饲料中沙丁胺醇快速检测技术研究

本实验在现有的克伦特罗检测系统上建立了沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测体系。结果表明,该方法在饲料中沙丁胺醇的检测中完全可行。     

牛副结核分枝杆菌LAMP快速检测方法的建立

为建立牛副结核分枝杆菌(MAP)的快速检测方法,本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术,以MAP的IS900基因序列为靶基因设计特异性引物,建立了MAP特异性的LAMP快速检测方法。经反应条件优化,检测结果显示,建立的LAMP检测方法具有良好的特异性,最低见测量为0.53 pg;与其他病原菌无任何交叉反应。临床样品检测与行业标准的符合率为100%。该LAMP检测方法可以用于MAP的常规检疫。     

溶藻弧菌相关分离株的分子及VITEK鉴定

哈维群弧菌是弧菌属的核心菌群,包括溶藻弧菌在内的6个种在表型和遗传型上均十分相似,要准确鉴定各种有一定难度。看家基因的研究及生化鉴定系统的出现为弧菌鉴定提供了多种方法,本文比较了16S rRNA基因、toxR基因和pyrH基因以及VITEK 2 COMPACT GN鉴定卡对溶藻弧菌相关分离株的分辨力。哈维群弧菌基因组内16S rRNA基因是多拷贝的,且拷贝间序列差异大于种间差异,不适用于种的鉴定。单拷贝基因toxR和pyrH序列种内差异均小于种间差异。基于toxR基因相似性比较可清楚地将18个疑似溶藻弧菌分离株和5个参比株归并到4个种;toxR基因系统发育学分析也显示,哈维群弧菌各种独立地聚类分支,且溶藻弧菌种内存在两个明显的聚类分支,说明两个分支的溶藻弧菌具有独立的进化方向。pyrH基因的相似性比较和发育学分析也得到类似的结果,但pyrH基因具有较强的保守性,因而分辨力稍低于toxR基因。VITEK 2 COMPACT GN鉴定卡在鉴定溶藻弧菌时也有一定的错误率,且鉴定谱较窄。因此,建议在实际应用中采用toxR基因比对作为溶藻弧菌快速鉴定的主要手段,可再选用pyrH基因对鉴定结果进行验证。     

尿样中沙丁胺醇的检测

利用沙丁胺醇和克伦特罗在分子结构上非常相似的特点,克伦特罗抗体与沙丁胺醇反应中具有一定的交叉性,在现有的克伦特罗检测系统的基础上建立沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测体系。试验表明该方法完全可以应用于尿样中沙丁胺醇的检测。     

小麦线条花叶病毒研究进展

小麦线条花叶病毒是一种重要的检疫性有害生物,能危害许多单子叶粮食作物,造成巨大的经济损失。该病毒在世界范围内分布广泛,欧洲、北美洲、大洋洲等多国均有报道发生;而在中国,2000年后鲜有相关报道。近几年,伴随麦类、玉米等粮食的大量进口,小麦线条花叶病毒随之传入的风险剧增。本文从生物学特性、发病特点、检测技术及CP蛋白功能研究进展等方面对小麦线条花叶病毒进行了系统性的概述,旨在为相关部门的检疫与监管提供科学依据。     

赤羽病病毒套式RT-PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank中已发表的赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了3条特异性引物,建立了检测AKAV的套式RT-PCR方法。特异性试验表明,该方法可以特异扩增出AKAV的S基因片段,但从牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)等13种对照病毒中均不能扩增出目的条带。敏感性试验表明,套式RT-PCR能够扩增10-5稀释度的病毒RNA(核酸含量约1.18 ng/μL),比普通RT-PCR高出1 000倍。用此方法检测130份奶牛血清样品与1份流产胎儿病料,均未检测到阳性样本,但AKAV在血清模拟样品中可被有效检出。研究结果表明,该方法灵敏、特异,为AKAV的检测提供了一个快速、有效的手段。     

进口奶牛感染铜绿假单胞菌的微生物学诊断

从病死奶牛脏器中分离出1株革兰氏阴性短杆菌,通过染色镜检、培养特性分析及生化鉴定,证明为铜绿假单胞菌。动物试验证明,分离株对小鼠有较强的致病性,并从死亡鼠体内分离到相应细菌。药敏试验结果显示,铜绿假单胞菌对多种抗菌药物有耐药性。     

外来船舶压舱水中雷氏普罗威登菌的分离鉴定

<正>船舶压舱水有携带的致病微生物、有害水生动植物及其他有害物质,一旦在港口随意排放,将破坏当地的生态环境。目前人们对压舱水的研究侧重于藻类,致病微生物的研究较少,只有对大肠菌群以及致病性弧菌的报道。本文首次报道在入境的外轮压舱水中分离出雷氏普罗威登菌。     

阻断酶联免疫吸附试验检测赤羽病

赤羽病(Akabanedisease)又称阿卡斑病,是牛、羊的一种以流产、早产、死胎、胎儿畸形、木乃伊、新生胎儿发生关节弯曲积水性无脑综合症为特征的病毒性传染病。本病的病原赤羽病病毒是布尼安病毒科(Bunvaviridae)、辛波(Simbu)病毒群的成员之一。最早在澳大利亚暴发,后在日本、美国、韩国等国也分离到该病毒。本病的流行对养牛、养羊业的发展构成巨大的威胁,因此该病是我国从澳大利亚进口奶牛必须检测的七种疫病之一。