鸭出血性卵巢炎实验感染模型的建立

 【目的】建立鸭出血性卵巢炎的实验动物感染模型并对其发病特点进行观察，为疫苗研究和筛选评价抗病毒药物提供工具。【方法】以每只约104个ELD50的剂量经滴鼻、点眼和口服途径感染196日龄北京鸭后，观察鸭临床症状，于感染后5、7、9、21、28、34 d采血和剖检鸭，应用固定病毒稀释血清的方法测定血清中和抗体，取卵泡膜、肝脏、脾脏和脑组织进行病毒分离，对主要组织脏器进行病理学检查。【结果】攻毒后3、4、5d采食量均显著下降（下降80%），6d采食量恢复至约正常量的50%，11d恢复到正常水平；攻毒后3、4、5d产蛋量出现明显下降，6、7、8d鸭群未见产蛋，36d发病鸭群的产蛋率恢复到60%，39d鸭群的产蛋率达到80%。攻毒后5d 3只（3/3）鸭的卵泡膜和肝脏均可以分离到病毒，7d 2只（2/2）鸭的卵泡膜中均分离到病毒，1只鸭（1/2）脾脏和脑组织中均分离到病毒，9d 1只鸭（1/2）的卵泡膜中分离到病毒，21d和28d卵泡膜病毒分离结果均为阴性。感染鸭的卵巢变性、变形，卵泡膜充血、出血；卵巢、肝脏、脑、脾等组织和脏器均出现以网状细胞（巨噬细胞）增生为主的病理变化，表现为急性出血性卵巢炎、间质性肝炎、非化脓性脑炎、坏死性脾炎、间质性肾炎和轻度的心肌炎。感染后3周可检测出低效价的中和抗体。【结论】实验感染鸭出血性卵巢炎病毒后可引起急性出血性卵巢炎，利用产蛋北京鸭建立的鸭出血性卵巢炎模型，可用于评价抗病毒药物和疫苗的研究。     

斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒的易感性及其流感病毒受体类型的研究

【目的】验证斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒的易感性,测定斑鸠呼吸道上皮细胞表面流感病毒受体的类型和分布。【方法】以5×104EID50/只的剂量经滴鼻、点眼途径感染A/Chicken/Beijing/2/2009（H9N2）亚型禽流感病毒,共感染8只斑鸠和8只SPF鸡,对试验斑鸠和SPF鸡进行临床症状、大体病变、组织学病变的观察及病毒抗原的定位、病毒分离和感染抗体的测定。【结果】攻毒后5d,斑鸠和SPF鸡未见异常临床表现和大体病变,病理组织学检查发现斑鸠的喉头、气管上段、中段和下段上皮细胞均有不同程度的脱落;在斑鸠的喉头、气管上段、中段和下段上皮细胞的胞浆内检测到了大量阳性流感病毒蛋白颗粒;斑鸠咽拭子病毒分离阳性率为75%（6/8）,SPF鸡咽拭子病毒分离阳性率为100%（8/8）。攻毒后14d,斑鸠H9N2亚型禽流感病毒HI抗体阳性率为80%（4/5）,SPF鸡HI抗体阳性率为100%（5/5）。对H9N2亚型禽流感病毒受体检测结果表明,斑鸠的喉头、气管上段、中段、下段上皮细胞表面存在SAα2, 3Gal和SAα2, 6Gal两种连接键型的受体。【结论】斑鸠对H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Beijing/2/2009（H9N2）易感,且斑鸠的喉头和气管上、中、下段上皮细胞表面同时存在能够与禽流感病毒结合的SAα2, 3Gal受体和与人流感病毒结合的SAα2, 6Gal受体。     

不同冷冻保护剂对犬精子冻存的影响

本试验通过对比冷冻保护剂和冷冻程序,优化犬精液冷冻保存方法,比较了不同甘油、乙二醇浓度、不同平衡时间对犬精子冷冻复苏率及精子顶体完整率的影响。结果发现,甘油作为冷冻保护剂时,其对精液冷冻保存后的效果明显优于乙二醇,当甘油浓度为4%时,平均冷冻复苏率最高;冷冻平衡时间为1 h最佳。因此,犬精液在冷冻保存时,甘油浓度为4%,平衡60 min,可获得平均39.21%±0.013%的冷冻复苏率,且比较稳定。     

犬精液冷冻方法的优化试验

为提高犬的精液冷冻效果,在冷冻保存液配方中添加不同浓度糖(葡萄糖、果糖),将平衡时间和熏蒸时间做系统对比。经系列分组试验发现,含0.5%果糖组中精子活力显著高于其他组别(P0.05);平衡时间120min(P0.05);熏蒸时间20min冷冻效果较好。结果表明犬精子冷冻液添加低浓度果糖优于葡萄糖,而且平衡时间为120min,熏蒸时间为20min可得到稳定的冷冻效果。