猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp10基因的克隆及序列分析

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒 BJ-4序列,选择Nsp10基因保守区域设计并合成特异性引物,用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州地方株(命名为JL株)Nsp10基因片段,克隆到pMD18-T载体并测序,应用DNASTAR、Clustal_1.81和Mega序列分析软件进行同源性比较.结果表明:贵州JL株Nsp10基因的cDNA长699 bp,可编码233 个氨基酸;贵州JL株Nsp10基因与早期分离毒株MLV株、BJ-4株、VR-2332株、CH-1a株、CH2002株和GS2004株相应序列的核苷酸同源性为 91.7%～94.0%,氨基酸同源性为97.4%～98.7%;而与最近分离毒株HN2007株、SX2007株、GD2007株、YN2008株、GS2008株、XL2008株、TJ株和JXA1株的核苷酸同源性为 98.3%～98.6%,氨基酸同源性为 99.6%～100%.     

山羊痘病毒诱导BHK-21细胞凋亡的检测

为验证山羊痘病毒诱导BHK-21细胞出现凋亡现象的存在,分别采用HE染色、凋亡试剂盒检测、流式细胞仪检测和DNA Ladder检测,对山羊痘病毒感染的BHK[21细胞培养物进行细胞凋亡检测.不同方法检测结果均显示,山羊痘病毒感染BHK-21细胞组相同时间细胞凋亡数明显高于对照组.表明山羊痘病毒可诱导BHK-21细胞发生...     

复合益生素对仔猪免疫功能的影响

为了解复合益生素(嗜酸乳杆菌+干酵母)对仔猪免疫功能的影响。选取60头日龄相同、体重相近的初产仔猪,分为复合益生素组(基础日粮+0.2 g/kg干酵母+0.4 g/kg嗜酸乳杆菌液)、嗜酸乳杆菌组(基础日粮+0.4 g/kg嗜酸乳杆菌液)、鱼肝油乳组(基础日粮+10 mL/kg鱼肝油乳)、基础对照组(基础日粮)4组,15头/组,用ELISA试剂盒检测不同日龄、不同组别仔猪外周血总IgG、IL-2、IL-5和IFN-γ的含量变化。结果显示,从15~55日龄添加复合益生素增加总IgG、IL-2、IL-5和IFN-γ的量分别为102.76％、62.63％、53.71％和33.45％,明显高于其它组。可见,复合益生素能够更好的增强仔猪的免疫功能。     

山羊痘病毒P32蛋白在毕赤酵母中的表达与鉴定

为了获得具有生物安全性高的体外表达蛋白,以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T-P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因不同片段,将基因片段克隆至毕赤酵母菌表达载体pPICZαA中,构建了重组表达载体,转化感受态毕赤酵母菌X-33中并诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,有分子量约为64 ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western-blot证实该表达蛋白具有免疫学活性。     

蛋鸡大肠杆菌病的诊断

为了对蛋鸡大肠杆菌病进行准确诊断,对某蛋鸡养殖场蛋鸡发生的疑似鸡大肠杆菌病进行了流行病学调查、病理剖检观察和细菌分离鉴定.结果表明:83.33%(5/6)为革兰氏阴性杆菌,生化试验鉴定为大肠杆菌,常见抗菌素药物敏感试验该菌对盐酸沙拉沙星和氨苄西林钠比较敏感.建议选用敏感药物治疗蛋鸡大肠杆菌病.     

复配对肉兔繁殖性能的影响

为研究复配对肉兔受胎率及产仔性能的影响程度,选用体质结实,年龄相近,体况良好,膘情中等,发情正常,无繁殖障碍的适配种母兔48只,随机分成2组,Ⅰ组采用单次配种,Ⅱ组采用重复配种.结果表明,Ⅰ组母兔受胎率为66.67%(18/24).Ⅱ组母兔受胎率为95.83%(23/24),差异显著(P＜0.05);Ⅰ组产仔数平均8.76只/窝,Ⅱ组8.75只/窝,差异不显著(P＞0.05);Ⅰ组平均窝重490.88 g/窝,Ⅱ组485.00g/窝,差异不显著(p＞0.05);Ⅰ组初生重平均56.37g/只,Ⅱ组58.40 g/只,差异不显著(P＞0.05).表明,复配能有效地提高肉兔受胎率,但对产仔数、初生窝重、初生重作用不明显.     

山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性及稳定性研究

对山羊痘重组沙门菌S7207/pVAX1-P32疫苗株的安全性、稳定性及S7207/pVAX1-P32在动物体内散布规律进行测定。选择60只小鼠,随机分为4组,1组为生理盐水对照组,2组～4组为试验组,用上述沙门菌株S7207以108、109、1010cfu的剂量口服免疫小鼠,2周后相同剂量加强免疫,通过在不同时间段称量小鼠体重显示,试验组小鼠生长情况与对照组无明显差异,不同组别小鼠大体及内脏器官也未发生病变,说明S7207/pVAX1-P32安全性良好;通过PCR方法检测P32基因在体内各组织分布情况,在7d后体内各组织中都检测出目的基因,说明DNA在小鼠体内广泛分布。体外传代含pVAX1-P32和不含pVAX1-P32菌株,含质粒菌株经60代传代后含重组质粒菌的比例在50%以上,传代至120代时仍在10%以上,而不含质粒菌株明显低于含质粒菌株,结果证明含质粒菌株稳定性较好。研究结果提示,利用减毒沙门菌为载体传递S7207/pVAX1-P32疫苗具有良好的安全性和稳定性,其质粒在小鼠体内分布广泛,对未来口服疫苗的使用提供了参考依据。