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1.
用3对分别针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7、ORF5和ORF5的PCR引物N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2进行RT-PCR,检测PRRSV,从其敏感性、特异性和临床样品检出率等方面进行比较,在此基础上进一步建立一步法RT-PCR检测方法。结果显示:3对引物对PRRSV均有很高的特异性;应用N1/N2引物病毒最低检测量为7.9 TC ID50,而AdGP5.1/AdGP5.2引物和RFLP5.1/RFLP5.2引物PCR最低检测量为79 TC ID50;运用N1/N2、AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物分别进行RT-PCR扩增检测临床样品,PRRSV检出率分别为28/48、27/48和25/48,且用AdGP5.1/AdGP5.2和RFLP5.1/RFLP5.2引物检测的阳性样品,用N1/N2引物检测也都呈阳性。运用N1/N2引物,通过一步法RT-PCR成功地从PRRSV S1株中扩增出374 bp的目的基因片段。结果表明,用N1/N2引物扩增PRRSV目的基因,其敏感性和临床样品检出率更高,更适合临床样品PRRSV的检测。  相似文献
2.
鸡肠上皮细胞的分离及原代培养方法   总被引:11,自引:0,他引:11  
取18日龄鸡胚,研究鸡肠上皮细胞(IEC)分离及原代培养的方法。结果表明:较好的分离条件是肠组织经0.1g/L中性蛋白酶和300U/mL胶原酶Ⅺ联合消化;较佳的培养条件是细胞在含2.5%~5%胎牛血清的DMEM培养基中,39℃、5%~7.5%CO2下培养,IEC可在1~2d贴壁,6~7d明显增殖,11~12d汇合成片。  相似文献
3.
不同激活方法对猪体外成熟卵母细胞孤雌发育的影响   总被引:10,自引:1,他引:9  
研究了猪体外成熟卵母细胞的电激活、离子霉素激活和乙醇激活的方法。3种不同激活方法筛选试验表明,猪卵母细胞电激活最佳参数为电场强度130V/min,脉冲时程80μs的1次脉冲激活,即130V/mm-80μs-1次,其囊胚(发育)率为18.92%±8.48%(P>0.05);离子霉素激活的最佳条件为15μmol/L、激活时间40min,其囊胚率为21.27%±8.54%(P>0.05);乙醇激活最佳参数以9%乙醇激活处理3min,囊胚率为13.33%±7.64%。进一步对比试验表明,电激活和离子霉素激活处理的囊胚率和囊胚细胞数无显著差异(P>0.05),电激活的卵裂率明显高于乙醇激活(P<0.05),而囊胚率和细胞数差异不显著(P>0.05)。  相似文献
4.
用分光光度法测定不同品种桑枝总黄酮含量   总被引:10,自引:0,他引:10  
为了探讨分光光度法在桑枝总黄酮定量分析中的适用性,从溶液浓度和吸光度之间的线性关系、重复性、精密度及加样回收率等方面,对不同品种桑枝中总黄酮的测定方法进行了系统研究,该方法准确可靠,测定值稳定。在波长为510 nm时,测定了春秋两季采收的22个不同桑树品种的桑枝中总黄酮含量,含量差异明显。综合而言,部分桑品种的春秋桑枝中总黄酮含量相对稳定且较高。  相似文献
5.
泰妙菌素的体外抑菌活性与一般毒性研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
采用二倍稀释法、改良寇式法和蓄积系数法测定了泰妙菌素的体外抑菌活性、急性毒性和蓄积毒性。体外抑菌试验结果显示,泰妙菌素对猪、鸡支原体、猪链球菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为0 015、0 125、0 5ug/mL,呈现较好的杀菌效果,且较磷酸泰乐菌素效果好;而对大肠杆菌、禽巴氏杆菌效果较差。一般毒性试验结果显示,泰妙菌素对小鼠、鸡的经口LD50分别为1 58g/kg和2 19g/kg。按国际急性毒性分级标准可判断为实际无毒,蓄积系数K>5,为弱蓄积性,且小鼠对其不具有耐受性。  相似文献
6.
马鹿胚胎移植技术的试验研究   总被引:7,自引:2,他引:5  
以新疆塔河马鹿为供体鹿和受体鹿 ,经过同期发情、超数排卵、人工授精、胚胎采集和胚胎移植后 ,供体鹿 3年共超排 2 7头 ,获可用胚 116枚 ,同期发情处理受体母鹿 2 2 8头 ,发情母鹿 171头 ,同期发情率 75 % ,采用人工输精后 ,进行胚胎移植 ,其中人工授精受胎率平均达 5 5 .7% ,移植 6 8头 ,受胎数 36头 ,鲜胚移植受胎率 5 2 .9%。  相似文献
7.
鸡MC3R基因多态性及其与屠体和肉质性状的相关性   总被引:7,自引:0,他引:7  
以四川大恒家禽育种有限公司和四川省畜牧科学研究院培育的5个新品系纯系和3个杂交系鸡群为试验材料,对MC3R基因进行PCR扩增,采用PCR-SSCP技术结合测序分析了MC3R基因在上述鸡群中的多态性.结果表明8个鸡群中存在A 1 424 G的突变.经过基因型与屠体性状的关联分析得知各基因型除与半净膛率(SEP)和腿肌率(LMP)无显著影响(P>0.05)外,对其它屠体性状则有显著(P<0.05)和极显著影响(P<0.01);与肉质性状相关分析结果显示,1 424位点仅对粗蛋白(CP)含量和肌内脂肪含量(IMF)影响显著(P<0.05).  相似文献
8.
PRRSV抗体竞争ELISA检测方法的建立与标准化研究   总被引:6,自引:1,他引:5  
以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)基因的原核表达产物重组N蛋白为包被抗原,利用兔抗重组N蛋白血清和PRRS猪血清竞争该抗原,建立间接竞争ELISA方法检测PRRS抗体。经研究确定重组N蛋白的包被浓度为0.3μg/mL,检测血清不用稀释。兔抗重组N蛋白血清的工作浓度为1:3000,酶标抗体的工作浓度为1:10000,包被液为0.05mol/L、pH9.6的碳酸盐缓冲液。该方法特异性强。稳定性和重复性好,整个检测过程可在3h内完成。以IDEXX试剂盒的检测结果为参照标准。该方法的敏感性为79.75%,特异性为90.9%,符合率为83.59%。将该方法按试剂盒要求标准化。4℃放置5个月,检测效果不变。  相似文献
9.
家畜伊维菌素中毒的研究   总被引:6,自引:3,他引:3       下载免费PDF全文
作者综述了伊维菌素的杀虫及中毒机理,临床应用的安全性及犬、猫、羊、兔、牛的中毒剂量、临床症状、病理变化、预防、治疗措施,并说明了阿维菌素、伊维菌素和多拉菌素的应用。认为家畜中毒的原因是超量使用该药物;除敏感犬种外,伊维菌素是当前防治畜禽寄生虫病的最佳药物之一,同时指出对发生中毒和过敏的动物,早期发现,治疗得当,则治愈率高。  相似文献
10.
生长猪植酸酶的磷当量研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
本文旨在研究饲粮中添加植酸酶对植酸磷利用的影响,确定生长猪的植酸酶磷当量。本试验采用单因素试验设计,以NaH2PO4.2H2O提供外源无机磷,同时添加植酸酶,设计1个低磷基础日粮、4个加磷日粮和3个加酶日粮,分别提供0.4、0.8、1.2、1.6g/kg的有效磷或500、750、1000FTU/kg植酸酶。选择96头体重22kg左右的杜长大三元杂交猪,随机等分到8个处理中。通过回归分析,建立响应指标(猪趾骨折断强度和趾骨灰分磷含量)与外源磷添加量之间的线性关系,进而确定植酸酶的磷当量值。结果表明:(1)随外源磷和植酸酶水平的提高,试验猪生产性能明显改善(P<0.05),趾骨灰分磷含量和血磷水平都极显著地升高(P<0.01);(2)无机磷添加水平与响应指标之间存在较强线性关系:y=10.79x 27.23(x-添加磷(g/kg),y-趾骨强度(kg),R2=0.92);y=1.44x 6.86(x-添加磷(g/kg),y-灰分磷(%),R2=0.99);(3)植酸酶的磷当量值与日粮中植酸酶和无机磷水平密切相关,同时也受相应指标种类的影响。本试验条件下,500、750、1000FTU/kg植酸酶分别可替代1kg玉米-豆粕日粮中0.09g、0.44g和0.72g(折断强度)或0.23g、0.58g、1.06g(灰分磷)无机磷。  相似文献
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