第三报 马牛T淋巴细胞转化试验

T淋巴细胞具有多种生物学功能,根据这些功能的特性,建立了一系列检测方法,“T淋巴细胞转化试验”(以下简称“淋转”)就是检测T淋巴细胞功能的方法之一。正常机体的T淋巴细胞当与某种特异性抗原或有丝分裂原在体外共同培养时,可发生形态学和生物化学的变化,部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞,这种方法称为淋巴细胞转化试验。当病畜的细胞免疫功能缺损时,其淋转率降低,故在临床上可作为检测病畜细胞免疫功能的指标之一。对于免疫缺陷病的诊断、各种疾病病理发生本质的探讨、治疗效果的考核以及判断予后等方面都有一定意义。     

应用PCR技术检测沙门氏菌

参照文献报道的根据沙门氏菌组氨酸转运操纵子基因片段所设计的引物序列,合成了１对长２５ｂｐ的引物,对沙门氏菌属Ａ－Ｆ各群中共１６株沙门氏标准菌株和其他１２株非沙门氏菌标准菌株进行ＤＮＡ抽提扩增、结果沙门氏菌ＰＣＲ产物都出现４９５ｂｐ的特异性ＤＮＡ扩增带,而非沙门氏菌均未出现扩增条带,证明这对引物具有沙门氏菌属特异性。     

大肠埃希氏菌血清型鉴定及黏着素抗原的测定

对95株已鉴定的大肠埃希氏菌，采用玻板凝集法进行了O抗原血清型的鉴定，确定46株为O抗原血清型。同时采用免疫荧光技术和D-甘露糖抗血凝反应（MRHA）及其抑制试验测定，确定为O抗原血清型的大肠埃希氏菌的黏着素抗原，其中23株具有K88、K99、987P3种黏着素抗原。结果表明，同时采用上述2种方法筛选大肠埃希氏菌的黏着素抗原，其准确性和灵敏性更高。     

沙门氏菌PCR诊断试剂盒的研制及初步应用

采用酚提取法和裂解法制备聚酶链反应（ＰＣＲ）模板,并制备了ＰＣＲ诊断试剂盒,用于沙门氏菌。结果,粪便样品只能采用酚提取法制备模板,而血液样品可采用裂解法,灵敏度高达５个沙门氏菌ＤＮＡ水平,最佳反应时间为变性、退火各４０ｓ,延伸５０ｓ。用该分水岭 工发病和自然发病动物血液、粪便中的沙门氏菌,阳性纺均比２法高,且培养法阳性的样品ＰＣＲ法均为阳性,整个检测过程仅需６－８ｈ。     

间接红细胞凝集试验在化脓棒状杆菌所致绵羊“肺脓肿病”诊断中应用的初步探讨

我们用化脓棒状杆菌反复冻融裂解制备的无菌体细胞抗原致敏的鞣化甲醛化和戊二醛化红细胞(在试验过程中发现甲醛化红细胞非特异性反应较戊二醛化红细胞为大,故在第2次试验及以后的试验中均采用致敏的戊二醛化红细胞)与从于田羊场疫群(“肺脓肿病”)羊中采回的绵羊血清(—20℃冰箱内保存)99份,健康羊群羊血清20份,免疫兔(化脓棒状杆菌菌体类毒素联合苗免疫)血清5份作间接血凝试验2次。发现疫群血凝抗体滴度分别在1:160—1:2560和0—5120之间(1:2560和1:5120以上稀释度来作测定),绝大多数羊(81.5％和83.19)血清学滴度在1:1280以上。接种疫苗2次并攻强毒后存活的兔免疫血清滴度均在1:1280以上(高于此水平的滴度未予测定)。90％健康羊血清滴度在1:40以下。看来本试验有高度的敏感性。试验过程中发现许多血清样品不同稀释度之间的凝集程度缺乏明显的差别,可能与非特异性凝集现象存在有关。为了消除这些现象作了四种稀释剂(0.2％明胶盐水、0.2％阿拉伯胶盐水、1:2500牛血清白蛋白盐水、1％兔血清盐水)消除非特异性作用的比较试验,发现以明胶和阿拉伯胶盐水消除非特异性凝集作用的效果最好,牛血清白蛋盐水次之,兔血清盐水最差。稀释剂以随用随配为宜,未用完的稀释剂即使在-20℃冰箱中保存,效果仍大大降低。根据本试验初步成果,我们建议在用间接血凝试验作化脓棒状杆菌病正式检疫时,判定标准可暂定为:血清抗体滴度1:20者为阳性,1:40者为可疑,1:80以上者为阳性。参照国外报导,Shigidi(1979)指出间接血凝在绵羊棒状杆菌传染的血清学诊断方法中具有胜过其他试验(试管凝集,凝胶扩散,抗溶血抑制、补体结合等试验)的优点。因之,本试验对化脓棒杆菌所致的肺脓肿的诊断在目前仍不失之为一种较好的血清学诊断方法。     

第二报:马牛T淋巴细胞E玫瑰花试验

人和动物的T淋巴细胞具有红细胞受体,在体外一定条件下能与红细胞结合,形成玫瑰花环状,称为E——玫瑰花试验,花环的形成是T淋巴细胞的特异标志,故本试验可以计数T淋巴细胞的数量并检测T细胞的活性,这是目前国内外广泛应用的细胞免疫学检测方法之一。 E——玫瑰花试验对T淋巴细胞具有特异性,方法简便,但由于T淋巴细胞与红细胞的结合是一种表面的物理性吸附现象,花环结合松脆,有一个从结合到脱落的动力学过程,在试验中易受各种因素的影响,结果不易稳定,故作为临床检验T淋巴细胞免疫活性的一种指标,还需要在操作流程的规范化,试验条件和质量控制等方面做许多探讨工作。在兽医方面     

鸭传染性浆膜炎综合防制措施的探讨

1流行病学 鸭传染性浆膜炎，又称鸭疫里默氏杆菌病，是由鸭疫里默氏杆菌引起鸭、雏鹅与火鸡等多种禽类的一种接触性传染病。临床上分为最急性、急性和慢性3种类型。最急性型发病时通常不表现任何临床症状，突然死亡；急性型病鸭表现不食，困倦，眼鼻孔有分泌物，下痢，共济失调，抽搐；慢性型则表现斜颈，呼吸困难等。病理解剖特点是以纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎、干酪样输卵管炎和脑膜炎为特征的败血症。主要发生在1～8周龄鸭，2～3周龄尤其容易感染。     

第一报 马牛非特异性免疫功能测定

用体外方法检测动物机体的免疫功能是近年发展较快的一类医学检验方法。在兽医方面,国外于七十年代开展细胞免疫的临床检验,业已证明对于免疫性疾病的诊断,对某些疾病过程中机体免疫功能的估价以及监视治疗等都具有一定意义。国内兽医界对此类检测法应用于临诊尚处于摸索阶段,我们的试验旨在从方法学及兽医临诊应用两个方面进行探讨。动物种类不同,对各项试验中某些条件的要求亦不同;各实验室条件不同以及对实验质量控制上的差异,往往使实验结果有很大差别。故为使免疫学检验应用于兽医临诊,首先需对方法学进行探讨,逐步使每种动物的某项检测的操作流程规范化,并据此取得正常值作为临诊应用的依据,这也就是我们首先试图进行的初步工作。第二步,我们将结合临诊病例或某项研究对免疫检验的实际应用进行探讨。