鸭疫里默氏杆菌巢式PCR检测方法的建立

为建立一种更加准确、敏感的鸭疫里默氏杆菌检测方法,根据鸭疫里默氏杆菌16S rRNA基因序列设计2对巢式PCR引物,在完成最佳反应条件筛选、特异性、敏感性、重复性试验的基础上,建立巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR对1、2、10、X型鸭疫里默氏杆菌的16S rRNA都能扩增出特异性片段,而对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门菌、鸭源金黄色葡萄球菌的基因组不能扩增出特异性片段,DNA最小检测量为0.392 fg/μL,是常规PCR的1 000倍.该巢式PCR方法具有快速、敏感、特异、通用的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定.     

水稻防早衰工程喷施叶面肥小区试验总结

在粮食生产中,不少农户只注重前期施肥,后期基本不施或少施肥料,特别是在水稻幼穗分化后不重视施用穗粒肥,导致早晚稻特别是晚稻出现早衰现象,因此,探索水稻防早衰技术措施,有利于提高水稻产量和增加农民收入。2013年,在两安乡进行了晚稻喷施叶面肥小区试验,现将试验结果整理总结如下。     

鸭坦布苏病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据鸭坦布苏病毒(DTMUV)BYD-1株基因序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立了快速检测DTMUV的实时荧光定量RT-PCR方法。特异性结果显示,DTMUV显示阳性,而3株非鸭坦布苏病毒均显示阴性,说明该方法具有高度特异性。其表达式为Ct=-3.32×lg Copy number+41.151,R2=0.998,R循环效率Eff%=100.072,DNA拷贝数在101～108范围内检测曲线有良好的线性关系,对质粒标准品最低检测限为1.0×101拷贝/μL,变异系数低于5%。利用该方法分别对攻毒感染具有典型鸭新型黄病毒病临床症状和病理变化的蛋鸭的脾脏和肝脏组织进行检测,阳性率均为100%,而用本实验室建立的普通RT-PCR方法检测的阳性检测率为85%(17/20)和75%(15/20)。建立的方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强的特点,可用DTMUV早期感染的快速诊断和流行病学调查。     

猪PHGPx基因真核表达重组质粒的构建与鉴定

从猪睾丸中提取RNA后,采用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）方法获得PHGPxcDNA。扩增的目的基因片段经琼脂糖凝胶电泳回收,与pMD18-T载体连接,转入E．coli DH5α中筛选鉴定重组子。将质粒经酶切鉴定后,把酶切下的目的基因cDNA进一步克隆到真核表达载体pGAPZ旺A中,经PCR及序列鉴定,证实插入载...     

基肥中碳铵用量对稻草还田免耕抛秧的影响

稻草还田免耕抛秧在同等的施肥水平下,基肥增施氮肥(碳铵)有利于水稻的生长发育,可加快立苗、分蘖的速度,增加有效穗及粒数,从而获得增产。在稻草还田免耕抛秧每公顷总施纯氮150 kg水平下,基肥以每公顷施碳铵300~450 kg为宜。     

绿肥还田水稻免耕抛秧栽培增产效果

试验结果表明,绿肥还田免耕抛秧栽培比无绿肥免耕抛秧增产237.0~307.5 kg/hm2,比绿肥还田常耕抛秧增产303.0~393.0 kg/hm2。增产的主要原因是绿肥还田免耕可增加土壤表层有机质含量,提高土壤肥力,改良土质,从而提高有效穗数、结实率和千粒重,进而提高产量。     

红花草田水稻免耕栽培及增产效益探讨

绿肥田免耕抛秧栽培与无绿肥对照相比平均每hm^2增收稻谷975kg；与绿肥犁耙田抛秧栽培相比，平均每hm^2增稻谷98．25kg。增产的主要原因是绿肥田免耕增加土壤表层有机质含量，提高土壤肥力，改良土质。     

黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及致病性研究

黄喉拟水龟(Mauremysmutica),两广地区俗称为石龟,分类上隶属爬行纲、龟鳖目、龟科、拟水龟属。在我国主要分布在长江以南、江苏、浙江以及台湾等地,国外多产于越南、日本等地。黄喉拟水龟具有较高的食用和药用价值,其肉质细嫩、营养丰富、味道鲜美,具有滋阴补血功能。近年来,由于黄喉拟水龟在市场上的需求量逐渐变大,因此养殖规模也随     

一株脱氨除臭菌的筛选鉴定及其脱氮性能研究

用感官法初筛选出18株细菌,再通过定性复筛试验,最后从鸡粪中分离出1株具有明显脱氨除臭作用的细菌JNX-8;经菌落形态特征观察、生化试验、16S rDNA测序等过程,鉴定为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。对该菌脱氮性能进行了研究,确定其对硝基氮和氨氮的去除率分别达到51.71%和66.28%。结果显示,菌株JNX-8在鸡粪发酵除臭中具有良好的应用前景。     

珠三角地区鸭疫里默菌主要生物学特性研究

为明确珠三角地区鸭疫里默菌的主要生物学特性,对从珠三角地区分离到的87株鸭疫里默菌进行生化试验、玻片凝集试验、药敏试验、致病性检测及16 S rRNA基因测序,以比较相互间的生物学特性及其同源性.结果表明,分离株的生化特性基本一致;血清型以2型为主,占65.5％,其次是1型,占14.9％,此外还有16株未定型,占18.4％;代表株对雏鸭具有很强的致病性,对头孢类药物（头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、头孢唑林）非常敏感,而对常用抗菌药物（青霉素、氨苄西林、氯霉素、链霉素、卡那霉素）普遍耐药;本试验检测的19株代表菌的16 S rRNA基因序列的同源性较高,16 S rRNA基因与菌株的血清型和致病性无直接关系.