国内一种玉米新病害--玉米黑腐病

1999年7月云南省元谋县城郊玉米地发现一种玉米新病害,发病面积大约70hm2.其典型症状表现为植株矮化,节间缩短,叶片密集簇生,叶片上有黄绿相间的条斑.叶鞘上有坏死或腐烂病斑,幼穗腐烂,不实,严重者绝产,颗粒无收.从坏死或腐烂的叶鞘和果穗上可镜检到分生孢子及分生孢子梗.纯化培养后,并按柯赫氏法则进行接种试验,病原鉴定为柔弱无枝孢Acladium tenellum(Berk.& Curt.)Subram.comb.nov..本文对病害症状、病原形态、发病情况等进行了详细研究,确定该病为玉米一种新病害.     

菌寄生真菌纤细齿梗孢一丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶基因OPK1的克隆及序列分析

 Using degenerate PCR and TAIL-PCR, a protein kinase gene OPK1 (Genebank accession No.:EU417815) was cloned from mycoparasite fungi Olpitrichum tenellum. OPK1 has an open reading frame of 2 031 bp interrupted by two introns (108 bp, 84 bp) and putatively encodes a protein of 676 aa. Phylogenetic analysis indicated that OPK1 was most similar to other serine-threonine protein kinase in fungi. Southern blot analysis indicated that OPK1 is present as a single copy in the genome. RT-PCR showed it could be transcribed both in the phase of spore germination and hyphal growth.     

纤细齿梗孢丝氨酸蛋白酶cDNA克隆及其序列分析和表达

纤细齿梗孢Olpitrichum tenellum是一种寄生在轮枝镰孢菌Fusarium verticillioides上的活体营养菌寄生真菌。丝氨酸蛋白酶在菌寄生过程可能起到重要作用。根据丝状真菌丝氨酸蛋白酶的同源保守序列设计简并引物,通过RT-PCR及RACE的方法,克隆得到1845bp的全长cDNA片段。其可读框为1554bp（GenBank登录号为EU368754）,编码517个氨基酸的蛋白质。比对分析发现该蛋白是一种分泌型的丝氨酸蛋白酶,属于丝氨酸蛋白酶S8家族的枯草杆菌蛋白酶subtilisin,具有典型的信号肽-前肽-成熟肽的结构。将该基因可读框除去信号肽插入酵母表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母Pichia pastoris GS115,在甲醇诱导下成功分泌出具有生物活性的重组蛋白酶,诱导120h后酶活性可达153U/ml。重组蛋白酶经DEAE-Sepharose层析进行纯化,SDS-PAGE分析其分子量为39kD。其反应的最适温度为60℃,最适pH为8。     

柔弱无枝孢（Acladium tenellum）引起的玉米新病害研究

 1999年7月云南省元谋县城郊玉米地发现一种玉米新病害,发病面积大约70 hm².其典型症状表现为植株矮化,节间缩短,叶片密集簇生,叶片上有黄绿相间的条斑。叶鞘上有坏死或腐烂病斑,幼穗腐烂,不实,严重者绝产,颗粒无收。从坏死或腐烂的叶鞘和果穗上可镜检到分生孢子及分生孢子梗。纯化培养后,并按柯赫氏法则进行接种试验,病原鉴定为柔弱无枝孢［Acladium tenellum ( Berk. &; Curt.) Subram. comb. nov.］。本文对病害症状、病原形态、发病情况等进行了详细研究, 确定该病为玉米一种新病害。     

无枝孢属一新记录种

报道无枝孢属一国内新记录种 :柔弱无枝孢 [Acladiumtenellum (Berk .&Curt.)Subram .],寄生在禾本科(Gramineae)的玉米 (ZeamaysL .)的茎和叶上。新记录种有描述和附图。研究的标本保存于云南农业大学真菌标本室 (MHYAU)。     

串珠镰刀菌细胞壁多糖激活寄生菌纤细齿梗孢的孢子萌发

 利用碱抽提法从串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)菌丝细胞壁得到多糖粗提物。该多糖提取物可以激活寄生于串珠镰刀菌上的活体寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的孢子萌发,多糖浓度为0.2 mg/m L时,萌发率达80.5%。纤细齿梗孢的孢子仅在存在该多糖提取物的条件下才能萌发,在马铃薯-葡萄糖或葡萄糖-酵母液体培养基上不能萌发,一些糖、氨基酸、无机盐、维生素不能促使其萌发,光也不影响萌发。纤细齿梗孢孢子萌发最适p H是7.0,最适温度25℃。结果表明,串珠镰刀菌菌丝细胞壁多糖可能在激活纤细齿梗孢孢子萌发中起重要作用。     

玉米一新病害中首次大量发现细嫩粉孢菌

 1999年夏季,在云南省元谋县大面积爆发一种严重的玉米新病害,发病面积约1 000 hm²。典型症状表现为植株矮化,节间短缩,叶片密集簇生,叶片上有黄绿色或黄白色条点状病斑。叶鞘上有坏死或腐烂病斑,幼穗腐烂,不实,严重者绝产,颗粒无收。从坏死或腐烂的叶鞘和果穗上可观察到大量的大、小型分生孢子和典型的狼牙棒状分生孢子梗,鉴定为细嫩粉孢菌〔Oidium tenellum ( Berk. &; Curt.) Lind.〕（syn. Rhinotrichum tenellum Berk. &; Curt. and Rhinotrichum cucumerinum Berk. &; Curt.）。该菌在PDA培养基上生长良好,菌丝有分隔,可形成疏丝组织,能产生大量的大、小型分生孢子和典型的狼牙棒状分生孢子梗。这是国内细嫩粉孢菌的首次报道。     

玉米黑腐病的田间防治试验

 从10种供试药剂中筛选4种对玉米黑腐病有效的药剂,于2002年在楚雄州元谋县进行田间防治试验。结果表明,在所用的4种药剂中,防治结果以3%多抗霉素WP效果最好,防治效果为55.5%,每公顷能增产玉米870 kg,比对照增产12%.