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1.
猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗的制备及安全性与免疫性试验   总被引:10,自引:0,他引:10  
用本室分离鉴定的猪伪狂犬病毒鄂A经毒株接种仓鼠肾细胞(BHK-21),制备病毒抗原液,毒价不低于10^-6TCID50/0.1ml。经一定浓度的甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化研制成油乳剂灭活油疫苗4批。本研究对该制品的安全性、免疫性进行了测定。对18g左右小白鼠接种0.3ml,初生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪加倍剂量注射,均未出现不良反应,安全性良好。对母猪的繁殖性能不产生影响。后备母猪及妊娠母清中和抗体指数于免疫后21d达到316以上,间隔35d加强免疫一次后,中和抗体指数可达1000以上。断奶仔猪及初生仔猪免疫后对强毒的攻击,保护率分别为100%及90.62%。  相似文献
2.
猪伪狂犬病油乳灭活疫苗最小免疫剂量测定及区域试验   总被引:6,自引:0,他引:6  
猪伪狂犬病(Pseudorabies)是由疱疹病毒科的伪狂犬病毒引起,主要引起种猪不育,公猪睾丸发炎、肿胀、萎缩,丧失种用能力;母猪返情,配不上种;妊娠母猪流产、产死胎及弱胎;仔猪生后大量死亡,断奶仔猪发病死亡,育肥猪生长滞缓、增重减慢,造成较惨重的经济损失[1,2,3]。猪是本病的贮存者和传播者。伪狂犬病毒感染后能形成潜伏感染,,使病毒长期存在于中枢神经系统,在应激条件下被激活而导致本病的暴发[4]。免疫接种可以阻止临床症状的发生,降低经济损失,同时免疫后使猪减少向外排毒的数量,使环境野毒的数…  相似文献
3.
鸡新城疫病毒(NDV)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)混合在同一鸡胚中增殖,当NDV和IBV接种浓度控制在一定范围时,最佳收毒时间选择使NDV有足够时间增殖到最佳滴度,且在这一时间内不至于因孵育时间过长而致IBV毒力减弱。结果表明NDVLasota株经10倍稀释分别与4株IBV1000倍稀释液等体积混合后接种,能在同一鸡胚中正常增殖,即96h收毒,血凝(HA)方法测定两种病毒的血凝价均能达到最佳滴度,其血凝价不低于各自单独增殖的滴度。4种IBV株与NDV同胚增殖的HA滴度进一步证实,在合适的条件下,IBV均不对NDV的复制产生干扰作用,4种IBV的血凝价无明显差异。免疫试验中用同胚增殖两种病毒二联苗接种,鸡体血清中可产生抗两种病毒的HI抗体,与各自单独接种时的HI抗体水平几乎一致。本试验中制备的IB血凝抗原在4℃保存一个月,其血凝活性保持不变。IBV微量血凝抑制(HI)试验特异性测定结果证实,用自制IBV血凝抗原进行HI试验检测鸡IB阳性血清均能产生稳定的特异性反应,并且无交叉反应。说明HI试验是检测IBV抗体水平的有效可行的方法。  相似文献
4.
将本室分离鉴定的猪伪狂犬病毒(Prv)鄂A株纯化后免疫BALB/C小鼠,取免疫鼠脾细胞与经8氮鸟嘌呤(8-AG)驯化的SP2/0骨髓瘤细胞融合。经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,挑选强阳性孔进行亚克隆,获得5株能稳定分泌伪狂犬病毒单克隆抗体(Prv-McAb)杂交瘤细胞株,分别命名为418、483、576、603、744。经体外连续传代及反复冻存、复苏,杂交瘤细胞均能稳体地分泌McAb。培养上清液及小鼠腹水ELISA效价分别为2-5~2-7和10-5~10-10。各株分泌的McAb不与疱疹病毒科中的DPV、ILTV、IBRV及PPV发生交叉反应。阻断试验结果显示阻断率均大于50%。其中603、744分泌的McAb对用PRV致敏的乳胶具有凝集特性。相加ELISA测定证实603、483、744特异性作用同一抗原位点或作用相关极为密切的抗原位点,另4种McAb作用位点有部分相关性。  相似文献
5.
为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK^-/gG^-/LacZ^+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测;同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明,疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为10^5.0 TCID50;10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的,免疫猪能抵抗强毒的攻击;疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明,4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效,并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。  相似文献
6.
伪狂犬病病毒感染诱导和抑制细胞凋亡   总被引:3,自引:0,他引:3  
用伪狂犬病病毒 (pseudorabies virus,PRV)鄂 A株感染非免疫健康初生仔猪 ,5 d后出现典型的伪狂犬病临床症状。从感染 PRV鄂 A株仔猪的肾脏、肝脏、扁桃体、胸腺、腹股沟淋巴结、颈部淋巴结等组织细胞提取的 DNA,经琼脂糖凝胶电泳呈现大小不等的 180~ 2 0 0 bp整倍数的寡核苷酸片段梯状条带 ,经 PCR方法鉴定为 PRV DNA。末端脱氧核苷转移酶原位标记 [terminal deoxynucleotidyl transferase(Td T) - conjugated d UTP nick end labelling,TUNEL ]法显示 ,部分凋亡的阳性细胞呈现染色质凝聚、细胞核固缩、染色质靠核膜边聚集等形态学变化 ,说明 PRV诱导细胞凋亡是造成急性感染时组织器官广泛损伤的重要原因之一 ;而 PRV感染的大脑、小脑、嗅球及脊髓等神经系统组织中未观察到上述细胞凋亡特征 ,说明 PRV可以抑制急性感染时神经细胞发生凋亡。本试验结果显示 ,在 PRV急性感染状态下 ,病毒诱导细胞凋亡是杀伤细胞的重要途径之一 ,同时这一过程又可通过神经系统病毒基因隐性感染及潜伏期的建立而受到抑制  相似文献
7.
以1996~2000年所进行的主要病毒性疫病的血清学和病原学调查结果为依据,阐述了当前严重影响我国规模化养猪的几种主要病毒性繁殖障碍病,即伪狂犬病、乙型脑炎、细小病毒感染、猪繁殖与呼吸障碍综合征等的流行现状和新特点,分析了这些病毒流行的原因,并提出了相应的防制对策,展望了疾病预防与控制的发展趋势。此外,简要介绍了猪环状病毒病这一新病。  相似文献
8.
乙型脑炎病毒SAl4—14—2株prM基因的克隆与测序   总被引:1,自引:1,他引:0  
以我国乙型脑炎病毒疫苗株SA14-14-2的基因组RNA为模板,设计1对包含prM基因完整编码区的引物,采用一步法RT-PCR技术扩增其prM基因,扩增出大小约558bp特异性带。将其克隆到pMD18-T载体中,用双脱氧末端终止法进行全序列测定,序列分析表明我国疫苗株SA14-14-2的prM基因核苷酸序列与GenBank收录的完全一致。prM基因的获得为进一步研究该基因的免疫原性以及乙型脑炎病毒基因工程疫苗奠定了基础。  相似文献
9.
运用免疫组织化学SABC法对人工感染伪狂犬病病毒的仔猪部分组织进行组织学观察。结果显示,在肺、大脑、小脑、脊髓、脊神经节、淋巴结、扁桃体、胸腺、脾、肝、肾、肾上腺、胃、肠等组织内均发现阳性细胞,尤其在肺、神经组织和淋巴组织内为多,病毒主要侵害上皮细胞、神经细胞和淋巴细胞,主要存在于被感染细胞的胞浆和胞核内,但以胞浆内为主。  相似文献
10.
应用细胞培养微量中和试验(固定病毒稀释血清法)对来自24个猪场共426份血清进行了猪伪狂犬病血清学调查。共检出阳性血清171份,血清阳性率达40.1%,出现血清阳性的猪场有20个,占所检测猪场的83.3%,说明伪狂犬病在我省及我国流行相当严重。对其中50份血清的中和指数(固定血清稀释病毒法)进行了检测,结果中和效价大于1∶2血清的中和指数都在102.5以上。  相似文献
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