转基因甘蔗BtG-2的T-DNA侧翼序列分析及其转化事件特异性检测

转基因甘蔗BtG-2是利用农杆菌介导法把Cry1Ac-2A-gna融合抗虫基因导入‘新台糖22号’的转基因甘蔗株系,具有良好的抗虫特性和农艺性状。为了明确转基因甘蔗BtG-2的分子特征及其检测方法,推进其生物安全性评价工作,以BtG-2的T2代为研究材料,利用Southern杂交检测外源基因在转基因甘蔗基因组内的拷贝数;利用染色体步移技术分离外源基因在甘蔗基因组中插入位点的侧翼序列,并建立了该转化体高效灵敏的特异性PCR检测方法。结果表明：Southern杂交检测证明外源T-DNA以单拷贝方式插入BtG-2株系;经过3次的热不对称巢式PCR扩增,获得外源基因T-DNA左边侧翼序列984 bp和右边侧翼序列705 bp;以这2个序列和相应的T-DNA的左右端序列分别设计3对检测引物对,建立了BtG-2株系的转化事件特异性PCR检测方法,扩增效率最高的引物对LS011/LA451和RS160/RA588分别扩增到440 bp和428 bp的特异片段。其中T-DNA左侧设计的LS011/LA451检测引物对扩增的灵敏度高、特异性强,能够在甘蔗BtG-2基因组DNA相对含量为0.1%的模板中检测出转基因目的成分,相当于9个单倍体基因组拷贝数。本研究完成了转基因株系BtG-2的分子特征及其转化事件特异性检测,为该转基因甘蔗及其衍生产品的检测和身份识别提供技术依据。     

发展农业经济为农民增收的几点建议

山东、河南等省的菜农利用冬暖大棚栽培越冬茬架豆角，10月播种，新年上市，可获得可观的经济效益，每667平方米平均产5000千克以上，产值达2万余元。     

单壁篱架改棚篱架提高葡萄产量

单壁篱架改棚篱架提高葡萄产量康和元余小清（贵州省金华果树蔬菜场５５００２２）我场现有葡萄园２０ｈｍ２（公顷），主栽品种为抗病性较强、品质优良、丰产性好的水晶，均采用单篱架式栽培，多主蔓扇形整枝，存在问题是第１道铁丝架面较接近地表，潮湿阴蔽，病害较重，...     

柿果贮藏法

1　室内堆藏法　选择通风阴凉干燥的窑洞或空房 ,打扫干净后铺 10～ 2 0 cm厚的稻草 ,然后将选好的柿果轻轻摆于稻草上 3～ 4层。贮藏期间应注意检查 ,发现烂果及时捡出。此法可贮藏至春节。2　露天架藏法　选择阴凉且昼夜温差变化不大的地方 ,用木柱搭 1m高的架 ,上铺竹箔或玉米秆 ,其上再铺10～ 15cm厚的稻草 ,将柿果仔细摆放草上 ,厚度不超过3 0 cm,柿果上面用稻草覆盖保温 ,上设防雨棚 ,以防雨雪渗入 ,引起腐烂。此法可贮至翌年清明节前后。3　自然冻藏法　在背阴凉爽的平地上 ,挖宽、深各3 3 cm,长度依贮果量而定的 4条通风沟 ,沟上和…     

庭院葡萄病虫害防治

庭院葡萄病虫害防治,遵循预防为主,人工防治为辅,尽量少用农药的原则. 1清除病源充分利用庭院充裕的空闲劳力,随时摘除病叶、病果、病枝,减少病源.结合冬季修剪清扫残枝落叶烂果,集中烧掉或深埋.     

葡萄快速成形法

葡萄成形的快慢直接影响栽培者的经济效益，加快葡萄成形，就能早结果，早收益。我们对两种主要整枝形式采取的快速成形技术是：１、篱架多主蔓自然扇形选健壮苗木，留６～７芽剪截。定植穴施底肥１０～１５kg，定植时深栽浅埋（地面下埋４～６芽）。发芽后从地面发出的新梢中选留４～５个。冬季修剪留３～４个枝条，剪留长度约５０～６０cm，第二年枝条呈扇形引绑于铁丝上。发芽后每枝上留３～４个新梢。冬季修剪时粗壮的留８～９个芽，中等的留５～７个芽，生长弱部位低的留３～５个芽。第三年按主、分蔓均匀引绑于铁丝上，芽眼萌发后再在…     

移植苗培育要点

移植．是培育大苗的理想方法．通过移植．可促进侧根、频根的生长。加大了根茎比，起苗时根系不易受伤．栽植成活率高。