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1.
为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。 相似文献
2.
试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板,RT-PCR特异扩增H基因,克隆至表达载体pFastBacTMHTA上,酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性,并将重组质粒pFastBacTMHTA-H转化大肠杆菌DH10BacTM感受态细胞,同源重组构建穿梭质粒rBacmid-H,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒。利用IFA和Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。结果显示,重组质粒pFastBacTMHTA-H酶切测序鉴定正确,该H基因属于Asia-1强毒株,与参考毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别为89.8%~99.3%和89.6%~99.5%。在杆状病毒中所表达的H蛋白能与CDV阳性血清及His-tag抗体发生特异性反应,IFA鉴定能够产生特异性绿色荧光,且在68ku左右出现蛋白条带,表明H蛋白成功表达且具有良好的反应原性。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,为后续蛋白结构和抗原特性差异分析、单抗制备、CDV亚单位疫苗的开发奠定了基础。 相似文献
3.
4.
5.
应用RT-PCR方法对南京、上海和合肥猪源隐孢子虫卵囊SSU rRNA部分序列进行扩增,产物测序后提交GenBank,收录号为DQ855266、DQ855267;用BLAST和DNAStar软件与GenBank参考序列进行比较,分析其同源性,绘制系统发育进化树,结合卵囊形态学观察和对小鼠、大鼠、兔、山羊和鸡的传染性试验确定隐孢子虫种类或基因型。结果表明,3地区猪源隐孢子虫分离株与微小隐孢子虫(C.parvum)同源性达94%~100%,与C.parvummouse型有99.8%~100%的同源性,并处于进化树的同一分支。因此,3地区猪源隐孢子虫是C.parvummouse型,提示猪和鼠之间存在交叉传播的可能。 相似文献
6.
高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮浓度和抗氧化功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本试验旨在研究高钙饲粮对青年蛋鸡血清一氧化氮(NO)浓度和抗氧化功能的影响。将 35日龄 100羽伊沙蛋鸡随机均分为对照组(含钙 1.00%)和高钙组(含钙 3.78%),每组 5个重复,每个重复 10羽。每天观察鸡的精神状态、食欲和粪便情况。在饲喂高钙饲粮第 0、8、16、24和 32天时,分别测定 2组鸡的血清中 NO浓度和丙二醛含量及抗氧化酶系统的变化。结果表明:1)高钙饲粮能引起青年蛋鸡长期腹泻,在饲喂高钙饲粮的第 8天就发生高血钙症。2)与对照组相比,高钙组在饲喂高钙饲粮第 8天和第 16天血清 NO浓度无显著变化(P>0.05),第24天和第 32天显著升高(P<0.05);第 8天和第 24天血清超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力无显著变化(P>0.05),第 16天显著升高(P<0.05),第 32天显著降低(P<0.05);第 8、16、24天血清丙二醛含量无显著变化(P>0.05),第 32天显著升高(P<0.05);第 24天和第 32天黄嘌呤氧化酶活性有升高趋势(P>0.05)。结果提示,饲喂高钙饲粮可导致青年蛋鸡发生长期腹泻,引起高血钙症,导致其机体内自由基的产生与清除的动态平衡遭到破坏,使自由基的产生远远超出清除能力。 相似文献
7.
对硒的生物学特性,硒对奶牛健康的影响以及奶牛对硒的需要量作了比较全面的综述,为奶牛饲养过程提供科学的参考依据。 相似文献
8.
雏鸡感染马立克氏病强毒后抗氧化酶活性和丙二醛水平的变化 总被引:5,自引:0,他引:5
对10日龄雏鸡人工感染马立克氏病毒后,马立克氏病发病率为78.0%,死亡率为76.0%,在攻毒后2,4和6周,感染鸡血清中超氧化物歧化酶(SOD),血液中过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性在总体上的均显著低健康对照组鸡(P〈0.05),血清丙二醛水平极显著地高于健康对照组鸡(P〈0.01)。结合对马立克氏病临床病例的研究结果认为,氧自由基介入了马立克氏病的发病过程。 相似文献
9.
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