脯氨酸羟化酶GhP4H2在棉花纤维发育中的功能研究

阿拉伯半乳聚糖蛋白(arabinogalactan proteins,AGP)在棉花纤维发育过程中发挥重要作用。AGP由富含羟脯氨酸的主链蛋白和大量Ⅱ型阿拉伯半乳聚糖(arabinogalactan,AG)侧链组成,其合成过程要经历2次翻译后修饰,首先是氨基酸主链上的脯氨酸被脯氨酸羟化酶(prolyl-4-hydroxylases,P4H)羟基化,随后在糖基转移酶(glycosyltransferases,GT)催化作用下将阿拉伯半乳聚糖或寡糖添加到羟脯氨酸残基上。我们前期利用P4Hs的抑制剂处理棉花离体胚发现,棉纤维伸长受到抑制,暗示P4H参与棉纤维生长发育过程。为深入研究P4H在棉纤维发育中的功能,我们从棉花中分离鉴定了1个在棉纤维发育过程中高量表达的脯氨酸羟化酶基因GhP4H2。本研究分别构建了GhP4H2过表达和RNA interference(RNAi)载体,通过农杆菌介导法转化棉花,获得转基因植株,发现过表达转基因棉花株系T₁~T₃代成熟棉纤维变短,AGP含量增加,AG多糖侧链也发生变化。对过表达转基因植株和野生型植株棉纤维的转录组分析表明,GhP4H2正调控包括AGP在内的细胞壁糖蛋白基因的表达。基于以上研究,我们推测GhP4H2可能主要通过影响AGP糖链组分调控棉纤维生长发育。     

AG和AGPs对大白菜和普通白菜（小白菜）小孢子胚状体诱导及成苗的影响

以3个耐抽薹大白菜和3个普通白菜（小白菜）一代杂种为试材进行小孢子培养,研究阿拉伯半乳聚糖（AG）和阿拉伯半乳糖蛋白（AGPs）对大白菜和普通白菜小孢子胚状体诱导及其成苗的影响。结果表明：在NLN-13培养基中添加10 mg?L-1AG、10 mg?L-1AGPs或10 mg?L-1 AG+10 mg?L-1 AGPs,可以促进大白菜和普通白菜小孢子胚状体发生及直接成苗。