不同探针结构对应用微阵列技术检测兰花病毒结果的影响

根据黄瓜花叶病毒(CMV)、齿舌兰环斑病毒(ORSV)、建兰花叶病毒(Cym MV)、辣椒褪绿病毒(Ca CV)和落葵皱纹花叶病毒(Ba RMV)等5种危害较大的兰花病毒多重RT-PCR扩增产物序列,分别设计了5′端不同poly(d T)长短的探针,分别是:带poly(d T)15 spacer结构、带poly(d T)5 spacer结构、不带poly(d T)spacer结构,比较了3种探针紫外交联后的杂交效果。结果表明:5′端带poly(d T)15结构的探针杂交效率最高,而5′端不带poly(d T)结构的探针杂交效果极差,提示在探针设计时应选择在5′端带poly(d T)15结构以便获得更好的杂交效果。     

湖南口岸进口盐渍生牛皮检疫处理效果评价

为了全面了解硫酰氟熏蒸对进口生皮携带病媒生物的检疫处理效果,对口岸集装箱内的进口生皮检疫处理前后成蝇死亡情况进行观察,对蝇蛹、蛆杀灭情况进行孵化培养和对比分析。结果表明,(1)熏蒸前蛹、蛆均有较高的孵化率,熏蒸后蛹、蛆的孵化率相对低;(2)硫酰氟对集装箱内活蝇杀灭作用明显有效,对蛹、蛆有部分杀灭作用,对积水中蛹、蛆杀灭作用有限;(3)熏蒸前不同取样部位与试验结果无相关性。并提出了加强对进口盐渍生皮的风险分析和分类管理、继续开展检疫处理评价、开展加工厂蝇类本底调查等建议措施。     

线粒体DNA分子技术在斑点叉尾鮰物种鉴定中的应用

[目的]应对出口水产品国外技术贸易壁垒,建立一种能被国际上普遍接受的进出口水产品中斑点叉尾鮰物种真伪鉴定方法,该方法也有助于我国水产品行业商业欺诈认定裁决工作。[方法]采用酚-氯仿抽提法提取水产品中基因组DNA,利用自行设计的引物D-loop F/D-loopR,对斑点叉尾鮰及大口鲇、革胡子鲶、鲤和鲫等物种的线粒体DNA D-loop和COⅠ区进行PCR扩增测序比对,根据斑点叉尾鮰物种D-loop区的序列寻找其特异性酶切位点,对D-loop区进行酶切鉴定。[结果]]建立的DNA提取技术可以满足水产品中线粒体D-loop扩增的要求,斑点叉尾鮰D-loop对应的最佳退火温度为54.8℃,其在D-loop序列的200 bp处有一特异性酶切位点EcoRⅠ。[结论]建立的斑点叉尾鮰产品中DNA提取、扩增技术及EcoRⅠ特异性酶切图谱方法,不需测序就能够将斑点叉尾鮰与其他近似物种区分开来,该方法适于进出口水产品贸易中斑点叉尾鮰产品的物种真伪鉴定。     

植物重金属耐受分子机理的研究进展

重金属污染对我国经济发展、人身健康造成重大负面影响,已经成为当今研究热点.综述了近年来植物对重金属耐受分子机理的研究进展,从植物对重金属的吸收、转运及隔离在液泡中等过程的发生的多种相关蛋白的应答.通过基因工程方法调控这些蛋白编码基因表达,来提高植物对重金属耐受性,降低重金属对植物的毒害.     

TaqMan探针法实时荧光定量RT-PCR检测番茄斑驳花叶病毒

番茄斑驳花叶病毒（tomato mottle mosaic virus,ToMMV）为近年来发现的一种烟草花叶病毒属新成员,是茄科作物上危害严重的主要病毒之一,近几年EPPO全球数据库报道多个国家从进境辣椒和番茄种子中截获该病毒。为防止番茄斑驳花叶病毒通过种子种苗进行传播扩散,本文根据该病毒GenBank中不同分离株外壳蛋白（coat protein,CP）基因保守序列设计特异性引物和探针,建立了TaqMan探针法实时荧光定量RT-PCR检测ToMMV的方法。结果表明,本检测方法特异性强,对烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus,TMV）、番茄花叶病毒（tomato mosaic virus,ToMV）、番茄褐色皱果病毒（tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV）、黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）、辣椒轻斑驳病毒（pepper mild mottle virus,PMMoV）、番茄环斑病毒（tomato ringspot virus,TomRSV）6种病毒均无交叉反...     

半巢式-RT-Realtime PCR检测李痘病毒

李痘病毒(Plum pox virus,PPV)是我国重要的植物检疫性有害生物。本研究根据PPV中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了3条PCR引物和1条TaqMan探针,建立了半巢式-RT-RealtimePCR检测PPV的方法。该方法有机地结合了巢式PCR和实时荧光PCR技术;3条引物形成的2套PCR体系相互验证,有效提高了结果的准确性;荧光探针有效提高了检测的灵敏度。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达37fg/μL植物总RNA。     

MALDI-TOF-MS鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌的方法研究

利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对3株水稻细菌性叶鞘褐腐病菌（Pseudomonas fuscovaginae）标准菌株进行蛋白质指纹图谱分析，将不同培养基、不同培养时间和不同样品处理方法等条件下所收集到的质谱峰进行比较，筛选出最佳实验方法，收集20张参考图谱与水稻常见病原细菌质谱峰进行比较，建立该病菌的蛋白质指纹图谱。结果显示用金氏 B 培养基分离纯化后经提取处理法进行 MALDI-TOF-MS 分析为最佳的实验方法。该方法对检测与鉴定水稻细菌性叶鞘褐腐病菌具有较高的灵敏度和重复性，且分析过程简单快速，有一定的应用价值。     

几种进境植物检疫对象介绍

1.菜豆象菜豆象是一种世界性分布、危害严重的仓储害虫,属鞘翅目豆象科,以幼虫在豆粒中蛀食,危害菜豆属的植物,也危害豇豆、兵豆、鹰嘴豆、木豆、蚕豆和豌豆等.主要借助被侵染的豆类种子通过贸易和引种进行传播,卵、幼虫、蛹和成虫都可能被携带传播.     

农业植物检疫及有害生物防控

概述农业植物检疫概念、范围以及检疫性有害生物,分析农业植物检疫及有害生物防控的现状,阐述农业植物检疫及有害生物防控的措施。     

黄花机场桔小实蝇截获特征及检疫对策

桔小实蝇是一种世界性检疫害虫。对近年来黄花机场截获的疫情数据分析表明,桔小实蝇是我国南方周边国家和地区果实蝇群落结构中的优势种群,传播该虫的主要水果有莲雾、释迦、芒果、芭乐。每年3-11月是该虫的截获高峰期。