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检测实验动物弓形虫感染的两种PCR方法的建立和比较 总被引:5,自引:1,他引:4
为了建立敏感、稳定、特异的PCR检测体系,用于实验动物弓形虫感染的检测。采用B1基因设计引物,建立常规PCR,用P30基因设计引物,建立巢式PCR;用两种PCR方法检测实验感染弓形虫小鼠血液和腹腔波中的DNA动态变化;用巢式PCR检测自然状态下的普通级豚鼠、教学和科研用兔的弓形虫感染率,并和常规PCR检到结果比较。结果,巢式PCR可检测到1fgDNA含量,比常规PCR敏感lOO倍;对其他微生物DNA无交叉现象,特异性强;对同一样品重复检测3次,阴、阳性结果一致,稳定性好。小鼠感染弓形虫2d后,巢式PCR对小民腹腔液的阳性检出率为83.3%,对血液的阳性检出率为33.3%;感染3d后,腹腔液阳性检出率为100%;而常规PCR在小鼠感染3d和4d后才能在腹腔液和血液中检测到,检出率各为16.7%。受检普通级豚鼠没有感染弓形虫,教学和科研用兔的弓形虫总感染率为14.3%。结论认为,巢式PCR方法可用于实验动物弓形虫早期感染的检测,具有敏感性高、特务性强、稳定性好的特点。 相似文献
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