都安县秋玉米不同栽培模式小区对比试验研究

玉米生产在全县乡域经济中具有举足轻重的地位,直接关系到农民的切身利益。为了能更好地提高玉米产量和品质,我们对玉米不同栽培模式进行试验,确定了适合都安县玉米生产的栽培模式[1]。试验结果:桂单589秸秆还田免耕、正大619秸秆还田免耕、正大619免耕、桂单589免耕、桂单589翻耕、正大619翻耕,亩干籽产量分别为440.7 kg、441.8 kg、439.0 kg、415.7 kg、411.5 kg、439.3 kg,正大619秸秆还田免耕产量最高。     

小麦蒜氨酸酶基因TaAly1的克隆及表达特征分析

【目的】克隆小麦蒜氨酸酶基因CDs区，并对其进行序列特征分析和实时定量表达检测。【方法】采用电子延伸结合RT-PCR方法，从小麦叶片分离出蒜氨酸酶基因，网络资源分析其序列特征，实时定量PCR技术检测其在不同条件下的表达情况。【结果】克隆到1个小麦蒜氨酸酶基因TaAly1，其开放阅读框全长1 023 bp，编码340个氨基酸，与水稻和玉米蒜氨酸酶基因的同源性为70%，其基因组DNA序列含有3个内含子；TaAly1在小麦幼苗根部几乎不表达，在叶部表达量最高，其次是茎部；植物激素GA、MeJA、SA处理及条锈菌接种和干旱、低温处理，均能诱导该基因的表达量迅速增加。【结论】成功克隆了小麦TaAly1基因的CDs区，该基因可能通过依赖GA、MeJA和SA的信号通路参与小麦与条锈病的互作。     

小麦与条锈菌亲和互作的差减文库构建及初步分析

 【目的】构建小麦与条锈菌亲和互作的差减文库，分离条锈菌侵染小麦过程中的差异表达基因。【方法】以小麦品种水源11和条锈菌相应毒性小种CY31号为材料，构建条锈菌侵染阶段的SSH-cDNA文库，挑选250个阳性克隆测序并进行生物信息学分析。【结果】聚类后得到149条非冗余EST（unigene）。经Blast X比对和功能分类分析，其中50条unigene（33.6%）未找到同源性匹配，25条（16.8%）与未知功能蛋白同源性较高；其余74条功能已知的unigene中，与初级代谢、能量相关的基因分别有13条和10个，占8.7%和6.7%，感病及防御相关的基因有6个约占4.0%；此外，获得两个与病原菌有较高同源性的基因。随后，进一步利用RT-PCR对6个基因的表达模式进行了分析。【结论】成功构建了小麦与条锈菌亲和互作的差减文库，分离出一部分与小麦条锈病发病相关的基因，可用于进一步研究条锈菌侵染过程中特异基因的功能。     

黑龙江省风景区及其周边区域蜱的调查

为了解黑龙江省风景区及附近区域蜱及蜱携带病原的情况,2015年4月,采用布旗法对黑龙江省某风景区及附近的村屯进行了蜱的调查。共采集136只蜱,其中森林革蜱105只和全沟硬蜱31只。表明本区域有蜱的存在,且4月份的主要蜱种为森林革蜱和全沟硬蜱;为进一步进行蜱携带病原的调查提供了信息完备的样品,为当地蜱病的防治提供研究材料,为该景区游客和当地居民的公共卫生安全提供可靠信息。     

固相萃取-高效液相色谱法同时测定水产品中的己烯雌酚和甲基睾丸酮

建立了SPE-HPLC同时测定水产品中己烯雌酚和甲基睾丸酮的方法。样品经乙酸乙酯超声提取,正己烷脱脂,过C18型固相萃取柱净化,以甲醇-0.5%甲酸(70∶30)为流动相,检测波长254 nm,外标法定量。相对标准偏差为3.5%~5.6%,己烯雌酚、甲基睾丸酮的检出限分别为5.0、6.0μg/kg。加标回收率在78%~93%之间。     

Fulicur与Caramba防治小麦赤霉病的效果

室内试验表明:Fulicur与Caramba对小麦赤霉菌的菌丝生长和分生孢子萌发有强烈的抑制作用,效果略高于对照药剂多菌灵;抑制中浓度(EC50)分别为0.47μL/L与0.54μL/L。田间药效测定表明:接种前2d喷药与接种后2d喷药,与对照相比,Fulicur可使小麦赤霉病病情减少80.3%和70.6%,产量增加11.46%与8.03%;Caramba可使小麦赤霉病病情减少80.5%与68.0%,产量增加10.24%与10.28%。初步认为这两种药剂可以作为防治小麦赤霉病的替代品种。     

小麦条锈菌转录因子PsSte12的克隆及生物学分析

【目的】克隆小麦条锈菌PsSte12基因,明确其序列特征、转录活性及其在小麦条锈菌侵染过程中的相对表达量。【方法】采用RT-PCR方法,从小麦条锈菌中获得PsSte12基因,利用生物信息学分析其序列特征,实时定量PCR技术检测其在小麦条锈菌不同侵染阶段的表达特征;借助酵母单杂交系统解析该基因的转录活性。【结果】克隆到1个小麦条锈菌基因PsSte12,该基因序列含有1个全长2 553bp的开放阅读框;基因组DNA序列含有4个内含子,分别位于开放阅读框第281,429,1 512,1 584位,长度分别为73,79,66和68bp。该基因编码蛋白含850个氨基酸,75个正电荷残基和90个负电荷残基。PsSte12与小麦秆锈菌、杨树锈菌、小麦赤霉菌及构巢曲霉菌中同源序列的相似性分别为87.9%,61.53%,24.3%和25.2%;PsSte12在小麦条锈菌侵染后24和36h大量表达,相对表达量分别为对照的61倍和123倍;PsSte12具有转录活性,其N端为转录激活区。【结论】成功克隆了小麦条锈菌STE类型转录因子PsSte12,证实其具有转录活性,在小麦条锈菌侵染早期诱导表达,推测其参与了小麦条锈菌的侵染过程。     

GB/T 22338—2008方法测定水产品中氯霉素残留量存在的不足与探讨

我国国家标准《动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定》(GB/T 22338—2008)规定了对水产品中氯霉素类(CAP、氟甲砜霉素和甲砜霉素)残留测定的气相色谱—质谱(GC-MS)法,但在检测过程中发现加标回收率经常超过100 %,且不稳定,难重复。在实际检测中,应用食品中氯霉素残留量气相色谱质谱联用负化学源法测定的标准操作程序检测水产品中氯霉素的残留量可以获得更为理想的结果,更能满足检测工作需要。文章指出基质效应是造成前一种方法加标回收率偏高的主要原因,详细介绍了后一种方法的前处理过程和实验条件,并对改进的部分进行了探讨。     

条锈菌诱导的小麦EF手钙离子绑定蛋白基因TaCab1的功能初步分析

根据小麦EF手钙离子绑定蛋白(TaCab1)基因序列,利用WMD3软件设计特异的人工mRNA(amiRNA),构建VIGS沉默载体.利用amiRNA-VIGS体系,对小麦的TaCab1基因的功能进行了初步分析.利用Northern blot和实时定量PCR技术分别检测了amiRNA的积累及TaCab1的沉默效率,并利用显微观察技术统计条锈菌侵染小麦后的组织学差异.结果表明,amiRNA可以得到有效的积累,其靶标基因TaCab1可以得到有效的沉默.从表型上看,小麦叶片上条锈菌夏孢子的产孢量也在一定程度上有所降低.组织学观察发现当TaCab1被沉默后,寄主细胞的坏死面积在侵染后期明显增大,条锈菌的菌丝分枝数也明显增多,但菌丝长度明显变短.