乙肝表面抗原与促黄体激素释放激素的融合基因5‘端改造及其在大 …

应用聚全酶链反应（ＰＣＲ）对畜型和禽型两个融合基因ＨＢｓＡｇ／ＬＨＲＨ的５’端分别作了改造，切去了融合基因起始密码ＡＴＧ前一段非编码序列６１个碱基，将改造后的融合基因插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｅ １１ ＫＳ＾＋质粒中。琼脂糖凝胶电泳以及序列分析均表明改造和克隆成功。将改造后的融合基因克隆到含Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ强启动子的表达载体ｐＥＴ１５ｂ中，经异丙基硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导，在Ｅ．ｃｏｌｉＤＥ     

转移抗猪瘟病毒核酶基因兔的研究

采用显微注射法，将构建的绵羊金属疏因（ｏＭＴ）基因启动子与抗猪瘟病毒核酶（ＨＣＶ－Ｒｉｂｏｚｙｍｅ．ＨＲ）基因融合的质粒ｐＭＨＲ＿（３２）线性ＤＮＡ分子约２００～４００个基因拷贝导入兔原核胚的雄原核中，１５９枚导入基因胚移植给９只受体兔，产仔２２只，移植成活率为１３．８％。２２只仔兔经聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和核酸探针杂交检测，６只体内整合有外源目的基因，整合率为２７．３％。再用１００个半数反应量（ＲＩＤ＿（５０））的猪瘟病毒Ｃ系兔化弱毒兔体攻毒，４只外源基因整合的实验兔能完全或部分抵抗ＨＣＶ弱毒攻击，不产生或无明显发热反应；而对照兔和６只ＨＲ基因未整合的实验兔不能抵抗ＨＣＶ弱毒攻击，出现特征性的稽留热型。逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＲＮＡ探针杂交检测４只转基因兔，两只肝中表达出ｏＭＴ－ＨＲｍＲＮＡ。认为微注射导入的外源ＨＲ基因在兔体内得到了整合和表达     

微波快速ELISA检测猪瘟抗体

微波快速ELISA检测猪瘟抗体@吴耀录@龚晓明...     

免疫佐剂研究的现状与趋势

免疫佐剂研究的现状与趋势龚晓明，吴耀妹（南京农业大学动物医学院南京，２１００９５）现行使用的许多有效疫苗大多是８０年代以前研制的产品。这些疫苗并非高度纯化的制剂，但能激发保护性免疫应答而无严重的副作用。随后，随着安全性标准的提高，疫苗研制的进程逐渐缓...     

兔异源蛋白与自身蛋白作为载体制备克伦特罗抗血清

将β２激动剂克伦特罗（ＣＬ）偶氮化后分别连接牛血清白蛋白（ＢＳＡ），兔血清白蛋白（ＲＳＡ）和兔ＩｇＧ（ＲＧＧ），分别用上述连接物免疫３组新西兰兔。经琼脂扩散试验，间接ＥＬＩＳＡ和间接抑制ＥＬＩＳＡ检测表明，ＢＳ，ＲＳＡ和ＲＧＧ均能作为载体制备ＣＬ抗血清。ＢＳＡ作为载体制备的抗血清含有大量针对载体的抗体，面ＲＳＡ和ＲＧＧ作为载体制德的抗血清不含有针对载体的抗体，显示自身蛋白可作为载体，且优于异源蛋白     

乙肝表面抗原与促黄体激素释放激素的融合基因5''''端改造及其在大肠杆菌中的表达

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对畜型和禽型两个融合基因ＨＢｓＡｇ／ＬＨＲＨ的５′端分别作了改造，切去了融合基因起始密码ＡＴＧ前一段非编码序列６１个碱基，将改造后的融合基因插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｅ１１ＫＳ＋质粒中。琼脂糖凝胶电泳以及序列分析均表明改造和克隆成功。将改造后的融合基因克隆到含Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ强启动子的表达载体ｐＥＴ１５ｂ中，经异丙基硫代半乳糖苷（ＩＰＴＧ）诱导，在Ｅ．ｃｏｌｉＤＥ３中表达，表达量占菌体总蛋白的１０％，以兔抗ＬＨＲＨ抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，出现阳性反应带。用抗ＨＢｓＡｇ抗体作ＥＬＩＳＡ检测，结果稀释１×１０－６时仍为阳性反应。     

酶联免疫吸附测定法检测克伦特罗

用自制的β激动剂克伦特罗（ＣＬ）抗血清建立其酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。抗血清最佳稀释度为１ｖ１００００,免疫检测范围为１５．６μｇ／ｍ ｌ～１．９０ｎｇ／ｍ ｌ。用该法检测了饲料、尿样与脏器等样品,表明该法简便、特异和灵敏,具有实用价值     

PCR技术鉴定中国株和西德株兔出血症病毒核酸

ＰＣＲ技术鉴定中国株和西德株兔出血症病毒核酸作者在先行构建兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）中国分离ＮＪ株ｃＤＮＡ克隆的研究基础上，采用酶切鉴定和地高辛标记ＮＪ株病毒核酸探针杂交鉴定，从已获得的ｃＤＮＡ克隆中筛选一克隆ＰＧＤ－１２．把其中插入片段亚克隆Ｍ１３噬...     

兔出血症病毒在细胞培养和组织中的形态发生

在电镜下系统地观察了感染后的细胞培养和组织中兔出血症病毒（ Ｒ Ｈ Ｄ Ｖ）的形态发生。感染早期，在细胞核内可见电子致密颗粒（１５ ｎｍ ）和未成熟的病毒颗粒 （２５ ｎｍ ）。中期，在细胞核和胞浆内出现大量成熟的病毒颗粒（３４ ｎｍ ），并发现部分核内病毒通过扩大的核膜孔、核膜溶解扩大的核孔和乳头状突起的核膜向胞浆释放。感染末期，核染色质消失，核内大量感染病毒清淅可见。最终细胞溶解，病毒颗粒释放至细胞间隙。提示 Ｒ Ｈ Ｄ Ｖ 是在核内复制和装配的，应归属于细小病毒科。本试验结果不排除同时存在另一种小 Ｒ Ｎ Ａ 病毒。