间接ELISA检测猪伪狂犬病血清抗体

用猪肾传代细胞IBRS－2增殖猪伪狂犬病病毒（PRV）鄂A株，病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇（Mr20000）浓缩后作为包被抗原。用纯化的猪血清IgG免疫家兔，HRP村记撮的兔抗猪IgG，制备出高效价的酶标抗体，酶标抗体工作浓度为1：50000；经各种条件的选择，建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接ELISA。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为39.2mg/L，血清最佳稀释度为1：20，与猪细小病毒、猪、O型口蹄疫、猪衣原体标准阳性血清呈阴性反应，与标准阴性血清和临床未感染PRV的猪血清呈阴性反应；与猪伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清呈明显的阳性反应；与美国进口的PRV抗体检测ELISA诊断试剂盒检测结果比较，45份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100％。表明建立的间接ELISA具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点，可用于猪伪狂犬病血清抗体的定性和定量检测。     

伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布

潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒（PRV）gG-/LacZ＋标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪,建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型,再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示,阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势,而注射地塞米松后,阳性细胞数量在上述组织中显著增加。     

乳胶凝集试验与血清中和试验检测猪伪狂犬病血清抗体的 …

应用血清中和试验（ＳＮＴ）和伪狂犬病乳胶凝集试验（ＬＡＴ）诊断试剂盒对两种伪狂犬病是性血清、伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）高兔血甭及６０份被检猪血清进行了ＰＲＶ抗体效价测定和相关性分析,两种方法测得的抗体效价之间呈强相关性（ｒ＝０．９６）,且ＬＡＴ效价比ＳＮＴ一般高出一个滴度;能干为自３５个猪场的４１４份猪血清进行了ＰＲＶ抗体检测,并与ＳＮＴ检测结果进行了对比,结果在ＳＮＴ检测为阳笥的１７１份血清中,ＬＡ     

乳胶凝集试验检测鸡新城疫病毒血清抗体的研究

用硫酸铵沉淀、透析浓缩的鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）抗原致敏乳胶,然后所鸡新城疫阳性血清进行方阵滴定,选择出最佳致敏条件并制成新城疫病毒乳胶抗原,由此建立超乳胶凝集试验（ＬＡＴ）,用来检测新城疫血清抗体;用所建立的乳胶凝集试验（ＬＡＴ）和血凝抑制试验（ＨＩ）同步检测６９份鸡血清,结果乳胶凝集试验阳性６２份,阴性７份;血凝抑制试验阳性６６份,阴性３份,两者的总符合率为９４．２％（６５／６９）,且两者的检出率基本一致。结果表明,乳胶凝集试验具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测等优点,是一种适合基层单位用来检测鸡新城疫病毒血清抗体的新方法。     

神经肽Orexins的研究进展

Orexins是一组神经肽，分为orexin A、orexin B(OXA、OXB)2种，它们来源于同一前体。orexins主要由下丘脑神经元产生，通过其神经纤维的直接投射或释放冬脑脊髓液作用于靶位点，激活2种与G蛋白耦联的细胞表面受体OX1R、OX2R，参与机体对摄食、能量代谢、睡眠觉醒循环等生理活动的调节。     

Orexin A在鹌鹑间脑内定位分布的SABC法研究

采用免疫组织化学SABC法，研究orexin A在鹌鹑间脑内的分布。结果显示，orexinA阳性神经元胞体主要分布在间脑中下丘脑区的室旁核、室周区、外侧核和后内侧核，其阳性纤维则投射到丘脑和下丘脑的广大区域，其中在圆核、三角核、前脑外侧束、第五额束、视顶盖、中央白质层和外侧核等处较密集。结果表明orexin A存在于鹌鹑的间脑内，但其分布与大鼠之间有明显的差异。     

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗的安全性和体液免疫研究

采用转瓶生产技术，在MARC-145细胞中增殖PRRSV克隆20株，经过条件的优化选择，得到TCID50≥10^-7．55／mL的高滴度PRRSV溶液，为生产疫苗打下基础，所生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全无致病性，能刺激猪产生特异性抗体应答，接种后第14天可检测出特异性中和抗体。疫苗内的PRRSV滴度在冻干前后变化不大，冻干疫苗在4～8℃保存有效期为6个月，-20℃保存有效期达18个月，表明生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全且能刺激猪产生体液免疫应答，可用于PRRS的预防接种。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的烈性传染病。1987年首次报道于美国，临床表现为母猪繁殖障碍，呈现流产、死胎、木乃伊胎及弱仔等症状，仔猪及育成猪表现为呼吸系统症状。不久此病迅速蔓延北美和欧洲，随后分离并鉴定该病病原一猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)，并确定存在北美型和欧洲型分离株。由于PRRSV具有抗原变异的特性，并且它的主要靶细胞是具有重要免疫作用的肺泡巨噬细胞(PAM)，因此PRRSV的感染常引发其它病原的继发感染，尤其是呼吸道的感染，给养猪业造成重大经济损失。     

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)弱毒活疫苗的安全性和体液免疫研究

采用转瓶生产技术，在MARC-145细胞中增殖PRRSV克隆20株，经过条件的优化选择，得到TCID50≥10^-7.55／mL的高滴度PRRSV溶液，为生产疫苗打下基础；所生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全无致病性，能刺激猪产生特异性抗体应答，接种后第14天可检测出特异性中和抗体。疫苗内的PRRSV滴度在冻干前后变化不大，冻干疫苗在4～8℃保存有效期为6个月，-20℃保存有效期达18个月，表明生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全且能刺激猪产生体液免疫应答，可用于PRRS的预防接种。