正链RNA病毒感染性克隆的构建策略及影响因素

利用全长cDNA构建感染性克隆是拯救RNA病毒的基础和关键,也是反向遗传技术的核心。文章综述了构建正链RNA病毒感染性克隆的基本思路和关键技术,总结了影响克隆感染性的因素,并对感染性克隆技术的应用做一简述。     

日粮中添加小肽对荷斯坦种公牛生长性能和精液品质的影响

肽是瘤胃微生物合成蛋白质的重要底物,瘤胃微生物蛋白合成所需的氨大约有2/3来源于肽氨基酸。肽对瘤胃微生物生长的主要效应是加快微生物的繁殖速度,缩短细胞分裂周期。并且小肽是瘤胃微生物达到最大生长效率的关键因子,特别是小肽能刺激发酵糖和淀粉的微生物生长。小肽促进可溶性糖分解菌的生长速度比氨基酸的作用高70%。饲料中添加小肽能促进奶牛饲料的消化吸收,可以改善公牛的体况。小肽还可与钙、锌、铜、铁等矿物离子形成螯合物保证其可溶性,以利于机体的吸收。位于五元或六元环络合物中心的金属离子可通过小肠绒毛刷状缘,以小肽的形式…     

猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合域的分析

以猪流行性腹泻病毒（PEDV）可溶性的猪氨基肽酶N受体为靶蛋白对PEDV S1基因特异性肽库进行3轮生物淘选,然后对30个淘选的噬菌体克隆进行测序。序列分析发现,2个噬菌体克隆展示无义氨基酸序列,其余28个噬菌体克隆展示的氨基酸序列位于PEDV S蛋白的第249-529位氨基酸区域,这个区域被命名为MRR。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对MRR基因进行真核表达。Western blot结果表明,表达的MRR重组蛋白能够与兔抗PEDV多克隆抗体反应。     

猪流行性腹泻病毒N蛋白的真核表达及其亚细胞定位的初步分析

以构建的含有编码猪流行性腹泻病毒CV777株核衣壳蛋白（N）基因的阳性质粒pMDT-18-N为模板,用含有KpnⅠ和XhoⅠ酶切位点的上、下游引物扩增获得N基因,该PCR产物经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后定向克隆到经相同双酶切的真核表达载体pcDNA3.1（＋）中,经过酶切鉴定和测序鉴定,将构建的重组质粒命名为pcD-NA3.1（＋）-N,且未发现碱基的缺失和插入。用脂质体法将pcDNA3.1（＋）-N转染Vero E6细胞,在48 h后,以针对猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白的鼠源多抗血清进行Western blot、免疫荧光检测,并运用共聚焦显微镜分析N蛋白的亚细胞定位。结果表明N基因能在真核细胞Vero E6中正确表达,共聚焦分析结果表明N蛋白在细胞质和细胞核中定位。     

国内猪捷申病病毒研究进展

猪捷申病病毒(Porcine teschovirus,PTV)属于小RNA病毒科(Picornaviridae)捷申病毒属(Teschovirus)成员,主要引起猪的脑脊髓灰质炎、生殖障碍、肺炎、下痢、心包炎和心肌炎等临床症状.2003年首次在我国被发现,引起了猪病研究人员的广泛关注.本文综述了近几年国内对猪捷申病毒的研究进展,以期为猪捷申病毒研究者提供参考.     

流式细胞仪的原理及其在畜牧兽医中的应用

流式细胞分析,即流式细胞术,是用流式细胞仪测量液相中悬浮细胞或微粒的一种现代分析技术.它是众多不同学术背景、不同科技领域相结合的结晶,是物理学、生物学、医学等综合运用的产物.文章就流式细胞仪的原理及其在畜牧兽医中的应用做一综述.     

宁远县规模猪场伪狂犬病野毒感染情况的调查

为调查了解湖南省宁远县规模猪场伪狂犬病野毒感染情况,选取该县具有代表性的30个规模猪场采集557份血样,通过gpI-ELISA抗体检测试剂盒检测猪伪狂犬病野毒感染抗体(PRVgpI抗体)。结果表明,557份血清中,PRVgp I抗体阳性率为2.51%,该县17个乡镇、街道(舜陵、桐山街道除外)中,8个乡镇(街道)的规模猪场检出PRVgpI抗体。结果表明,宁远县规模猪场猪伪狂犬病野毒感染率较低,但分布区域较广。