麻疯树毒蛋白(curcin)的抗真菌活性研究

以植物病原真菌水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Cav.)、松赤枯病菌(Pestalotia funerea)、玉米纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kuha)、油菜菌核病菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib)de Bary]为实验菌,检测了麻疯树毒蛋白(curcin)的抗真菌活性.结果表明,5μg/mL curcin能明显抑制菌丝生长和孢子的产生.浓度提高到50 μg/mL时,水稻稻瘟病菌基本不形成孢子,对松赤枯病菌的孢子形成抑制率达83.8%.光镜下可见处理菌丝明显缩小、变形.SDS-PAGE显示,处理菌丝的蛋白质条带减少.curcin对菌丝生长和孢子发育的阻碍作用可能与curcin阻碍了蛋白质合成有关.     

重组麻疯树核糖体失活蛋白表达及其体外抗肿瘤活性研究

[目的]研究重组麻疯树核糖体失活蛋白的表达及其体外抗肿瘤活性。[方法]从麻疯树叶中克隆了curcin基因,在此基础上构建pET-22b/curcin重组表达载体,在大肠杆菌中成功表达29 KD的重组蛋白。[结果]经0.5 mM的IPTG在30℃诱导6 h,重组蛋白表达量约占菌体总蛋白的20%,重组curcin以包涵体的形式表达。经溶解、复性、纯化,获得了纯度为95.6%的重组curcin蛋白。[结论]体外研究表明,重组蛋白对A549、HepG2的肿瘤细胞有明显的增殖抑制作用,其IC50分别为92.246和691.42μg/ml,但是对HELA细胞增殖没有明显抑制作用。     

The effect of curcin from Jatropha curcas on apoptosis of mouse sarcoma-180 cells

Curcin is a ribosome-inactivating protein expressed in the endosperm of Jatropha curcas. Curcin can inhibit growth of mouse sarcoma-180 cells. At a curcin concentration of 100 μg/ml, mouse sarcoma-180 cell growth was inhibited by over 40% after seven days of incubation. Acridine orange staining and flow cytometry analysis also showed that the curcin could induce apoptosis of mouse sarcoma-180 cells. These observations provide a possible explanation for the anti-tumor properties of curcin.     

蓖麻不同部位叶柄毒蛋白含量的测定

试验以蓖麻为研究对象,优化从叶柄中提取蛋白的过程,利用BCA试剂盒、UVwin5紫外软件V5．1．0、BandScan蛋白定量分析软件相结合的方法对蓖麻组培苗不同部位的叶柄中毒蛋白的含量进行测定．为研究蓖麻毒蛋白在蓖麻组织培养植株不同部位的分布情况奠定基础。结果表明：从总体上看,蓖麻叶柄中的毒蛋白的含量与叶位呈正比,即随着叶位的升高,叶柄中的毒蛋白含量增加。