QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定紫花地丁中82种农药多残留

采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)，优选最佳QuEChERS样品前处理方法，建立了紫花地丁Viola yedoensis中82种农药残留的快速筛查和定量检测方法。通过正交试验设计9种组合，研究4种不同吸附剂(PSA、C₁₈、GCB和SiO₂)对紫花地丁净化效果的影响。紫花地丁样品分别经800 mg PSA、3 200 mg C₁₈、1 600 mg GCB和1 600 mg SiO₂提取与净化，采用phenomenex DOD-4475-AN C₁₈色谱柱分离，0.1%甲酸(含10 mmol/L甲酸铵)-乙腈混合溶液进行梯度洗脱，标准曲线法定量。结果表明:82种农药在相应的线性范围内，色谱响应值与对应的质量浓度间均呈良好的线性关系(r ≥ 0.99)，检出限(LOD)均在0.3~5 μg/kg之间，定量限(LOQ)均在1~20 μg/kg之间。在0.02、0.05和0.1 mg/kg 3个添加水平下，大多数农药的平均回收率介于70%~111%之间，相对标准偏差(RSD，n = 6)小于19%。该方法操作简单、准确、高效，可满足紫花地丁中82种农药残留同时检测的要求。     

紫花地丁水浸提液对草地早熟禾和高羊茅的化感作用研究

以紫花地丁为材料,采用室内生物测定法研究紫花地丁水浸提液对草地早熟禾和高羊茅种子萌发、幼苗生长及生理指标的化感作用,并采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对紫花地丁水浸提液化学成分进行了分析.结果表明:紫花地丁水浸提液对草地早熟禾和高羊茅种子萌发、幼苗生长和生理均有明显的化感作用,其作用程度与草坪草种类和水浸提液浓度有关.各浓度紫花地丁水浸提液对草地早熟禾和高羊茅发芽指标均有显著的抑制作用,最大种子发芽抑制率分别达到100％和97.16％;对草地早熟禾根长、苗高和单株重均表现出抑制作用,低浓度水浸提液对高羊茅苗高和单株重表现为促进作用;对草地早熟禾和高羊茅幼苗SOD、POD、CAT活性以及MDA含量均表现出促进作用,对可溶性蛋白含量表现为抑制作用.紫花地丁水浸提液中鉴定出28种化合物,主要成分是2,3-二氢苯并呋喃(8.83％)、4-羟基-3,5,6-三甲基-4-(3-氧代-1-丁烯基)-2-环己烯-1-酮(5.79％)、4-(3-羟丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮(4.32％)、3-氧代-β-紫罗兰酮(4.10％)和松酒(2.67％)等.     

紫花地丁的研究概况

对紫花地丁本草考证、分类鉴别、栽培技术、化学成分、开发利用的研究情况作简要综述，为进一步对其研究提供参考，同时对紫花地丁的研究前景提出自己的一些看法。     

紫花地丁开放花与闭锁花的发育及可溶性糖与淀粉含量的研究

紫花地丁(Viola philippica)为典型的两型花自花受精植物,具有开放花和闭锁花混合繁育系统。通过对开放花和闭锁花花芽形态发育的比较发现:开放花与闭锁花在花芽发育早期形态相似,4轮花器官原基均正常发生。出现明显差异的时期为4轮花器官原基形成以后,小孢子发育时期为产孢细胞阶段,开放花的5个花瓣与5枚雄蕊继续发育,每个雄蕊有4个花药室;而闭锁花只有2枚雄蕊继续发育,每个雄蕊有2个花药室,其余雄蕊与所有的花瓣依然为器官原基状态,不再发育。通过对花芽与叶片可溶性糖与淀粉含量的检测发现,花器官原基形成之后,开放花与闭锁花形态出现明显差异阶段开始,随着花芽的发育,可溶性糖与淀粉含量均呈上升趋势,且开放花花芽中的含量均明显高于对应发育阶段闭锁花花芽;而开放花植株的叶片可溶性糖与淀粉含量均低于闭锁花植株叶片,说明开放花所需要的能量高于闭锁花,推测可溶性糖与淀粉含量的差异与两型花发育有一定的关系。     

地被植物紫花地丁的应用研究

对野生地被植物紫花地丁分别以播种、分株2种繁殖方式进行试验,观察其发芽、生长及习性。结果表明紫花地丁地面覆盖效果好、耐荫,适合本地区生长;叶形、花色美观,各方面抗性较强,可粗放管理,是难得的优良地被品种,值得大力推广。     

紫花地丁的组织培养和植株再生

以未成熟种子萌发的子叶和下胚轴为外植体建立了紫花地丁的组织培养及植株再生体系，结果表明最适愈伤组织诱导培养基为MS＋2，4-D 0．5mg／L＋6．BA0．5mg／L或者MS＋2．4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，愈伤组织诱导率可达100％，将生长良好的愈伤组织转入分化培养基可诱导芽或根的分化，其中诱导芽的最适培养基为MS＋6-BA1mg／L＋2。4-D0．5mg／L，诱导根的最适培养基为MS＋2，4-D1mg／L＋6-BA 0．2mg／L，两种器官分化途径均能有效再生成苗。     

药用植物紫花地丁的分子鉴定及其亲缘关系研究

运用RAPD技术对传统药用植物紫花地丁（Viola yedoensis）及其7个近缘种进行了分析,筛选出的6个随机引物在8个种39份材料中共扩增出163个位点,其中161个位点具有多态性,占98.7%;在扩增产物中有7条特异性扩增条带可用于紫花地丁的鉴定。根据RAPD结果计算的各种间遗传距离的范围为0.022 7-0.424 4,斑叶堇菜与细距堇菜的亲缘关系最近,它们间的遗传距离最小（0.022 7）,而与紫花地丁遗传距离最近的是早开堇菜,为0.147 1。在所研究的类群中,维西堇菜与裂叶堇菜的遗传距离最大（0.424 4）。根据遗传距离所作的聚类分析结果与紫花地丁等8种植物的形态分化相一致,此外,同一种的不同个体总是先聚在一起,反映了种内不同个体在遗传组成上相对一致性。研究结果表明,RAPD在种内是相对稳定的,能快速、准确地应用于紫花地丁的分子鉴定及其与近缘类群关系的研究。     

中西结合治家畜荨麻疹

荨麻疹俗称风疹、遍身黄,是一种过敏性反应疾病,以皮肤发生许多圆形或扁平、界线明显的丘疹为特征,发病迅速、消退快,多见于马、牛,猪也时有发生。治疗本病各地经验很多,自1972年以     

蒲公英紫花地丁汤治奶牛乳房肿块

患乳房肿块的奶牛发病乳区肿大．无热无痛或者只有轻微反应：触诊检查乳房内有大小不等的肿块．病程长的病例．可以发现整个发病乳区均有硬肿块．质地坚实．弹性减弱．