奶牛乳房炎防治的研究概况

奶牛乳房炎是对乳业影响最大、危害最严重的常见疾病。本文对奶牛乳房炎的病因和目前该病的防治概况作了系统的介绍,并对该病防治的研究方向作了展望。     

猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用

根据流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片。并对217份不同地区的样品进行检测。结果表明：该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度。该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段。     

禽流感病毒4个亚型一步法多重RT-PCR检测方法研究

为了建立简便、快速的AIV检测方法,根据禽流感病毒H5、H7、H9亚型HA基因和N1亚型NA基因的保守序列,设计了4对RT-PCR引物,对H5、H7、H9、N1 4个亚型进行了多重RT-PCR扩增,通过多重RT-PCR敏感性和特异性试验,建立了多重RT-PCR检测方法;应用所建立的多重RT-PCR方法和病毒分离的经典方法对395份(4省20多个地区)口岸检样进行了平行检测,并对其检测结果进行了比较。结果表明,H5、H7、H9、N1 4个亚型的扩增产物大小分别为380,641,493和328 bp,对NDVI、BV、ARVI、BDV、MDV、FPV扩增均为阴性,平行检测结果完全吻合,说明所建立的多重RT-PCR检测方法具有较好的敏感性和特异性。     

一起大闸蟹重金属镉污染的溯源分析研究

在常德市进行出口食用性水生动物例行安全风险监控时发现,辖区一批大阐蟹存在重金属镉(Cd)含量超标现象,抽检的4批样品中有3批超过0.5 mg/kg(国家标准:大闸蟹Cd限量为0.5 mg/kg)。为此,对大闸蟹养殖基地的养殖水质、底质以及投喂饵料中的重金属Cd展开调查分析和研究。抽采大闸蟹养殖水质、底泥、饵料(螺狮、小杂鱼)等25份样品进行Cd含量检测分析。结果显示:底泥Cd含量高于0.5 mg/kg,螺蛳Cd含量高于0.5mg/kg,水中Cd含量符合渔业水质标准,小杂鱼Cd含量较低。结果表明该养殖基地底泥已受到一定程度的重金属Cd污染,大阐蟹Cd超标是由该养殖基地底泥Cd含量超标和投喂饵料螺蛳中Cd含量较高引起,所投螺蛳体内Cd含量较高也是由该水域底泥Cd含量较高所致。     

H1亚型猪流感病毒微滴数字RT-PCR定量检测方法的建立

本研究针对H1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)HA基因保守序列设计引物和探针,通过反应条件优化,建立了一种快速、准确检测H1亚型SIV的微滴数字RT-PCR定量方法。该方法特异性强,除H1亚型SIV外,H3、H5、H7亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等检测均为阴性;敏感性高,最低可检测4.7拷贝/μL;重复性好,对5个不同稀释度的H1亚型SIV RNA进行3次重复试验,每个稀释度的变异系数均小于5%。利用该方法对湖南省规模化养殖场收集的30份猪鼻拭子样品进行检测,发现与荧光RT-PCR检测结果一致。试验表明,该方法快速、准确、灵敏,可为H1亚型SIV的快速筛查及流行病学研究提供可靠的技术保障。