甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆及其实时荧光RT-PCR检测

 甘蔗黄叶病毒（Sugarcane yellow leaf virus, SCYLV）引起的甘蔗黄叶病是一种新的全球性病毒病害。本文以YLSCPF1和YLSCPR591为引物,采用RT-PCR方法克隆了甘蔗黄叶病毒福建分离物（CHN-FJ1）外壳蛋白（CP）基因,编码196个氨基酸。分析不同地理来源的SCYLV病毒分离物cp基因核苷酸及其推导编码的氨基酸序列,同源性达95%以上。根据cp基因的保守序列,设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了SCYLV的TaqMan实时荧光RT-PCR方法。结果表明,检测下限为初始质粒模板DNA 1 000拷贝/μL（约3.61 fg/μL）,比常规PCR方法的灵敏度提高100倍。检测甘蔗花叶病毒、宿根矮化病菌和黑穗病菌,没有典型的扩增曲线和无Ct值。应用实时荧光RT-PCR、常规RT-PCR和组织印迹免疫杂交（TBIA）对田间甘蔗叶片样品进行检测,阳性检出率分别为100%、61.5%和69.2%,表明该方法比常规RT-PCR和TBIA具有更高的灵敏度,适合于对SCYLV的检测。     

甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖体系的建立

甘蔗黄蚜(Longiunguis sacchari Zehntner)是多种甘蔗病毒病的传播虫媒,建立甘蔗黄蚜室内人工饲养体系,可以为开展甘蔗黄蚜的抗药性及甘蔗品种抗性的鉴定提供均一性的虫源。该研究筛选甘蔗黄蚜不同的消毒时间和不同的接种方式,经过人工饲养条件的优化,建立了一个稳定、快速、高效的人工饲养繁殖体系。田间采集带有甘蔗黄蚜的甘蔗叶片,经0.1%Hg Cl2消毒4~10min,然后接种于无菌甘蔗组培瓶苗中,在(22±1)℃、光照强度3000lx、光照时长10~12h条件下培养,每隔10~12d转接1次,即可经年持续繁殖无菌、均一性好的甘蔗黄蚜。     

甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。     

甘蔗品种抗旱性光合生理指标及其综合评价

利用相关、主成分、聚类和判别分析, 研究有关生理生化指标与甘蔗抗旱性关系. 结果表明: (1)中度水分胁迫下, MDA含量和PMP有不同程度地提高, 而Fv/Fm、 Fv/Fo、ΔFv/Fo、ΔFv/Ft和T1/2 有不同程度地降低, 变化的幅度因供试品种基因型而异. (2)PMP与MDA含量呈极显著正相关, 而与Fv/Fm、 Fv/Fo及ΔFv/Fo呈显著负相关; Fv/Fm与F     

影响籼稻成熟胚愈伤组织植株再生频率的几个因素

以优良籼稻品种的成熟胚为材料，探讨不同浓度ABA、愈伤组织继代次数、培养时间以及干燥处理等因素对籼稻成熟胚愈伤组织再生能力的影响。结果表明：（1）在分化培养基上添加3.0～5.0 mg/L ABA对促进胚性愈伤组织的形成及胚状体发生，提高植株再生能力有显著作用。（2）继代3次、培养20～30 d的成熟胚愈伤组织，质量较好，分     

甘蔗黄叶病毒复制酶基因的克隆及序列分析

 The gene of RNA-dependent RNA polymerase (RdRP) was cloned by RT-PCR from Sugarcane yellow leaf virus-Fuzhou isolate (CHN-FJ1) and then cloned into pMD18-T vector. The sequence showed that the fragment comprised 1 212 nucleotides including part gene of ORF1 and ORF2. The ORF2 was involved the RdRP gene consisted of 995 nucleotides and encoded putative protein of 331 amino acids. Compared the nucleo-tide sequence and encoded putative protein of CHN-FJ1 with the other isolates from different countries, they shared the homology above 92.0%. Phylogenetic tree suggested that the sixteen isolates were classified into four types according to the amino acid sequence of the RdRP. One of the groups contained CHN-FJ1 and the other isolates from China, American, Brazil, Australia and Colombia;however, there was the closest relation between CHN-FJ1 and BRA-YL1 isolate from Brazil.     

甘蔗白条病及其致病菌Xanthomonas albilineans研究进展

由白条黄单胞杆菌Xanthomonas albilineans引起的甘蔗白条病是一种寄生在植物维管组织的系统性细菌病害,在全球多数种植甘蔗的国家或地区普遍发生,对甘蔗产业的发展构成潜在威胁。本研究综述了甘蔗白条病的发生和分布、传播与流行规律以及病原菌生物学与基因组特性、鉴定与检测、遗传多样性和致病机理等方面内容;提出加强抗病种质挖掘与新品种选育推广、加快抗病分子育种进程、切断病害传播途径、加强隔离检验检疫等病害防控策略;此外,评估了该病害在我国蔗区流行暴发的风险,展望今后甘蔗抗病分子育种、病原菌致病机制及其与寄主互作机理等方面的分子基础研究重点与应用前景。     

甘蔗引进新品种的稳定性分析及其利用价值评判

利用AMMI模型和回归模型对国家区试中的"948"项目引进的9个甘蔗新品系的蔗茎产量、甘蔗糖分和含糖量进行稳定性分析,并以这3个性状的表型值,品种稳定性参数、抗性鉴定结果对品种进行综合评价.结果表明,HoCP93-746、RB72-454、CP85-1308、HoCP91-555、"ROC"25、CP89-1509等品种综合性状表现较好,可根据生产需要选择推广应用,并进行合理布局."ROC"26在产量和品质方面表现良好,但中感黑穗病,不宜在黑穗病高发区推广.本研究中的"CP"、"HoCP"系列品种早熟、高糖,且黑穗病、花叶病的抗性强.耐旱性较强,可尝试用作亲本与我国的高产大茎品种杂交选育新品种.     

甘蔗品种伸长期光合特性及冠层光合量的估算

本文在活体测量的基础上，分析了７个甘蔗示范品种和对照种闽糖７０－６１１在不同光合有效辐射（ＰＡＲ）下＋１叶的净光合速率（Ｐｎ）、光呼吸强度（ε）、水分利用效率（ＷＵＥ）的变化情况，并对冠层总的同化量进行估算。结果表明：甘蔗不同品种＋１叶的Ｐｎ随ＰＡＲ变化较大，但冠层总的同化量与单叶的Ｐｎ没有明显的相关性，各品种的光呼吸强度不大，变化在２．２×１０－２－２．５×１０－２μｍｍｏｌ·ｍ－２·ｓ－１之间；ＷＵＥ除福农８９－２０９、福蔗８７－１０与对照品种相当外，其余均比对照种高，且这种差异与Ｐｎ无正相关性。     

甘蔗蔗渣不同蒸煮时间对品质指标化验的影响

甘蔗蔗渣处理是甘蔗品质性状化验分析的关键一步。研究用恒温水浴锅作热源时蔗渣蒸煮液不同蒸煮时间对甘蔗品质指标的影响。结果表明，不同蒸煮时间对甘蔗蔗渣蒸煮液的失水量、锤度、旋光读数有极显著影响，对甘蔗蔗糖分、蔗渣蔗糖分、甘蔗纤维分和蔗渣纤维分没有显著影响、但从不同蒸煮时间的变异系数判断，蔗渣蒸煮2．0h及2．5h的试验处理变异系数较小，因此建议蔗渣蒸煮处理2．0～2.5h为宜。