山羊MC1R基因克隆、表达及其多态性研究

为研究黑色素皮质素受体1(MC1R)基因与山羊毛色形成的相关性,以苏淮山羊和波尔山羊为研究对象,克隆测序获得了山羊MC1R基因编码区全序列,实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)检测其在苏淮山羊和波尔山羊耳组织中的表达水平,DNA池方法筛选其在山羊群体中的SNPs位点。结果发现,MC1R基因在苏淮山羊中全长954 bp,编码317个氨基酸残基。波尔山羊和苏淮山羊MC1R基因核苷酸和氨基酸序列一致性为99.79%和98.77%;系统进化分析发现,波尔山羊与苏淮山羊聚在一起后再与绵羊聚在一起。在苏淮山羊群体中发现183C/T和748T/G 2个突变位点,在波尔山羊群体中检测到701G/A突变。MC1R基因在波尔山羊耳组织中的表达水平高于苏淮山羊,但差异不显著。该研究显示MC1R基因可能在调控山羊毛色形成中发挥一定的作用。     

猪APOBEC3F基因外显子6单核苷酸多态性及其与PRRSV易感性的关联分析

载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3F(APOBEC3F)是有效阻止内源性与外源性反转录病毒复制的新型宿主细胞因子。本文对猪APOBEC3F基因外显子6序列进行扩增和测序,筛选多态性位点,并分析其与PRRSV易感性的相关性。测序发现外显子6存在3个单碱基突变(g.337 T/G、g.341 G/A和g.343 T/C)。针对g.341 G/A建立CRS-PCR-RFLP方法,检测9个猪群193个样本,发现仅在姜曲海猪和梅山猪中有GG(0.79/0.80)和GA(0.21/0.20)基因型,其他7个猪群体只检测到GG基因型。GG基因型猪肺泡巨噬细胞中PRRSV拷贝数在接毒后18h显著高于GA基因型个体(P<0.05)。表明APOBEC3F基因外显子6与猪种PRRSV抗性相关,外显子6的341位点A等位基因更有利于抵抗PRRSV的感染,这为进一步探讨APOBEC3F基因作为猪种PRRSV抗性辅助选育标记提供了试验依据。     

除草剂咪唑烟酸高效降解菌的筛选及其降解性能的研究

经过瓶培养法富集培养,从长期使用咪唑烟酸的非耕地土壤中,分离出两株该除草剂的高效降解菌ZJX-5和ZJX-9,经VITEK-AMS细菌自动鉴定仪对上述两菌株分别进行鉴定为:ZJX-5为荧光假单胞菌Ⅱ型(pseudomonasfluorescenesbiotypeⅡ);ZJX-9为腊状芽孢杆菌(Bacilluscereus)。当原始浓度为100mg·L-1时,其在5d内的降解率分别可达89.40%和95.56%,并研究了单一菌株和混合菌株对咪唑烟酸的降解能力。结果表明,混合菌的降解能力明显优于单一菌株,尤其在咪唑烟酸浓度较高时,混合菌在降解率及耐性方面均比单一菌株明显提高。     

电穿孔法转染猪胎儿成纤维细胞条件优化

以增强型绿色荧光蛋白为报告基因,采用L9(33)正交试验设计,对质粒浓度、电压、脉冲时间等3个因素进行优化,并比较了不同温度处理对转染效率的影响,以及电压对细胞存活率的影响.结果表明,3个因素中质粒浓度对转染效率的影响最大,质粒浓度和电压对转染效率均有显著影响,脉冲时间对转染效率的影响不显著.不同温度处理下的转染效率无显著差异,电压显著影响细胞存活率.质粒浓度40 g/mL、电压280 V、脉冲时间800 s条件下,转染效率最高,为89.8％.     

猪APOBEC3F基因外显子8单核苷酸的多态性及其与猪繁殖和呼吸综合征病毒易感性的关联性

为了研究猪载脂蛋白质B mRNA编辑酶催化多肽3F(APOBEC3F)基因的多态性及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)易感性的影响,对猪APOBEC3F基因外显子3、4、8和内含子3序列进行扩增和测序,筛选多态性位点,分析其与PRRSV易感性的相关性。测序结果发现内含子3的16 bp处发生1个A/G突变和外显子8的5 bp处发生1个G/A突变。针对外显子8的5 bp处发生1个G/A突变建立PCR-RFLP方法,检测9个猪种群共193个样本,发现在定远猪和梅山猪中有GG、GA和AA 3种基因型,在二花脸猪中有GG和GA 2种基因型,其他群体均为GG型。AA基因型猪肺泡巨噬细胞中PRRSV拷贝数在接毒后12 h显著高于GG基因型,极显著高于GA基因型。表明APOBEC3F基因外显子8与PRRSV抗性相关,外显子8的5 bp处G等位基因更有利于抵抗PRRSV的感染。     

林地常用除草剂三元混用的配方控制

应用三元二次通用正交旋转组合设计对林业常用除草剂农达（Glyphosate)、阿特拉津（Atrazine)及百草敌（Dicamba)三元混用的最佳配比进行了初步探讨，建立了以株防效为目标函数的数字模型。经相关检验分析，模型的拟合度很好，能够用来进行预报。应用DPS软件进行模拟寻优，在防效大于80%限定条件下，共选出25个最佳配比方案，在95%最佳配比分布区间内，其配方控制范围分别为：64.874-72.270mg/m^2；61.745-74.513mg/m^2；7.068-9.258mg/m^2。     

除草剂咪唑烟酸在土壤中的微生物降解研究

咪唑烟酸 (其英文通用名称为imazapyr,商品名有arsenal、assault、灭草烟、阿时拉等 )是由原美国氰胺公司研制的一种具有较长残留活性的广谱性苗后除草剂[1 ] 。它对一年生和多年生的禾本科、阔叶科、莎草科杂草及多种灌木和落叶树有活性。自 2 0世纪 80年代中期商品化后 ,咪唑烟酸已被广泛用于森林、铁路、公路等多种类型的非耕地除草。目前 ,咪唑烟酸已经在世界上 2 2个国家登记使用 ,是目前国外使用量较大的一个灭生性除草剂品种[2 ] 。关于该除草剂环境归趋的研究 ,引起了世界各国的关注。1 9 92年美国Illinois大学Cox等[3 ] 经过研究…     

乌骨绵羊NR5A2基因编码区序列克隆及特征分析

为了研究NR5A2基因在乌骨绵羊中的序列特征,利用PCR和克隆测序技术获得乌骨绵羊NR5A2基因的外显子序列,用DNAMAN软件和DNAStar软件对序列进行比对和拼接、运用Clustal软件与其他物种相应序列进行同源比对分析,MEGA5.1软件用来构建哺乳动物NR5A2蛋白质系统进化树,用DNA池方法对其编码区序列的SNPs位点进行筛选。结果显示:乌骨绵羊NR5A2基因编码区全长1 488 bp,共编码495个氨基酸;乌骨绵羊的NR5A2基因编码区核苷酸序列与湖羊和牛的同源性分别为99.87%和85.51%;氨基酸序列的一致性分别为99.41%和89.66%。与湖羊相比,乌骨绵羊NR5A2基因编码区共发现3个单碱基突变(C1069A、C1419T和G1485A),其中C1069A位点突变引起了氨基酸的改变,从亮氨酸变为异亮氨酸。在乌骨绵羊的编码区现了一个单核苷酸突变位点G999C。     

小鼠卵母细胞减数分裂期间组蛋白乙酰化及其对卵母细胞成熟质量的影响

为了解卵母细胞减数分裂期间组蛋白乙酰化规律,以组蛋白H4K12的乙酰化为标记,利用免疫荧光技术,研究了小鼠卵母细胞减数分裂期间组蛋白乙酰化的变化规律及其对卵母细胞成熟质量的影响。结果表明:小鼠生发泡期卵母细胞中组蛋白高度乙酰化,在第1及第2次减数分裂中期则发生去乙酰化;II型组蛋白去乙酰基酶(HDACs)负责调控减数分裂过程中的组蛋白乙酰化;减数分裂过程中存在组蛋白乙酰化/去乙酰化的动态变化;特异性抑制II型HDACs不影响卵母细胞成熟、纺锤体形态和染色体排列,但广谱性抑制HDACs后会导致卵母细胞染色体排列发生改变。     

药用保健型蔬菜蒲公英栽培技术

蒲公英具备药用和食用的功能,有望在保健蔬菜方面进行深层次开发,因野生蒲公英资源连年枯竭,发展人工栽培势在必行本文以蒲公英为例详细论述了药用保健型蔬菜的栽培技术.