绵羊衣原体病抗体监测及两种衣原体病间接血凝试剂盒的比较

2004—2005年,笔者有机会为北京郊区的某些羊场做几种传染病的抗体监测,其中包括衣原体病的监测。世界动物卫生组织(O IE)《诊断试验和疫苗标准手册》(2000版)和《陆地动物病的诊断和疫苗手册》(2004版)介绍的羊衣原体病血清学诊断是CF(国际贸易替代试验)和EL ISA(处于研究阶段     

猪的胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和副猪嗜血杆菌复合PCR检测方法的建立

在已经建立猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件的优化,成功地建立了APP、PM、HPS的复合PCR实验室诊断方法,利用一次PCR反应,即可同时扩增出APP的342bp、PM的457bp和HPS的821bp的特异性片段。该复合PCR能同时检测到100个每种细菌或50pg的APP或HPS的DNA和500pg的PM的DNA。该三重复合PCR的敏感性同已报道的单PCR一致。该方法的建立对临床上进行这3种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。     

胸膜肺炎放线杆菌ApxI A基因C端的克隆、表达及检测

为了研究ApxI A基因C端基因的免疫原性,试验采用分子生物学技术设计1对引物,采用PCR方法扩增得到ApxI A的C端基因片段,经酶切鉴定和基因测序后,构建原核表达载体pET-32a-AC;将重组质粒转化至宿主菌BL21中诱导表达,然后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测。结果表明:目的基因能够在原核表达系统中表达,其表达产物具有免疫学活性。     

猪胸膜肺炎放线杆菌、猪多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌复合PCR检测方法的建立

在已经建立的猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)、猪多杀性巴氏杆菌(PM)、副猪嗜血杆菌(HPS)的单项PCR诊断方法的基础上,通过对扩增条件的筛选,成功地建立了APP、PM、HPS复合PCR诊断方法,并应用于临床。利用一次PCR反应,即可同时扩增APP的342bp、PM的457bp和HPS的821bp的特异性片段。该方法的建立对临床上进行这3种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测都具有重要意义。     

苜蓿切叶蜂、金小蜂体内共生菌沃尔巴克氏体测定与分析

沃尔巴克氏体(Wolbachia)是广泛分布于节肢动物体内的一类共生菌,它们参与调控其寄主多种生殖活动的机制。本研究利用PCR方法对wsp基因的特异性扩增和测序,证实了Wolbachia在金小蜂体内的共生。并利用所测序列和其他已发表的序列建立系统树,为研究寄主与拟寄生物间的水平传播机制奠定了基础。