产胞外多糖的黑鲷肠道乳酸菌的分离鉴定及其生物学特性

通过常规鉴定和16S rDNA序列分析,从黑鲷(Sparus macrocephalus)肠道中分离鉴定出1株明串珠菌属(Leuconostoc)乳酸菌菌株;该分离株对酸、胆盐、蛋白酶具有良好耐受性,但对温度耐受能力较差;分离株培养上清液对哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、溶藻弧菌(Vibrio algnolyticus)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的抑菌圈直径为1.12～1.22 cm,不同培养时间的抑菌效果差异无统计学意义(P＞0.05);分离株在培养24、32、40、48和56 h时的胞外多糖质量浓度为167.24～184.45 mg·L-1,不同取样时间的胞外多糖质量浓度差异无统计学意义(P＞0.05);灌服胞外多糖20 d后黑鲷血液的红细胞、白细胞数量和血红素浓度、淋巴细胞比率均显著升高(P＜0.05).综上,该分离株为产胞外多糖的明串珠属乳酸菌,可作为开发海水鱼用微生态制剂的候选菌株.     

果寡糖及其在饲料工业中的应用

本文介绍了果寡糖的一般理化性质、生理特性以及畜禽肠道微生态系统,果寡糖能够调整动物肠道生态平衡,提高畜禽抗感染能力、生产性能。最后,列出了果寡糖的工业生产方法。     

猪瘟病毒荧光定量PCR标准阳性模板的构建

设计扩增猪瘟病毒(swine fever virus,SFV)核酸5'端非翻译区的引物,采用RT-PCR方法克隆目的片段并插入PMD-18 simple T质粒,重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒经PCR和序列测定证实为阳性重组质粒,命名为pSF.将构建的pSF作为标准阳性模板进行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测表明,此模板在-20℃保存6个月对结果无显著影响;对于1×109,1×107,1×105拷贝/2μl的pSF用FQ-PCR方法测定的Ct值最大变异系数分别为1.55%;使用该模板建立的定量范围为1×102～1×1011拷贝/2μl;构建的阳性重组质粒pSF具有良好的稳定性和特异性.该方法可以用于临床诊断.     

稳定同位素指纹分析在蚕茧产地溯源中的应用研究

蚕茧产地溯源是丝绸原产地溯源的基础。本研究为了探究蚕茧产地溯源最适方法,以不同产地的蚕茧为研究对象,利用不同产区蚕茧的¹³C、¹⁵N、¹⁸O和²H同位素组成,通过单因素方差分析、多重比较分析、Fisher线性判别分析留一法交叉验证,最后建立蚕茧产地溯源模型。单因素方差分析结果表明,不同产地蚕茧的δ¹³C、δ¹⁵N、δ¹⁸O和δ²H均存在差异,大部分达到显著水平;多种指标耦合效果优于单一同位素指标,且判别分析结果表明,随着耦合指标的增加,产地初始判别率和交叉判别率逐渐提高;利用δ¹³C、δ¹⁸O、δ¹⁵N和δ²H 4个指标建立的溯源模型的初始判别率为84.5%,交叉判别率为77.6%。本研究结果为蚕茧产地鉴别提供了一定的理论依据,为后续丝绸原产地溯源提供了溯源基础。     

表达猪链球菌溶血素基因的减毒沙门氏菌的构建及鉴定

将猪链球菌溶血素（suilysin，SLY）基因克隆入原核表达栽体pBV220，将重组质粒再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SV4089株，经PCR和酶切鉴定，构建成携带猪链球菌溶血素基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。结果表明：该减毒株具有相对安全性；用酶切和PCR鉴定法证实在无抗生素存在的条件下携带重组质粒的减毒株比较稳定；SDS-PAGE显示SLY能在宿主菌中进行表达。该结果为进一步研究制备猪链球菌口服活疫苗奠定了基础。     

黄鳝不同生长阶段消化器官及其消化酶的变化

选取野生黄鳝的稚鳝12尾（体重22．25－25．95g)，幼鳝9尾（体重64．65－78．89g)，成鳝6尾（体重207.16-224.16g)，对不同生长阶段的黄鳝分别随机分为3个重复，在实验室内饥饿24h，解剖并取出黄鳝的胃，肠和肝脏分别称重，并测量肠的长度，然后分别取一定量胃，肠和肝脏匀浆，制取上清液测定酶活力，结果显示，不同生长阶段黄鳝的胃重／体重基本一致，黄鳝的肠长／体长指数从稚鳝到成鳝有下降的趋势，不同生长阶段的肝脏指数相互之间差异显著（P＜0．05），稚鳝与成鳝肝脏指数相关极显著（P＜0．01），幼鳝胃蛋白酶活力高于其他阶段，但差异不显著（P＞0．05），稚鳝与幼鳝的肠蛋白酶活力基本一致，但与成鳝相比差异显著（P＜0．05），肝脏蛋白酶活力随黄鳝的长大而增加，但相互之间差异不显著（P＞0．05），稚鳝，幼鳝，成鳝的肠道淀粉酶活力相互之间差异显著（P＜0．05），其中稚鳝和成鳝差异极显著（P＜0．01），稚鳝和幼鳝的肠脂肪酶与成鳝相比差异显著（P＜0．05），但稚鳝与幼鳝之间差异不显著（P＞0．05），稚鳝的肝脏淀粉酶活力与幼鳝，成鳝相比差异显著（P＜0．05），但幼鲜与成鲜之间的肝脏淀粉酶活力差异不显著（P＞0．05），3个不同阶段黄鳝的肝脏脂肪酶活力差异也不显著（P＜0．05）。     

不同日粮蛋白质水平对宝石鲈幼鱼生长的影响

用三种不同粗蛋白质水平 (35 %、 4 0 %、 4 5 % )的日粮分别饲喂宝石鲈幼鱼 5 0d ,结果表明 ,随着粗蛋白质浓度的增加 ,三组幼鱼日增重差异显著 (P <0 0 5 ) ;4 0 %组幼鱼的饵料系数显著低于 35 %和 4 5 %组 (P <0 0 5 ) ,而 35 %、 4 5 %组饵料系数差异不明显 (P >0 0 5 )。当日粮粗蛋白质水平在 4 0 %左右时 ,宝石鲈幼鱼的生长性能和饲料利用率均能取得较好效果。     

一株分离自鸡肉样品的多重耐药大肠埃希菌的全基因组测序及耐药性研究

以分离自宁波市市售鸡肉中的一株大肠埃希菌ECCNB12-2为研究对象,使用微量肉汤稀释法进行最小抑菌浓度(MIC)测定,结果显示,该菌株对氨苄西林、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、磺胺异恶唑、复方新诺明、头孢噻夫、恩诺沙星、氧氟沙星等10种抗生素耐药。采用第三代高通量测序技术对该菌株进行全基因组测序,随后对基因组完成图进行获得性耐药基因、毒力因子、质粒水平转移元件预测。菌株ECCNB12-2染色体基因组大小为5 539 489 bp,GC含量为50.37%,同时携带有4个质粒,大小分别为147 451 bp(pTB-nb1)、139 752 bp(pTB-nb2)、82 252 bp(pTB-nb3)、253 793 bp(pTB-nb4)。获得性耐药基因预测结果显示,染色体基因组、质粒pTB-nb1及质粒pTB-nb4上共携带有40个获得性耐药基因,同时菌株基因组检测出12个毒力因子。质粒水平转移元件预测结果显示,pTB-nb4质粒包含完整的水平转移系统,理论上具有高度的自主接合转移潜力。以上研究表明,分离自市售鸡肉样品的ECCNB12-2菌株是一株高风险的多重耐药菌株,反映了市售鸡肉中细菌耐药状况的严重性,相关研究结果为食源性细菌耐药安全风险评估提供了参考。     

邻苯二甲酸二甲酯(DMP)在乌鳢体内的代谢动力学和残留

采用反相高效液相色谱-紫外检测法测定邻苯二甲酸二甲酯(DMP)在乌鳢体内的代谢动力学和残留。将DMP以20mg/kg灌服乌鳢后,取样测定不同时间点血浆和肌肉中的DMP质量浓度,并利用3p97药物动力学软件对试验数据进行分析,结果表明乌鳢灌服DMP后体内吸收较快,吸收半衰期为0.028h,分布半衰期为1.16h,消除半衰期为231.29h,血浆质量浓度-时间曲线下面积AUC为65.83μg.h.mL-1,达峰时间为0.17h,达峰质量浓度为0.71mg/L;同时在8、12、24、48、72、144h各点肌肉中DMP浓度均比血浆中高,DMP在肌肉组织中的消除半衰期为256.6h,通过代谢动力学和残留研究显示DMP在乌鳢体内吸收和分布较快,消除缓慢。     

家禽定点屠宰场不同屠宰环节鸡肉表面真菌结构分析

目前鸡肉表面的污染细菌研究较多,而对其表面的污染真菌结构的相关研究甚少,真菌中的酵母菌对于肉鸡的腐败变质有重要的相关性。为了解鸡肉表面污染真菌的结构特征,在浙江省选择1家禽定点屠宰场,于脱毛、净膛、预净、包装和冷藏5个环节各随机抽取5份鸡肉样品,用无菌生理盐水冲洗表面,采集微生物,提取基因组DNA,对真菌ITS区域的ITS2区域进行PCR扩增,高通量测序分析。结果表明,不同屠宰环节鸡肉表面真菌的丰度无显著性差异。屠宰场鸡肉表面真菌主要分布于4个门,优势菌门为担子菌门和子囊菌门,其中担子菌门最丰富,占69%以上。在属的水平上,毛孢子菌属为优势菌属,占63.6%~72.8%。此外,还有病原真菌隐球菌属和曲霉属及腐败酵母假丝酵母属等的检出。本研究为了解定点屠宰场不同屠宰环节鸡肉表面的真菌提供了数据资料,对保障鸡肉的食用安全及改善屠宰场的卫生水平提供依据。