中华鲟B细胞活化因子的分子表征及与免疫反应相关的潜在功能

[目的]探究中华鲟B细胞活化因子(CsBAFF)的分子表征及其与免疫反应相关的潜在功能.[方法]通过免疫刺激后获得中华鲟各组织.结合生物信息学分析,构建和筛选CsBAFF的cDNA文库,并采用定量RT-PCR进行验证分析.采用分子生物学的方法进行CsBAFF的质粒构建及重组sCsBAFF的制备.采用MTT试验检测细胞的增殖,以及结合免疫印迹分析相关蛋白的表达.[结果]克隆了CsBAFF的cDNA,包含765个核苷酸的开放阅读框,编码255个氨基酸,分子量为28.9 kD.CsBAFF具有跨膜结构域、TNF结构域、furin蛋白酶裂解位点、长D-E环、1个潜在的N-连接糖基化位点和2个保守的半胱氨酸残基.CsBAFF基因主要表达于头肾和脾脏,且三价灭活疫苗和聚肌苷酸均能诱导CsBAFF基因表达.重组CsBAFF能促进中华鲟和小鼠淋巴细胞的增殖,其中保守的半胱氨酸残基Cys201和Cys214是CsBAFF发挥生理功能必不可少的位点.[结论]B细胞活化因子(BAFF)是肿瘤坏死因子(TNF)家族成员之一,在B淋巴细胞的增殖、存活、分化和成熟过程中起着重要作用.     

中华鲟肝脏癌症及其治理措施

中华鲟是我国一种珍稀鱼类,亦称“国宝鱼”,但近年来随着工、农业发展,引起长江某些局部水域的严重污染,从而给这种珍稀鱼类带来很大的损害.据我们长期调查表明,不少中华鲟已患及慢性病,鳃瓣出血,红细胞,血小板和血红蛋白含量降低,鱼体内含有较高重金属如铜、锌含量达到1.48mg/L与10.16mg/L,以及肝脏发生癌变等症状.这一情况应引起有关部门的高度重视,以便积极做好中华鲟资源的保护工作.     

濒危中华鲟人工群体的繁殖生物学

以1998―2008年孵出的子一代(F1)中华鲟(Acipensersinensis)为材料,研究了人工养殖中华鲟的繁殖生物学特征。结果表明:年龄10～20龄的492尾人工养殖子一代中华鲟体重为30～169 kg,体长为140～258 cm,肥满度为0.77～1.26,体长(L)与体重(W)之间的关系式为W=1×10~(–5)L~(2.9658) (R~2=0.9076,n=492)。74尾中华鲟性腺发育成熟,成熟比例为15.04%,成熟个体中雄鱼体重[(60.73±14.53)kg]和体长[(172.27±13.46)cm]均小于雌鱼体重[(88.39±29.14)kg]和体长[(193.37±18.90) cm];雄鱼最小性成熟年龄为10龄,平均为(14.96±1.93)龄,雌鱼最小成熟年龄为12龄,平均为(17.84±1.80)龄。雄鱼催产成功率为76.36%,精子快速运动时间为(49.11±13.38) s,精子寿命为(220.75±56.47)s;雌鱼催产成功率为57.89%,产卵量为(13.43±6.79)万粒,卵径(3.97±0.15)mm,卵重(0.046±0.013)g,受精率为(42.72±27.82)%,孵化率为(51.61±32.41)%,出苗量为(4.44±5.67)万尾。与野生中华鲟相比,人工养殖中华鲟成熟个体体格、繁殖力和繁殖效果均有下降趋势,人工保种面临挑战。     

中华鲟热休克蛋白hsp30基因cDNA的克隆及其在高温胁迫下的表达分析

实验克隆了中华鲟(Acipenser sinensis)热休克蛋白hsp30基因cDNA的全长、分析了其分子结构与特征,并研究了其在高温胁迫下的表达水平。结果显示,中华鲟hsp30基因cDNA序列全长为1 037 bp,其中开放阅读框(ORF)636 bp,5′端非编码区(5′UTR)38 bp,3′端非编码区(3′UTR)363 bp,共编码211个氨基酸。氨基酸多序列比对发现含有一个保守的α晶状体结构;系统进化分析显示,中华鲟HSP30与鱼类HSP30聚为一支,与小体鲟HSP30氨基酸序列相似性最高,为79%。荧光定量PCR结果表明,中华鲟hsp30基因在皮肤中的表达量最高,肝脏次之,在肠中的表达量最低。高温胁迫后,心脏、脾脏、肾脏和皮肤中hsp30基因表达量均显著增加,表明这些器官在中华鲟应对高温胁迫中可能起着重要作用。     

中华鲟神经内分泌多肽7B2基因克隆及组织特异性表达

以中华鲟(Acipenser sinensis)脑垂体总RNA为模板,采用RT-PCR和RACE方法,获得中华鲟神经内分泌多肽(7B2)基因的3个重叠片段,测序后拼接得到986 bp全长基因序列,其中包括5'端非翻译区(5′-UTR)14 bp、3′端非翻译区(3-′UTR)261 bp和开放阅读框711 bp。翻译编码236个氨基酸。其中前43个氨基酸为7B2的信号肽。经BLAST比对发现中华鲟7B2蛋白的同源性与斑马鱼(Danio rerio)的相似性最高为82%。系统发育分析表明,中华鲟与斑马鱼亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析表明:在脑中7B2 mRNA表达量最高,心脏、性腺、胰等组织中表达次之,肠、肾、皮肤等组织中少量表达,肝和鳃几乎不表达。     

MS-222不同处理方式对史氏鲟和中华鲟麻醉效果的影响

MS-222的药液浸浴和药液鳃部喷洒可作为史氏鲟（Acipenser schrenckii）和中华鲟（Acipenser sinensis）的麻醉方式。在水温16～18℃的条件下,史氏鲟的浸浴有效浓度为90～110 mg/L,浸浴安全时间不超过30 min;中华鲟的浸浴有效浓度为80～100 mg/L,浸浴安全时间不超...     

PAT标志放流有望揭开中华鲟和日本鳗鲡洄游之谜

2010年12月3日，中国水产科学研究院东海水产研究所在上海崇明岛长江口实施了中华鲟和日本鳗鲡PAT标志放流活动。此次共放流野生中华鲟8尾、日本鳗鲡2尾，试图利用PAT标志技术揭开中华鲟入海洄游及日本鳗鲡繁殖行为之谜，为有效保护中华鲟这一珍稀濒危物种和突破日本鳗鲡全人工繁殖技术提供科学依据。     

中华鲟苗种南移培育技术的初步研究

中华鲟（ＡｃｉｐｅｎｓｅｒＳｉｎｅｎｓｉｓＧｒａｙ）是一种大型的洄游性名贵珍稀鱼类，国家一类水生保护动物，具有很高的经济价值和学术价值。当前，中华鲟人工蓄养、催产、授精和孵化等技术已趋成熟，但在仔、幼鲟培育技术上由于其种的特异性，深秋繁殖，冬季培育，...     

中华鲟小水体养殖试验

利用水泥池小水体进行中华鲟养殖试验，采用人工配制饲料，通过４个阶段１７３天的养殖，鱼尾均共增重１８１７ｇ，日均增重分别为８．５ｇ、９．２ｇ、１２．９ｇ，饲料系数为１．９６、２．１２、２．３３、２．２１。水温处于８℃～２９．１℃均可摄食生长。