下：     

盘鲍引进养殖与人工育苗试验

１９８６年从日本长崎引进盘鲍，在平潭与连江黄岐半岛进行了生活，生长与育苗养殖试验，表明该种鲍适于福建沿海的水温特点，比本地的杂色鲍生长快；比北方引进的皱纹盘鲍与台湾的九孔具有更强的适温能力，当前已用自育的第二代做亲鲍，培育出大量苗种，并与皱纹盘鲍杂交所育的大量苗种为本省提供一优良的鲍的养殖新种。     

亲鲍来源不同的杂交鲍生长情况比较

为通过杂交育种解决南日鲍种质退化问题以促进鲍养殖效益,分别选取2012年10月份开展的南日鲍(♀)与皱纹盘鲍大连群体(♂)、盘鲍日本群体(♂)杂交所得的苗种以及南日鲍自交所得的3种苗种,于2013年3月份在海区水质情况良好的同一渔排吊笼养殖进行对比试验,试验分为3组,每组2 500个鲍苗,试验390d左右,观察它们的生长情况,测定鲍的体长、体重,分别统计每组鲍的数量。结果表明:分苗前,杂交鲍苗的生长速度、度夏养殖成活率均显著高于自交所得鲍苗(P0.05);而南日鲍(♀)×盘鲍(♂)杂交所得鲍苗的生长速度和养殖成活率略高于南日鲍(♀)×皱纹盘鲍(♂),但差异不显著(P0.05);当年秋季分苗后,养殖鲍的生长速度和养殖成活率依次为:南日鲍(♀)×盘鲍(♂)南日鲍(♀)×皱纹盘鲍(♂)南日鲍(♀)×南日鲍(♂),且3组之间差异显著(P0.05)。说明在鲍养殖生产中,采用杂交育种改良和优化鲍种质是切实可行的,可显著提高鲍的生长速度和养殖成活率。     

盘鲍原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫原性鉴定

为获得具有过敏原活性的重组盘鲍TM进行了试验。克隆盘鲍原肌球蛋白(tropomyosin,TM)基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行了鉴定。从盘鲍肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆盘鲍中原肌球蛋白基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增盘鲍TM的开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化入大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,West-ern-blot检测其免疫学活性。经序列测定,该基因由855个碱基组成,编码284个氨基酸。SDS-PAGE检测该重组蛋白在大肠杆菌中高效表达38 kD的目的蛋白,且重组蛋白具有良好的IgE结合活性。