AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究

旨在研究AMPK激活剂二甲双胍（metformin，Met）和阿卡地新（acadesine，AICAR）对绵羊精液冷冻保存效果的影响。本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度（0、100、200、300、400、500 μmol·L^-1）的Met和AICAR，冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度（400 μmol·L^-1 Met、200 μmol·L^-1 AICAR）；然后分别使用不同的冷冻稀释液（对照组：稀释液；Met组：含400 μmol·L^-1 Met的稀释液；AICAR组：含200 μmol·L^-1 AICAR的稀释液）冷冻精液，解冻后检测精子中AMPK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性。结果表明，稀释液中添加400 μmol·L^-1 Met和200 μmol·L^-1AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性（P<0.05），其中400 μmol·L^-1 Met组精子总活力达43.20%，顶体完整率为91%，质膜完整率为46%。与对照组相比，Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高（P<0.05）；顶体酶活性显著提高（P<0.05）；丙酮酸水平显著下降（P<0.05），乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高（P<0.05）；与对照组相比，Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位（P<0.05），提高ATP酶（P<0.05）以及抗氧化酶的活性（P<0.05）。添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果。     

鱼类生殖细胞移植的研究进展及应用前景

生殖细胞移植是指将供体的生殖细胞移植到同种或异种受体体内,供体生殖细胞嵌合到受体性腺,经过增殖、分化并最终发育为功能性配子的过程。作为辅助生殖技术,它不仅为珍稀濒危动物的繁育和保护提供了新途径,同时也为生殖干细胞的功能研究提供了有效手段。鱼类生殖细胞移植研究首先在模式鱼类斑马鱼中开展,经过十多年的发展,取得了一系列突破性的进展:主要包括先后建立了以胚胎、仔鱼和成鱼为受体的生殖细胞移植体系,精原和卵原干细胞的发现拓宽了供体生殖细胞的选择,受体的选择与制备方法的完善。该技术在缩短鱼类性成熟周期、性控育种、珍稀濒危鱼类保护等方面具有巨大的应用前景,已成功在多种淡水和海水鱼类中开展了研究和应用。本文结合作者的研究实践和经验,系统地梳理和总结了鱼类生殖细胞移植的研究进展,指出了该技术实践应用的关键问题,并探讨了其应用前景。     

Research Progress on Technique of Frozen Embryo Transfer in Sheep

The paper introduced the research progress on the technique of frozen embryo transfer in sheep,illustrated selection of donors and receptors,superovulation,synchronization of estrus,embryo cryopreservation and embryo transplantation. Frozen embryo transfer in sheep is another breakthrough in the high-quality sheep raising,and this technique in China is in its infancy recommendation stage,but it will be comprehensively popularized in the future.     

犬精液冷冻稀释液配方优化试验

<正>犬是最早被驯化的一个物种,人们根据需要培育了许多不同的犬品种。犬业在国内外已经发展成为重要的产业,犬精液冷冻保存技术在犬种资源的保护、品种选育和加快良种进程等方面都能发挥关键作用。发达国家对犬的冷冻精液研究与推广启动早、发展快,而且制定了冷冻精液的采集、运输和贮存等操作规则,并由专门组织或机构进行负责。在我国,随着养犬业越来越受到人们的青睐,犬的冷冻保存技术也已逐渐被人们熟识,在10多年当     

家畜人工授精精液的稀释准备

在对动物的大多数人工授精程序中,精液品质评定仅限于检查精子数量、精子活力和精子形态。要确定某头种公畜的精液质量是否符合输精要求,就需要进行更加精确的分析,但日常采集精液时,很少进行这样仔细的检查。采出的精液除了直接输入单个母畜外,一般都要先将其稀释,再进行冷藏或冷冻保存。直接输精通常见于不能进行正常交配的种公犬及患有慢性子宫内膜炎的母畜。1精液稀释的意义1.1扩大精液容量     

Study of Semen Cryopreservation for Banna Mini-pig Inbred Line

In this study, different concentrations of glycerol were added to semen cryoprotective extenders of Banna Mini-pig inbred line (BMI), different thawing solutions and thawing methods were studied. After thawing, the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were compared to optimize the cryopreservation method of BMI semen. The results showed that the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in 2% and 3% glycerol groups than those in 1%, 4% and 5% glycerol groups (P<0.05);The motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity were significantly higher in thawing solution Ⅰ than those in thawing solution Ⅱ, Ⅲ and Ⅳ (P<0.05); Through comparing the motility, the rates of plasma integrity and acrosome integrity, the thawing effect in 40℃ 6 s and 50℃ 6 s groups were better than that in 38℃ 30 s (P<0.05). In conclusion, the optimal semen cryoprotective method for BMI was 2% or 3% glycerol as cryoprotectant, using thawing solution Ⅰ to thaw at 40℃ 6 s or 50℃ 6 s.     

早胜牛的采精及细管冻精制作技术要点

近年来，伴随我国畜牧业蓬勃发展的同时，为了更大限度的提高母畜的受胎率和充分利用优秀种畜的基因，人工授精技术得到了不断完善和发展，并在全国各地广泛推广和应用。本文结合实践经验总结出的一些技术措施，阐述了对早胜牛这一地方优良种质资源进行保种和开发利用的重要意义，同时指出人工授精技术和低温冷冻保存精液技术在早胜牛上的实践，对于进一步开发利用培育优质高产肉牛新品种，促进肉牛产业高质量发展具有非常重要的现实意义。通过早胜牛种公牛采精的全过程以及细管冻精制作要点的详细讲解，低温冷冻保存精液技术，可更经济、可靠地实现家畜品种资源的保护，让优良基因长时间保存使得后续研究需要得到保障。     

褪黑素在牛体外胚胎生产中的应用研究进展

近年来牛体外胚胎生产取得很大进展,可以稳定地在体外获得囊胚,但体外生产效率偏低,不能满足产业需要。在牛体外胚胎生产过程中很容易产生活性氧和活性氮,导致配子和胚胎受到氧化应激或硝化应激。褪黑素作为一种强有力的抗氧化剂和抗凋亡剂,可以直接清除有毒的氧衍生物,减少活性氧的形成,在牛体外胚胎生产过程中发挥积极作用。本文主要对褪黑素在牛卵母细胞体外成熟、体外受精、早期胚胎发育、配子和胚胎冷冻保存等方面的研究进行综述,为后续体外胚胎生产技术的优化研究和推广应用提供参考。     

番茄红素对秦川牛精液冷冻保存及鲜精品质影响

旨在探究番茄红素对秦川牛精液冷冻保存和新鲜精液品质的影响,为番茄红素作为新型精液稀释液添加剂和种公畜日粮添加剂提供依据。本研究采集3头年龄3~5岁健康状况良好秦川种公牛的新鲜精液混合,用0、1、2、3、4 μmol·L^-1浓度的番茄红素稀释液冷冻保存;利用计算机辅助分析仪、低渗肿胀检测法、花生凝集素荧光标记检测法、罗丹明荧光检测法等检测精子的运动性能、顶体完整率、质膜完整性、线粒体活性和抗氧化性能;在秦川种公牛日粮中添加15 mg·kg^-1 BW番茄红素,检测饲喂前后秦川种公牛的新鲜精液品质和血清抗氧化指标。结果表明,在秦川牛精液冷冻保存过程中添加番茄红素可以显著提高冷冻-解冻后精子的活力、顶体完整率、质膜完整性和线粒体活性以及抗氧化酶CAT和GSH-Px酶活性,显著降低精子中MDA含量,且番茄红素的最适添加浓度为2 μmol·L^-1(P<0.05);饲喂15 mg·kg^-1 BW番茄红素后,与饲喂之前相比,秦川种公牛的精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率显著降低(P<0.05),血清中抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px酶活性显著增加(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。综上所述,一定浓度的番茄红素对精子在冷冻过程中造成的精子损伤和秦川牛机体应激造成的繁殖性能降低具有良好的保护作用,这可能与番茄红素通过抗氧化作用减少精子在冷冻-解冻过程中的氧化损伤和提高动物机体的抗氧化能力有关。