10种猪常见病毒基因芯片检测方法的建立及初步应用

旨在建立一种可同步检测猪10种常见疫病病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)、猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)、猪巨细胞病毒(porcine cytomegalovirus,PCMV)和口蹄疫病毒(food-and-mouth disease virus,FMDV)的基因芯片检测技术,为临床病料的初步诊断及流行病学调查提供一个新的可靠方法。对10种病毒基因的序列进行分析,设计引物对靶基因进行PCR扩增,将纯化后的靶基因点制成芯片,通过Cy3标记特异性引物扩增病毒得到具有荧光标记的探针,然后与芯片进行杂交,扫描分析结果,建立其基因芯片检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和稳定性进行检测。应用建立的基因芯片检测方法和普通PCR/RT-PCR方法对1 006份样品进行符合检测。试验结果表明,基因芯片检测10种病毒特异性好、灵敏度高,最低检测限度可达10~(5 )copies·μL~(-1),检测中,基因芯片与普通PCR/RT-PCR对1 006份临床样品的检测符合率为96.79%以上。初步研究表明,该基因芯片技术可同时同步检测10种猪疫病病毒,可应用于临床病料的初步诊断。     

鸭坦布苏病毒E基因的分子特性分析

为给鸭坦布苏病毒（duck tembusu virus,DTMUV）囊膜糖蛋白选择良好的抗原域和宿主表达系统提供参考依据,本研究通过选取DTMUV QD株基因文库中的一个重组质粒并测序,结合NCBI的ORF Finder和BLAST工具发现一个全长为1488 bp完整开放阅读框架（Open Reading Frame,ORF）片段。将该ORF编码蛋白通过NCBI的BLASTP分析和DNAstar进化树分析,确定该蛋白与类黄病毒E基因编码的蛋白具有较高的相似性。随后应用生物信息学分析工具Conserved Domains确定保守结构域、运用SignalP4.1预测信号肽、TMHMM 2.0预测跨膜区。应用在线程序NetNGlyc1.0预测糖基化位点,NetPhos2.0预测磷酸化位点、ProtScale进行疏水性分析。最后运用在线EMBOSS和自动蛋白同源建模数据库进行3D结构预测以及密码子偏爱性分析。结果表明,E蛋白与其它黄病毒衣壳蛋白具有相似的功能,没有信号肽切割位点,在451-468和475-492aa区域含有跨膜区,为相对低表达基因,含有较多种类的稀有密码子,与人密码子使用频率较为接近。这为进一步研究DTMUV E基因的体外表达和宿主选择提供了分子生物学依据。     

食源性寄生虫的风险评估

风险(risk)是由一种或多种危害因子而引发危害事件的一种可能性或概率。危害因子可能属于物理的、化学的、微生物的范畴,病原微生物中的细菌、病毒、寄生虫等都可成为引发危害事件的风险因子。评估某一因子是否对人或其他生物构成威胁以及所危害的程度显得至关重要。事实上,存在于环境中的危险因子及其多种可能的传播途径都会引发多种危害性事件。因此,要想充分了解并揭示由危害因子引发危害的概率,以及其随后对人类健康造成的危害并非易事。风险评估则是对不良结果或不期望事件发生几率进行描述及定量的系统过程,现已被视为一种用于揭示存在于环境中的各种危害及其对人类健康造成的影响的方法。论文主要对食源性寄生虫风险评估的方法进行全面阐述。     

海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1株所产多肽药物 R-1抗鸡新城疫病毒的研究

试验为了研究海洋侧孢短芽孢杆菌Lh-1株产生的新型抗菌药物R—1对新城疫病毒的抗病毒活性及抗病毒作用机理,通过抗菌药物R—1对病毒的直接作用试验、调节细胞免疫功能试验和鸡胚中抑制新城疫病毒增殖释放试验对该物质的抗病毒活性、感染动力学、毒性和可能的抗病毒机理进行了研究。结果表明：R-1的浓度为100mg／mL和50mg／mL时,体外与新城疫病毒作用3h杀灭率可分别达到94．51％、92．93％;使用R-1免疫鸡胚细胞后,对注入的新城疫病毒的作用有不同程度的抑制效果,最低发病率可以达到13．34％;在新城疫病毒侵入鸡胚细胞1h后注入100mg／mL R-1,病毒的杀灭率可以达到89．13％,并抑制了病毒在细胞内的增殖。     

生物技术专业应用型本科人才培养体系的完善

结合应用型人才的培养目标与生物技术专业的特点,从培养大学生实践能力和创新能力的方法及如何增强适应社会的能力等方面进行了探讨,完善生物技术专业人才培养体系,使生物技术专业的人才培养向应用型转变,从而更好的适应市场和社会的需求。     

一种汽车LED动态转向灯检测系统研究

针对用机器视觉代替人眼进行车灯产品检测、提高产品合格率的问题,提出了一种LED动态转向灯检测系统,实现对LED车灯的动态图像和动态电流的时序检测。硬件包括高速工业相机、工控机、可编程万用表等,软件基于Virtual C#和Halcon,具有图像采集、图像判断、电流采集、电流拟合度计算等功能,具有较大的应用价值。     

里岔黑猪对环境温度适应的某些血液指标的反应

用变温和恒温处理２月龄去势里岔黑猪四个月，饲喂三种不同日粮。结果表明：７－１３．４℃（１）组猪的白细胞吞噬活性最高，－５－１５．０℃（６）组最低。１５℃（２）组的猪血液溶菌酶活力显著高于２５℃（４）２０℃（３）组和（１）组。饲养后期以（５０组的白细胞吞噬活力最高，（３）组最低，结果依次为（５）〉（１）〉（４）〉（２）〉（３）。     

推进依法行政促进依法治国

依法行政是执政党安邦治国的大政方略,也是二十一世纪全球法治的基本方针。文明国家、法治社会对如何行政依什么去行政都有相同的要求。那就是在法律的规范下开展行政管理工作,实践公共权力,满足社会方方面面的要求。我们党十六大明确提出要建设法治国家,这是发展经济的要求,是同国际接轨、参与世界竞争的要求,是化解社会矛盾、构建和谐社会的要求,这是极其重要的政治任务。     

卧式环带混合机的机理研究

<正> 卧式环带混合机作为壳体固定式混合机中的一种和水平圆筒型、双重圆锥型、V型等壳体旋转型的混合机,在粉状物料的混合中被广泛使用。不同的是卧式混合机把搅拌叶放置在混合室中,因而对混合那些湿度较大的粉状物料或者稍有粘度的细粉状物料较适宜。而壳体     

警惕猪的疫苗病

晋代(公元265-317)《肘后备急方》载,“乃杀所咬之犬,取脑敷之,后不复发”,这是我国最早(在1500年之前)提出的以毒攻毒的免疫防疫的萌芽,是兽医免疫学的最早精华、原始精华。疫苗的研究、开发和应用,极大地降低了传染病的发病率,拯救了无数人和动物的生命。疫苗在疾病的预防和控制中所起的历史作用将是永远不能被忘记的。