中美动物源微生物耐药性监测对比研究

抗微生物药物在保障动物健康和食品安全方面发挥了重要作用,为了应对日益严峻的微生物耐药性问题,动物源微生物耐药性监测是应对微生物耐药性风险的重要防控策略。在“同一健康体系”工作框架下,中国和美国积极进行动物源微生物耐药性监测。本文通过对比研究中美动物源微生物耐药性系统的监测设计、监测对象和监测数据应用情况,结合我国畜牧兽医行业现状,立足我国动物源微生物耐药性监测客观需求,旨在为我国动物源微生物耐药性监测工作提供参考。     

禽源沙门菌对四环素的耐药性及耐药基因调查分析

为了更好地了解禽源沙门菌对四环素的耐药性及耐药基因分布,从不同来源的家禽样品中分离沙门菌,调查其对四环素的耐药性以及耐药菌株中8种四环素耐药基因[tet(A)、tet(B)、tet(C)、tet(W)、tet(M)、tet(D)、tet(K)和tet(L)]的携带情况.结果表明,18.8%的沙门菌分离株对四环素耐药,健康成鸡分离株对四环素的耐药性明显高于雏鸡、死胚或病禽分离株;四环素耐药株中tet(A)、tet(B)和tet(M)基因的携带比例分别为73.1%、11.5%和3.8%,说明沙门菌对四环素的耐药机制以tet(A)和tet(B)基因介导的主动外排为主.本研究首次在对四环素耐药的沙门菌中检测到tet(M)基因,说明tet(M)基因在沙门菌对四环素的耐药性方面也具有潜在的作用.     

硫酸多粘菌素E在猪体内的药代动力学和生物利用度研究

健康断奶仔猪 5头 ,分别进行单剂量肌注 (2 5和 5 0mg/kgb .w .)和静注 (2 5mg/kgb .w .)给药 ,并用微生物学方法对硫酸多粘菌素E在猪体内的药代动力学和绝对生物利用度进行了研究。以 3P97程序处理血药浓度—时间数据 ,结果表明 ,以 2 5和 5 0mg/kgb .w .的剂量肌注给药时 ,其血清中药物的峰浓度 (Cmax)分别为 3 73± 0 2 8μg/ml和 6 40± 0 1 8μg/ml,达峰时间分别为 32 2 2± 1 51min和 34 1 8± 1 76min ,消除半衰期 (t1 / 2 β)为 2 55 99± 1 3 65min和 2 64 0 8± 2 8 57min ;以 2 5mg/kgb .w .的剂量静注给药时 ,其消除半衰期 (t1 / 2 β)为 2 51 2 8± 1 2 53min。静注和肌注在体内的分布均为一级吸收二室模型。肌注 2 5和 5 0mg/kgb .w .剂量的注射液时 ,其平均绝对生物利用度分别为 98 30 %和 88 54 %。     

猪源大肠杆菌血清型耐药性整合子调查

分别在北京地区采集正常猪泄殖腔拭子50份,河南123份,分离到大肠杆菌150株,分离率为86.7%.菌株血清型分布广,呈地区性、多样性和可变性.北京菌株耐药率低,除对四环素为73.8%外,对其他21种药物耐药率均在16.7%以下;河南地区菌株耐药率高,对青霉素类、磺胺甲基异噁唑高达75.0%以上.北京地区菌株整合子携带率为18.6%,河南地区为75.7%.整合子携带频率与细菌耐药性相关.     

北京地区健康肉鸡携带沙门氏菌状况调查

禽源沙门氏菌是一种重要的人畜共患病原菌和食源性病原菌。肉鸡作为人肠炎沙门氏菌感染的主要来源,目前国内对其沙门氏菌携带状况的研究资料较少。为了解北京地区健康肉鸡中沙门氏菌的携带情况,本研究共采集该地区28个肉鸡养殖场的盲肠或泄殖腔拭子样品1310份,进行沙门氏菌的分离和鉴定,总共分离出沙门氏菌54株。血清分型结果表明,肠炎和爪哇安那为两种优势血清型,所占比例分别为31.5%和25.9%;其次是禽伤寒,占比9.3%。本研究为北京地区肉鸡场沙门氏菌病的防控及首都公共卫生安全提供了基础资料。     

猪肺炎支原体体外抗菌药物敏感性试验研究

为了解猪肺炎支原体对抗菌药物的敏感性,采用宏量肉汤稀释法对4株猪肺炎支原体的最小抑菌浓度（MIC）值进行了测定。结果表明,猪肺炎支原体对泰妙菌素和环丙沙星最为敏感,MIC≤0．03μg／mL,其次分别为四环素类药物（包括四环素和多西环素）、林可霉素和泰乐菌素,而对氟苯尼考的敏感性则较差。本研究可为猪支原体肺炎的防控以及抗菌药物的合理使用提供参考。     

ELISA法测定牛奶和鸡肌肉中四环素类药物残留

以本实验室研制的四环素类药物多残留检测试剂盒为基础，建立了牛奶和鸡肉中四环素、土霉素、金霉素药和多西环素的ELISA检测方法。该方法对牛奶和鸡肉中四环素的检测限为7μg／L（μg／kg）左右。在牛奶和鸡肉中，4种四环素类药物100μg／L（μg／kg）浓度的添加回收率范围为43．6％～101．4％，批内变异系数小于25％，批间变异系数在30％以内。牛奶的临界值为39．5μg／L，鸡肉的临界值为35.3μg／kg。     

硫酸多粘菌素E注射液及其药物动力学研究

 采用硫酸多粘菌素E为原料与局部止痛剂、抗氧化剂及其它附加剂 ,在一定的 pH值范围内配制成硫酸多粘菌素E注射液。 2 .5 %硫酸多粘菌素E注射液无明显的局部组织刺激性 ,而 5 .0 %硫酸多粘菌素E注射液刺激性较严重。硫酸多粘菌素E对小鼠急性毒性表现为神经中毒症状 ,LD50 分别为 38.72mg·kg-1(肌注 )和 4 31.39mg·kg-1(内服 )。给断奶仔猪肌内注射 10 .0mg·kg-1(每天 1次 ,连续 5d)剂量 2 .5 %硫酸多粘菌素E注射液 ,肝、肾组织有轻微损伤 ,未见其它不良症状 ;按 15 .0mg·kg-1(每天 1次 ,连续 5d)剂量连续给药 ,4～ 5d后有明显的神经中毒症状 ,肝、肾组织损伤较 10 .0mg·kg-1剂量严重。试验中血液形态学检查未见异常 ;与肾功能相关的血液生化指标基本正常 ,而与肝功能相关的血液生化指标比正常范围偏高 ,但在停药 5d时各项指标均恢复正常。分别以2 .5和 5 .0mg·kg-1的剂量肌注给药时 ,其血清中药物的峰浓度 (Cmax)分别为 3.73± 0 .2 8和 6 .4 0± 0 .18μg·ml-1,达峰时间分别为 32± 1.5和 34± 1.8min ,消除半衰期 (t1/ 2 β)为 2 5 6± 14和 2 6 4± 2 9min ;以 2 .5mg·kg-1的剂量静脉注射给药时 ,其消除半衰期 (t1/ 2 β)为 2 5 1± 13min。静注和肌注在体内的分布均为一级吸收二室模型。肌注     

牛奶中四环素类药物残留的确证方法--液质联用法

为了确证牛奶中土霉素、四环素、金霉素的残留，建立了电喷雾高效液相色谱／串联质谱法，采用正离子检测，选择离子方式扫描。牛奶样品经Mcllvaine-EDTA缓冲溶液提取离心后，上清液过C18小柱净化后甲醇洗脱，然后氮气吹干，甲醇-水（30：70）溶解（以去甲金霉素为内标）后进行分析。结果表明，牛奶中土霉素、四环素和金霉素的检测限（LODs）为0．01mg／L，定量限（LOQs）为0．025mg／L。3种药物在0．05～0．5mg／L范围内均呈良好线性关系，并且3个添加浓度的平均回收率范围为70．0％～87．6％，批内变异系数不大于10％，以最大残留限量浓度添加后所测得回收率的批间变异系数小于15％。本方法特异性强、灵敏度高、准确可靠，可作为牛奶及其他动物组织中四环素类药物残留的确证方法。     

我国鸡源沙门氏菌的血清型分布和对黏菌素耐药性的研究

黏菌素是目前临床治疗多重耐药革兰阴性菌感染的重要药物之一,mcr-1基因的携带可介导黏菌素耐药性的产生和扩散。鸡源沙门氏菌作为重要的食源性病原菌,其血清型分布、对黏菌素的耐药性及mcr-1基因的携带对于公共卫生安全具有重要意义。研究对2014-2016年从全国12个省份成鸡分离的450株沙门氏菌进行了血清分型;用微量肉汤稀释法进行了对黏菌素的MIC检测;并用PCR方法对mcr-1基因的携带情况进行了调查。结果表明,鸡源沙门氏菌的优势血清型以肠炎、鸡白痢和鼠伤寒为主;肠炎沙门氏菌对黏菌素的耐药性最强(62.9%),其次为鸡白痢(50.5%)和杜伊斯堡(38.1%);鼠伤寒沙门氏菌对黏菌素最敏感(仅7.1%的菌株耐药);未检测出mcr-1基因阳性的沙门氏菌。研究结果为鸡源沙门氏菌感染的防控以及兽医临床黏菌素的使用和风险评估提供了技术参考。