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1.
我国猪瘟的流行病学现状分析   总被引:43,自引:1,他引:42  
根据调查、收集的猪瘟(CSF)临床与流行病学资料,分析了全国16个省市自治区48个发病猪场(疫点)的流行状况,调查结果表明,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主,发病多见于3月龄以下的创一猪,发病率与死率普遍较高,流行规模以局部流行为主,同一猪场中育肥猪与种猪的发病率很低,但母猪多呈隐性感染,部分感染母猪表现出繁殖障碍,因此认为隐性感染母猪可能晨仔猪感染的重要传染源,在某些地区,仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度但仍有CSF发生,可能表明猪群的免疫水平不高,调查结果对进一步了解我国CSF的流行现状具有重要的参考价值。  相似文献
2.
以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化的E.coli表达的mE2重组蛋白包被酶标板,用10%的兔血清或马血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组mE2蛋白作为诊断HCV抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。  相似文献
3.
原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化   总被引:12,自引:0,他引:12  
对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白抗原表位区段(mE2)进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离,然后进行变性溶解和复性,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物SDS-PAGE分析结果表明,其纯度达97%。酶联免疫试验测定的结果显示,与复性前变性蛋白相比,纯化蛋白与CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了2-16倍。  相似文献
4.
我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异   总被引:10,自引:0,他引:10  
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 ,以及我国猪瘟病毒流行株在地域分布上的多样性  相似文献
5.
广西猪瘟流行现状的调查分析   总被引:8,自引:0,他引:8  
据对广西13个发病猪场(疫点)猪瘟(CSF)的流行病学调查分析,发现当地CSF流行以非典型为主,典型CSF同时存在,发病猪多在3月龄以下且病程较长。母猪存在隐性感染,部分表现为繁殖障碍,一些临床健康猪存在着带毒问题。此外,从凝似CSF病料中扩增出牛病毒性腹泻病毒(BVDV),表明广西猪群中存在着BVDV的感染。分子流行病学调查结果表明,猪瘟病毒(CSFV)广西流行株的基因型较复杂,分布2个基因群的4个亚群,其亲缘关系与2个传统毒株石门株(Shimen)和兔化弱毒株(HCLV)相距甚远,最高可达20.0%,说明广西CSFV流行株存在着遗传多样性。  相似文献
6.
鸡传染性法氏囊病快速诊断方法的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
本文报道了一种既可以检测IBD囊毒抗原,又可以检测IBD抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法。用本方法检测IBD阳性法氏囊样品122份,结果检出阳性120份,符合率为98.4%。检测阴性法氏羹样品88份,均为阴性。本方法与琼脂扩散试验方法比较,共检测人工感染发病的病死鸡法氏囊97份,结果琼脂扩散检出阳性法氏囊49份(50.51%),阴性48份(49.48%),而用本方法检测结果,全为阳性,检出阳性率为100%,比AGP法检出率高49.48%。检测高免蛋黄液的抗体。16个样品(以2倍递增进行稀释),结果本方法比琼脂扩散试验高1~2个滴度。试验证明该方法特异、敏感,并且快速简便,试验在室温条件下进行,不需要任何仪器设备,用肉眼观察颜色的变化就可判断试验结果,试验反应时间仅需10分钟左右。  相似文献
7.
猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达   总被引:6,自引:1,他引:5  
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(clasical swine fever virus,CSFV)E2蛋白主要抗原编码区基因(mE2)与T4噬菌体SOC基因融合,插入T4噬菌体表达质粒,构建成T4噬菌体SOC位点表达mE2的表达载体plSmE2。将其转化至BL21(DE3)菌,取经IPTG诱导后表达的目的蛋白SDC-mE2进行SOS-PAGE,薄层凝胶扫描分析、Western blot及ELISA等方法检测。结果表明,表达的SOC-nE2蛋白相对分子质量约25700,表达量占菌体总蛋白量的36.7%,并具有与CSFV特异性抗体反应的活性。  相似文献
8.
猪瘟病毒E2蛋白重组T4噬菌体的构建及免疫学特性   总被引:5,自引:1,他引:4  
利用重组 PCR技术将猪瘟病毒 (CSFV) E2基因与 T4噬菌体 SOC基因 C端融合 ,构建了大小为 12 33bp的SOC/ E2融合基因 ,将其插入携带 T4溶菌酶基因 (e)和 denv基因的 T4重组载体 (p RH) ,构建了重组载体 p RSE2 ,通过重组载体与缺失突变型 T4噬菌体基因发生同源重组 ,将 SOC/ E2融合基因整合入 T4噬菌体的基因组中。经EL ISA、Western blot等免疫学检测证实 ,T4噬菌体表达的 E2融合蛋白具有 CSFV免疫学活性 ,动物试验证实 T4 .SOC.E2重组噬菌体免疫鼠后能诱导产生特异性的猪瘟抗体  相似文献
9.
利用基因搭桥技术,在Klenow DNA聚合酶作用下,分别合成猪瘟病毒E2蛋白的3个抗原表位基因,并与原核表达载体pGEX-3X进行连接、转化和筛选鉴定,构建了3个重组质粒pGEX-C、pGEX-D和pGEX-E。在IPTG的诱导下.实现了可溶性蛋白的融合表达(GST-C、GSTD、GST-E),以GST亲和层析柱对融合蛋白进行纯化。应用ELISA和Western-blot检测证实:E抗原表位基因表达的融合蛋白GST-E具有免疫学活性,而C和D的抗原表位基因虽然都表达了融合蛋白GST-C和GSTD,但未检测到免疫学活性。免疫攻毒保护试验表明:融合蛋白GST-E具有一定的免疫保护功能,为多表位疫苗的研究奠定了基础。  相似文献
10.
病毒的持续感染及其产生机理   总被引:4,自引:0,他引:4  
近年来 ,随着人类艾滋病、乙型肝炎及动物临床上慢性猪瘟 (非典型猪瘟 )、犬瘟热等病毒病的不断增多 ,人们对病毒持续感染问题引起广泛重视。持续性感染 ( persistent infection) :是指病毒在宿主体内持续存在 ,潜伏期长达数月至几年甚至终生 ,但不一定持续增殖和持续引起症状。其特点 :病变和症状常与免疫病理或免疫缺陷有关 ,发病后常继续呈进行性 ,大多预后不良 ;除少数例外。自然感染的宿主细胞范围极窄 ,大多局限于某一种属的动物 ,而且常有遗传倾向。1 持续感染的种类 主要有以下几种。1 .1 慢性感染 病毒在机体内持续增殖 ,可不…  相似文献
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