鸡流行性腹泻病原的分离鉴定及特性研究

用胰蛋白酶处理发病鸡的粪便和肠内容物，接种Marc145细胞，盲传数代后，从山东不同地区发生流行性腹泻的鸡群中分离到轮状病毒，并对分离的轮状病毒的生物学特性和理化特性进行了部分研究。结果表明病毒粒子的形态呈车轮状、大小为70-80nm；其病毒基因组的电泳图谱为5：1：3：2；病毒在Marc145细胞上传到第9代时的TCID50为10^-4.62／0．1mL；该分离株病毒对氯仿、乙醚有抵抗力；对pH3．0处理60min稳定；50℃ 30min能使其感染力下降10^2；1mol／L MgCl2不能增强其对50℃ 60min的抵抗力。动物回归试验中接种两周龄SPF鸡，24h后陆续发病，表现为持续性水样腹泻，与自然发病相同；剖检可见病鸡脱水、小肠内有大量的液体和气泡、肠粘膜变薄；组织学变化为肠绒毛上皮坏死、脱落，绒毛平均长度减少而隐窝深度增加，固有层中淋巴细胞浸润。其临床症状及病理组织学变化与自然发病相同。因此确定发生在山东鸡流行件腹泻的病原为轮状病毒．     

鸡传染性支气管炎病毒793/B RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank已发表的鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）793／BS1基因序列，设计1对引物，扩增891bp特异性核酸片段，建立了检测IBV793／B的RT—PCR方法。特异性试验结果表明，IBV793／B能扩增出891bp的核酸片段，而IBVM41H120H52毒株以及新城疫病毒（NDV）、禽流感病毒（AIV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）均无特异性条带出现。敏感性试验结果表明，该方法的最低检出量为10pg的模板。上述结果表明，本试验所建立的RT—PCR方法敏感性高、特异性强。利用建立的RT—PCR方法对从山东省分离的8株疑似鸡IBV793／B进行检测，结果7株为阳性。该方法的建立为IBV793／B的诊断及流行病学调查提供了可靠的方法。     

免疫荧光技术快速检测鸡轮状病毒的研究

用分离的轮状病毒与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂免疫家兔制备高免血清，分离球蛋白，用荧光素标记，建立荧光抗体快速诊断鸡轮状病毒技术。阴性试验、阳性试验、类症试验表明，建立的荧光抗体诊断技术特异性强、敏感性高，与新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、大肠杆菌不发生交叉反应。人工感染试验结果表明，20日龄SPF鸡感染轮状病毒后12h，肠粘膜深层涂片可出现较强荧光。自然感染检测结果表明，荧光抗体诊断结果与病毒的分离鉴定结果一致，符合率达100％。     

山东省的特种动物养殖业

近几年来 ,山东省特种动物养殖业受到广泛重视 ,成为畜牧业中新兴的一支重要力量。据统计 ,目前全省一定规模的特养企业有 40多家 ,涵盖 6大类 ,30多个品种。山东省特养业受市场行情影响较大 ,规模较小 ,发展不平衡 ,济南以东的地区发展较快 ;不少品种的特养业波动起伏较大 ,行情变化莫测 ,发展存在盲目性 ;特禽类养殖势头良好 ,其他类特养发展缓慢 ,有待开发。1　存在问题1 .1　人们对特养业的认识了解较少　改革开放以来 ,我省畜牧业取得了长足的发展 ,特养业作为畜牧业大家庭中的一员 ,只是畜牧业的有益补充 ,没有把它作为发展的重头戏。…     

鸡轮状病毒的分离鉴定及特性研究

用胰蛋白酶处理发病鸡的粪便和肠内容物，接种Marcl45细胞．盲传数代后．从山东不同地区发生流行性腹泻的鸡群中分离到1株病毒，并对分离病毒的生物学特性和理化特性进行了部分研究。结果表明病毒粒子呈轮状、大小为70～80nm；其病毒基因组的电泳图谱为5：1：3：2；病毒的TCID50为10^-4-19／0．1mL，能被轮状病毒阳性血清所中和；病毒对氯仿、乙醚有抵抗力；对pH3．0处理60min稳定；50℃ 30min能使其感染力下降10^2；1mol／L MgCl2不能增强其对50℃ 60min的抵抗力。接种2周龄SPF鸡．24h后陆续发病，表现为持续性水样腹泻；剖检可见病鸡脱水、小肠内有大量的液体和气泡、肠黏膜变薄；组织学变化表现为肠绒毛坏死、脱落．绒毛平均长度减少而隐窝深度增加，固有层中淋巴细胞浸润。其临床症状及病理组织学变化与自然发病相同。因此确定发生在山东鸡流行性腹泻的病原为A群轮状病毒，该研究为轮状病毒感染的防制提供了理论依据。     

间接ELISA检测新型鸭瘟病毒抗体

以50%饱和度的硫酸铵粗提病毒,再经Sephadex G-200过柱层析纯化了新型鸭瘟病毒,以此作为包被抗原,并用自制油苗免疫雏鸭,获得了高效价的血清抗体,又经过各种条件优化,建立了检测血清抗体的间接ELISA方法.经对不同发病日龄和免疫油苗后雏鸭的血清检测,证明该检测方法有很高的敏感性、特异性和重复性,可作为快速诊断该病的一种可靠方法.     

鸡轮状病毒感染的病理形态学观察

为确定鸡轮状病毒感染的病理变化特点，对自然发病和人工发病轮状病毒感染鸡进行了病理学研究。结果表明，该病特征性的病理剖检变化为肠黏膜脱落出血，呈卡他性炎症表现。特征性组织学变化为小肠绒毛显著缩短，肠腺深度增加；除肠绒毛缩短外，肠上皮还变为扁平或立方形，并伴发坏死、脱落，黏膜充血、水肿与淋巴细胞浸润。电镜观察，肠黏膜上皮细胞的线粒体肿胀，嵴变粗，排列紊乱；粗面内质网及滑面内质网均扩张呈圆形，粗面内质网表面的核糖体部分脱落，胞浆内游离的核糖体减少。     

鸡轮状病毒灭活油乳疫苗的制备与应用研究

利用从发生流行性腹泻的发病鸡中分离的轮状病毒,研制了鸡轮状病毒灭活油乳疫苗,并对该疫苗的安全性及免疫效果进行了测定.结果表明该疫苗安全可靠,注射后对增重、产蛋均无影响.免疫后14 d攻毒保护率可达98%以上,免疫期可维持6个月,4℃保存12个月,10℃～25℃保存3个月,免疫效果不变.对鸡轮状病毒油乳灭活疫苗在山东不同地区进行田间试验和扩大区域试验,结果表明该疫苗性能良好、安全,对蛋鸡、肉鸡、雏鸡的生产性能无明显影响,疫苗接种后保护率可达92%以上,可有效地控制该病的发生.     

鸡大肠杆菌病的治疗试验

根据药敏试验结果 ,对人工发病的大肠杆菌病病鸡进行了治疗试验 ,结果表明 ,达诺沙星 ,环丙沙星对该病治疗效果较好 ,而青霉素、强力霉素效果较差。发病后及时投喂敏感药物治疗效果较好 ,而延期治疗则治疗效果较差     

鹑梭状芽胞杆菌的分离鉴定

用色氨酸磷酸琼脂培养基，采用厌氧培养的方法，对从泰安、菏泽、聊城等地送检的疑似鸡溃生肠炎的病死鸡进行了鹑梭状芽胞杆菌的分离，并对谝菌的培养特性、生化特性、对药物的敏感性、致病性等进行了测定。