缺素对3种豆类植物幼苗生长发育的影响

研究多种缺素培养条件下,晋绿豆8号、晋豆19和小红芸豆等3种豆科植物表现出的营养缺乏症状和生理特性变化,为大田栽培的营养诊断和施肥提供理论依据。采用溶液培养法,设全素与缺氮、磷、钾、钙、镁、硫、铁8个处理组,培养期间每天对植株表型进行实时观察且每7 d测量植株的鲜质量,培养结束时测定并计算各植株的根冠比、根系活力、生长速率和叶绿素含量。结果表明,3种豆科植物的幼苗在缺素培养条件下症状出现的时间、程度、顺序有一定差异;同种植物幼苗在不同缺素条件下的敏感性及反应程度均不同,不同植物幼苗在同种缺素条件下的反应也有所差异,但总体来说表现较为相似;缺素培养7 d后缺素植株普遍较全素植株生长缓慢,第28天时生长基本停滞;全素培养时植株高大,叶片大而鲜绿,挺立,腋芽生长明显;不同缺素培养的植株,总体较为矮小、叶片较小而薄、叶色发黄或深绿,而且萎蔫下垂,腋芽生长不明显,此外还表现出一些特殊的缺素症状。对比3种豆科植物幼苗的根冠比可知,三者均是缺氮处理的根冠比最大,全素处理的最小,缺硫、缺钾的仅大于全素处理。缺素处理对3种豆科植物的幼苗生长速率影响极显著;晋绿豆8号幼苗的生长速率对氮、磷、钾、镁较为敏感,缺钾植株的生长速率最小;晋豆19幼苗的生长速率对氮、钙、铁、镁较为敏感,缺钙植株的生长速率最小;小红芸豆幼苗的生长速率对氮、磷、钾、钙较为敏感,缺氮植株的生长速率最小。缺素处理对3种豆科植物的幼苗根系活力均有显著影响;晋绿豆8号幼苗的根系活力对氮、镁、硫较为敏感,晋豆19幼苗的根系活力对氮、磷、铁较为敏感,小红芸豆幼苗的根系活力对氮、硫、铁较为敏感,三者均对氮的敏感性最强,即缺氮植株的根系活力最小。缺素处理对3种豆科植物幼苗的叶绿素含量影响极显著,其幼苗的叶绿素含量对氮、镁、硫较为敏感,对氮的敏感性最强,即缺氮植株的叶绿素含量最小,而全素处理的叶绿素含量最大。     

福建薏苡品种新陈种子活力的比较试验研究

薏苡种子油分含量较高,不耐贮藏。试验以福建省认定的4个薏苡品种的种子为材料,研究了一般贮藏条件下贮藏1年的陈种子与新收种子的发芽情况,结果表明:在发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数等方面,新收种子显著高于陈种子;而在苗高、幼苗干重与鲜重、电导率等方面,二者没有显著差异。     

混合盐碱胁迫对板蓝根种子萌发的影响

将氯化钠(NaCl)、硫酸钠(Na_2SO_4)2种中性盐和碳酸氢钠(NaHCO_3)、碳酸钠(Na_2CO_3)2种碱性盐按不同比例混合,设置pH值为7.2～10.34的5组碱胁迫处理,每组从20～200 mmol/L设定8种不同盐浓度,以蒸馏水处理为对照,测定40种混合盐碱胁迫条件下板蓝根种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数等指标,以明确混合盐碱胁迫对板蓝根种子萌发的影响。结果表明,盐浓度小于20 mmol/L、pH值为7.30的低浓度盐碱胁迫对板蓝根种子萌发具有一定的促进作用,发芽率、发芽势、活力指数有所增加;盐浓度为80 mmol/L、pH值为7.30～10.24时胁迫处理的板蓝根种子发芽率由88%下降到3%,pH值为7.96、盐浓度为20～200 mmol/L时胁迫处理的板蓝根种子发芽率由94%下降到0%,说明高浓度盐碱胁迫对板蓝根种子萌发有明显的抑制作用;盐度与pH值对板蓝根种子萌发的抑制有极显著的交互作用(P0.01)。     

不同温度、空气湿度及保存方式对番茄花粉活力的影响

研究不同温度、空气湿度及不同保存方式对番茄花粉活力的影响,以番茄钱江金珠的父本花粉为材料,采用TTC染色法进行番茄花粉活力的测定。结果表明,4个温度梯度上,15~25 ℃是较好的制种环境,特别是20~25 ℃效果最好,当温度超过30 ℃时,由于父本花粉活力的下降,制种产量将受到影响;在4个空气湿度梯度上,花粉活力都普遍在83.9%及以上,基本能满足实际制种的需要;在5个保存方式上,室内常温及冷藏柜保存方式只能保持5 d左右的花粉活力,冷冻柜、常温除湿柜、玻璃器皿+干燥剂保存方式在20 d时还能保存93.9%~97.2%的活力,特别是冷冻柜储存能保持60 d,此保存方式最有利于保存番茄花粉活力。     

人溶菌酶密码子优化及其在牛乳腺细胞中高效表达

【目的】分析牛乳腺中7种主要乳蛋白基因密码子使用偏好性,筛选高频密码子和低频密码子,依据其对人溶菌酶基因进行密码子局部优化和全局优化,通过牛乳腺上皮细胞等多种细胞对优化效果进行分析评价,为提高重组人溶菌酶表达量,开发新型、高效、安全的重组人溶菌酶提供理论依据。【方法】利用CodonW和EMBOSS等软件对7种主要牛乳蛋白和人溶菌酶基因密码子偏好进行生物信息学分析,筛选牛乳蛋白基因高频、低频密码子并根据牛乳蛋白基因密码子使用偏好对人溶菌酶基因翻译起始区前22位密码子（LYZop22）和全局密码子(LYZop)分别进行优化。构建人溶菌酶-荧光素酶融合表达载体（pGL3-LYZcw/op22/op）和人溶菌酶过表达载体（pcDNA-LYZcw/op22/op）,将上述载体分别转染牛乳腺上皮细胞(BMEC)、牛成纤维细胞（BFFC）和C127小鼠乳腺上皮细胞等3种细胞,通过荧光素酶、实时荧光定量PCR及Western-blot等方法检测密码子优化对溶菌酶表达的影响。【结果】牛乳蛋白基因密码子偏好以GC结尾,GC3s平均含量为0.537±0.062,而人溶菌酶GC3s含量为0.407,偏好以AT结尾;聚类结果表明,牛乳中酪蛋白与乳清蛋白类基因在密码子使用偏好性上也存在一定差异。依据筛选获得的牛主要乳蛋白基因5个高频密码子（RSCU>1.5）和7个低频密码子（RSCU<0.5）对人溶菌酶基因密码子进行优化并转染多种细胞进行表达效果分析。荧光素酶分析发现,相比野生型溶菌酶密码子（LYZcw）,翻译起始区密码子优化类型LYZop22分别在BMEC、BFFC细胞中提高1.48倍（P<0.01）和1.30倍（P>0.05）;而全局密码子优化类型LYZop分别在BMEC、BFFC中提高2.2倍（P<0.01）和2.44倍（P<0.01）,说明密码子优化能明显提高人溶菌酶在多种细胞中表达量。实时荧光定量PCR结果表明,LYZop22相比LYZcw在BMEC和BFFC细胞中分别提高了2.08倍（P<0.05）和1.5倍（P>0.05）,而LYZop则分别提高了22倍（P<0.01）和17.8倍（P<0.01）,mRNA表达水平与密码子优化后的mRNA二级结构稳定性呈正相关。Western-blot结果也进一步表明,密码子优化后的LYZop22和LYZop能明显提高重组人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞中的表达量。上述结果表明,根据牛乳腺中主要乳蛋白基因密码子使用偏好进行密码子优化,能显著提高人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞及成纤维细胞中的表达量,且溶菌酶基因全局密码子优化效果优于翻译起始区密码子优化效果。【结论】通过生物信息学分析获得了牛乳蛋白基因使密码子使用偏好及高低频密码子;依据牛乳蛋白密码子使用偏好性对人溶菌酶密码子优化能显著提高重组人溶菌酶mRNA水平和蛋白水平的表达量,为今后利用生物反应器高效生产重组人溶菌酶奠定基础。     

球毛壳菌与枯草芽孢杆菌组合对抗黄瓜枯萎病防御酶活性的影响

黄瓜枯萎病是一种毁灭性的土传真菌病害,其病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum),在黄瓜整个生长周期均可发生。本试验研究球毛壳菌(Chaetomium globosum)菌株ND35与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株J2组合对黄瓜苗期枯萎病的防治效果,并对生防菌处理条件下黄瓜的根系活力、防御酶活性及防御酶相关基因表达进行初步研究。结果显示,球毛壳菌ND35处理对黄瓜枯萎病的防效为25.36%,枯草芽孢杆菌J2处理对黄瓜枯萎病的防效为54.27%,菌株ND35与菌株J2组合处理对黄瓜枯萎病防效达到70.02%。病原菌胁迫下,生防菌组合处理的黄瓜叶片CAT、SOD、POD、PAL和PPO活性明显提高,峰值分别达91.60、3 239.15、165.80、201.03、256.38 U/gFW;与上述酶活力相关的酶活基因相对表达水平峰值分别为2.94、2.39、5.01、4.49和7.96,分别达到病原菌处理下酶活基因表达量的3.27倍、6.98倍、98%、5.27倍、 2.31倍。组合处理下黄瓜根系活力、平均防御酶活性和相关酶活基因表达水平总体高于单一生防菌处理。综之,生防菌组合对黄瓜枯萎病的防治效果高于单一生防菌防治效果。该结果可为复合微生物防治黄瓜苗期枯萎病提供理论支持。     

不同贮运时间对中华绒螯蟹成蟹活力和肝胰腺营养品质的影响

为研究不同贮运时间对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)成蟹活力和肝胰腺营养品质的影响,通过模拟电商贮运条件,采用活体解剖和生化分析法,对贮运24、48和72 h的中华绒螯蟹活力进行统计和评价,并比较了肝胰腺的基本营养成分、氨基酸和脂肪酸组成。结果显示:贮运24 h的中华绒螯蟹未见死亡,48 h的死亡率为10.0%,72 h的死亡率为40.0%;中华绒螯蟹活力随贮运时间延长而减弱,其中贮运24 h和48 h的活力依旧强盛,而72 h则活力低迷;水分、粗脂肪和肝胰腺指数等营养指标没有随着贮运时间的延长而发生显著变化,但贮运48 h后的粗蛋白含量下降显著,贮运72 h后的灰分含量也下降显著;在检测的17种氨基酸中,有14种氨基酸的含量在贮运24 h后显著下降,而在检测的24种脂肪酸中,只有1种脂肪酸的含量在贮运24 h后显著下降。本研究表明当前电商环境下的中华绒螯蟹最佳贮运时间为0～24 h,超过24 h后河蟹的成活率和营养品质将明显下降。     

不同浓度浓硫酸破除野生大豆种子硬实的研究

一年生野生大豆存在硬实现象,必须经过适当处理破除硬实从而正常萌发.该研究采用浓硫酸酸蚀处理,对野生大豆种子进行了破除硬实试验.结果表明,浓硫酸酸蚀有明显的效果,可利用其进行大量种子的处理,但同时对大豆种子根的伤害率也随着酸蚀时间的增加而增加,出现无主根芽、根部粗大等畸形根,应加以注意.综合来看,酸蚀55min是破除野生大豆种子硬实的最佳处理条件.