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1.
我国猪瘟的流行病学现状分析   总被引:43,自引:1,他引:42  
根据调查、收集的猪瘟(CSF)临床与流行病学资料,分析了全国16个省市自治区48个发病猪场(疫点)的流行状况,调查结果表明,我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主,发病多见于3月龄以下的创一猪,发病率与死率普遍较高,流行规模以局部流行为主,同一猪场中育肥猪与种猪的发病率很低,但母猪多呈隐性感染,部分感染母猪表现出繁殖障碍,因此认为隐性感染母猪可能晨仔猪感染的重要传染源,在某些地区,仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度但仍有CSF发生,可能表明猪群的免疫水平不高,调查结果对进一步了解我国CSF的流行现状具有重要的参考价值。  相似文献
2.
应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0~ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。  相似文献
3.
以在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区(mE2)为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为:12μg/孔纯化的E.coli表达的mE2重组蛋白包被酶标板,用10%的兔血清或马血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组mE2蛋白作为诊断HCV抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。  相似文献
4.
首先在GinBank查出日本乙型脑炎病毒(JEV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与 呼吸系统综合征病毒(PRRSV)和猪细小病毒(PPV)基因组的所有已知序列,对各病毒基因区域进行同源性分析,结果各病毒基因组的结构特点,发现并确定了PRV的gH基因区、JEV的多聚蛋白基因区、PRRSV的结构蛋白区和PPV的VP2基因区为各自病毒保守序列。利用Goldkey软件对上述保守的特殊序列进行引物设计,要求G+C含量  相似文献
5.
原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化   总被引:12,自引:0,他引:12  
对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白抗原表位区段(mE2)进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离,然后进行变性溶解和复性,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物SDS-PAGE分析结果表明,其纯度达97%。酶联免疫试验测定的结果显示,与复性前变性蛋白相比,纯化蛋白与CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了2-16倍。  相似文献
6.
我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异   总被引:10,自引:0,他引:10  
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 ,以及我国猪瘟病毒流行株在地域分布上的多样性  相似文献
7.
猪瘟病毒保护性抗原E2基因的克隆及在原核细胞中的表达   总被引:8,自引:0,他引:8  
应用RT-PCR分两段扩增猪瘟病毒(HCV)石门株E2基因,然后对其进行了克隆。利用两个片段重叠部分的单一BglⅡ位点,将它们连接成为完整的E2基因,并克隆到PUC19质粒中,获得重 质粒PHCF2。另设计一对引物,以PHCF2为模板扩增出不含信号肽的E2基因,然后将其克隆到表达载体质粒pBV220和PET_28a(+)中,获得重组质粒PBVE2和PETE2,用酶切,PCR和序列分析鉴定E2基因插  相似文献
8.
以在E.cloi高效表达的猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区为抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗猪IgG为二抗,建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为;1.2μg/孔纯化的E.coli表达的mE2重组蛋白包被酶标板,用10%的兔血清或马血清进行封闭,以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。  相似文献
9.
猪瘟流行特征的新变化   总被引:7,自引:0,他引:7  
猪瘟是由黄病毒科 (TheFamilyFlaviviridae)瘟病毒属(TheGenusPestivirus)成员之一的猪瘟病毒 (ClassicalSwineFeverVirus,CSFV ;或HogCholeraVirus,HCV)引起猪的一种高度接触传染性传染病[1,2 ] ,也是危害我国养猪业的最重要的烈性传染病之一。  虽然迄今为止猪瘟病毒还只有一种血清型 ,但由于各种原因 ,自 2 0世纪六七十年代以来 ,猪瘟在临床与流行特点上已发生了很大的变化。1 猪瘟的历史与分布猪瘟的起源国际上目前尚无统一的认识。报道较多…  相似文献
10.
轮状病毒VP4、VP7基因的克隆与核苷酸序列分析   总被引:7,自引:3,他引:4  
用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从轮状病毒感染的细胞中扩增816bp,916bp的VP4,VP7片段中抗原表位区。通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆载体质粒pGEM-T上,转化至受体菌DH5α中,提取质粒经PCR扩增,酶切鉴定,证明重组质粒pT-V4,PT-V7中含有轮状病毒的VP4,VP7基因片段。经核苷酸序列分析。表明克隆了轮状病毒主要保护性抗原VP4,VP7基因中抗原表位区。  相似文献
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