MTT法检测鸡脾脏和外周血NK细胞杀伤活性的条件优化

选取不同日龄的SPF鸡和肉鸡,用贴壁法从血液和脾脏分离出NK细胞作为效应细胞,选择瘤细胞MDCC-MSB1和MDCC-MSBCU147分别作为靶细胞,二者按比例混合,孵育,利用MTT法检测靶细胞的活力反映效应细胞对靶细胞的杀伤活性,并对效靶比、作用时间进行比较.结果显示,MSB-1和CU147均可作为NK细胞良好的靶细胞,但CU147更稳定;效靶比为20:1～50:1,作用时间8～16 h杀伤效果稳定;50%DMF-20%SDS混合物作为裂解液能够对结晶彻底溶解,优于其他溶解试剂.     

羊白细胞介素-18成熟蛋白的酵母表达和生物学活性研究

为了研究重组羊白细胞介素(gIL)-18在酵母系统中的高效表达,进一步阐明该重组蛋白的生物学活性,以含有gIL-18基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,构建重组表达质粒pPICZ-gIL-18,转化于毕赤酵母GSll5,以甲醇诱导表达,经sDS-PAGE和western blot分析证实了重组蛋白的表达,分泌的重组gIL-18表达量为100 mg/L.经纯化后用MTT法和MDBK-VSV法检测表达的重组IL-18体外生物活性,利用免疫试验检测了重组蛋白对羊痘疫苗的免疫增强作用.实验结果表明,该蛋白具有诱导MDBK细胞分泌IFN-γ和刺激PBMC增殖的生物学活性,比活性为1.5×105 u/mg.体外具有增强羊痘疫苗的活性.毕赤酵母分泌表达的重组gIL-18具有良好的生物学活性,为gIL-18作为免疫佐剂和免疫治疗剂的大规模应用奠定了基础.     

禽肠炎沙门菌外膜蛋白OMPX基因的克隆及其在乳酸乳球菌中的表达

以禽肠炎沙门菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到外膜蛋白OMPX基因片段,并将其克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36e中,构建重组质粒pMG36e-OMPX。将重组质粒电转入乳酸乳球菌MG1614,得到重组基因工程乳酸乳球菌,在GM17培养基中培养12h后,经SDS-PAGE分析显示表达的蛋白约为16 000,与预期相符,经Western-blot检测表明,表达的蛋白具有良好的反应特异性。     

肉仔鸡传染性脑脊髓炎的诊疗

1发病情况某专业户从某种鸡场一次性购进两品代肉仔鸡1800只，4日龄开始陆续发病，21日龄后逐渐停止发病，截止35日龄，发病率和死亡率分别为76％和41％左右。水平调查得知，其他养鸡户同一批肉鸡苗均出现同样症状；垂直调查得知，该种鸡已发病，产蛋率下降40％左右。发病后曾用维生素民、B。、E、鱼肝油、亚硝酸钠及抗生素等药物治疗，均无效果。少数自然耐过的病鸡生长迟滞或发育不良，平均体重明显低于正常水平。2临床症状病鸡初期表现精神沉郁、两眼呆滞，反应迟钝，继而出现共济失调、脚软、站立不稳，不愿走动。常以附关节着地呈犬坐…     

种鸡垂直传播细菌病的发生与防控

本文结合作者承担的国家"十一五"科技支撑计划项目"家禽及其制品安全生产的质量控制技术研究"课题实施成果,重点介绍鸡沙门氏菌、大肠杆菌及奇异变形杆菌的垂直传播细菌病的发生情况及其综合防控措施.     

入秋时节谨防家禽氨气急性中毒

进入十月份以后,气候变化无常,特别进入晚秋后,夜间温度比较低,禽舍需要密闭以防寒保暖。由于此前我们经历了一个长达3、4个月的防暑降温过程,采用了喷雾降温等方法,这势必会使鸡舍内湿度比较大,大量的有害气体以吸附的方式存在于鸡舍内。特别是在高密度饲养的蛋鸡、蛋鸭、豁鹅、肉用种鸡及肉仔鸡舍内,夜间相对突然地密闭鸡舍,往往使舍内空气不能正常流通而蓄积大量有害气体,其中氨气占绝大比重。当氨气浓度超过20ppm时,即可引起中毒,严重时可使家禽急性中毒死亡。1临诊症状急性中毒时,最初,病禽呼吸加快、流泪、食欲下降继而兴奋不安,可视…     

白色假丝酵母性乳房炎的病原分离鉴定及治疗

对使用中药和多种常规抗生素治疗均无效的患乳房炎奶牛 ,无菌采集奶样进行病原学鉴定 ,病原菌为白色假丝酵母菌 ;药敏试验发现酮康唑敏感 ,用敏感药物酮康唑对患牛治疗后 ,症状明显减轻 ,产奶量回升     

牛海绵状脑病

牛海绵状脑病(Bovine Spongiform Encephalopathy,BSE),又称"疯牛病”,是由传染因子引起的牛的一种进行性神经系统疾病[1].该病的主要特征是牛脑发生海棉状病变,并伴随大脑功能退化,临床表现为神经错乱、运动失调、痴呆和死亡.     

用菌体凝集抑制试验诊断羊伪结核病

将羊伪结核棒状杆菌用吐温－８０等化学试剂进行处理，使菌体分散的单个细胞均匀地悬浮于溶媒中，制备为抗原。然后用其与已知的阳性及阴性血清进行试验，探讨诊断羊伪结核病的快速、简便方法，即菌体凝集抑制试验。结果，供治疗试验用的３０只羊在人工接种伪结核棒状杆菌后的第２￣１３周，有２８只羊的血清一直呈现非凝集或沙粒状凝集，即阳性反应；２只羊的血清一直呈现絮状凝集阴性反应。该期间的患羊检出率为９３％。而由屠宰场     

断奶猪多系统衰弱综合征

断奶猪多系统衰弱综合征 (ＰｏｓｔｗｅａｎｉｎｇＭｕｌｔｉ ｓｙｓｔｅｍｉｃＷａｓｔｉｎｇＳｙｎｄｒｏｍｅ ,ＰＭＷＳ)是由猪圆环病毒 2型 (ＰｏｒｃｉｎｅＣｉｒｃｏｖｉｒｕｓ - 2 ,ＰＣＶ - 2 )引起的一种断奶后猪以全身性消耗为主要特征的新传染病。临床上主要表现为呼吸困难、腹泻、贫血、体表淋巴结肿大及渐进性消瘦 ,病变特征为全身器官组织 ,尤其是淋巴组织的炎症变化。该病严重影响猪的生长发育 ,1 991年首先发现于加拿大西部的猪群 ,此后 ,美国、法国、西班牙、德国、英国、意大利、丹麦、荷兰、新西兰、北爱尔兰、墨西哥、…