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用CODEHOP设计简并引物克隆反刍月形单胞菌K6乙酸激酶基因片段 总被引:3,自引:0,他引:3
利用CODEHOP设计细菌乙酸激酶的简并引物,选用1对引物ACKSe以高效丙酸生成菌反刍月形单胞菌K6基因组DNA进行PCR,得到749 bp PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,测序后经Blastx比对,此DNA产物与其他菌属来源的乙酸激酶蛋白序列具有相似性,所克隆的序列即为K6的乙酸激酶基因片段。用CODEHOP程序化设计的简并引物可信性强,阳性率高。该基因的成功克隆为丙酸生成菌K6乙酸代谢工程研究提供了依据。 相似文献
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[目的]构建反刍月形单胞菌乙酸生成的缺陷株并分析其发酵特性。[方法]应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌反刍月形单胞菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸纳的选择性培养基筛选接合子。[结果]共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌7株。对反刍月形单胞菌的突变株进行16S rRNA鉴定和Tn5的PCR鉴定,及乙酸激酶(AK)和磷酸乙酰转移酶(PTA)酶比活力分析,确定突变株属于pta基因缺失型氟乙酸抗性菌株。[结论]该研究为进一步研究反刍兽瘤胃微生物乙酸的细胞代谢网络和调控奠定基础。 相似文献
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<正>那个"小男孩"又要回来了。据美国国家海洋和大气管理局(NOAA)气候预报中心(CPC)于5月10日发布的一项预测结果,厄尔尼诺——热带太平洋东部海域周期性的水温升高现象——很可能将在接下来的几个月中出现。如果足够强劲,此次厄尔尼诺事件不仅能够严重破坏世界各地的天气,同时也可能引起看起来已经停滞15年的全球变暖的重新复发。CPC预报说,在未来3个月中,厄尔尼诺出现的几率为58%。而到了早秋,这一比例恐将升至78%。该预 相似文献
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1月销售回顾2006年1月的上海果品市场用“涨声一片”来形容一点也不过分。据上海果品行业协会调查分析,整个1月份果品价格,与上年同期相比上涨了15%以上,少数品种涨幅达到了25%~30%。其中,相对好销且涨幅较高的品种有:砂糖桔、皇妃贡柑、永鹏芦柑、赣南脐橙以及陕西和新疆红富 相似文献
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[目的]构建反刍月形单胞菌乙酸生成的缺陷株并分析其发酵特性。[方法]应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌反刍月形单胞菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸纳的选择性培养基筛选接合子。[结果]共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌7株。对反刍月形单胞菌的突变株进行16SrRNA鉴定和Tn5的PCR鉴定,及乙酸激酶(AK)和磷酸乙酰转移酶(PTA)酶比活力分析,确定突变株属于pta基因缺失型氟乙酸抗性菌株。[结论]为进一步研究反刍兽瘤胃微生物乙酸的细胞代谢网络和调控奠定基础。 相似文献
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