猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析

[目的]在基因工程菌中实现猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因的高效表达,对表达的重组蛋白进行纯化,并探讨其免疫学活性及应用价值。[方法]将已构建好的重组表达载体pET-ORF7转化大肠杆菌BL21（DE3）,用IPTG在最适条件下诱导表达,其表达产物用SDS-PAGE和Western Blot进行检测。应用Ni-NTAHis.Bind Resin层析柱在变性条件下纯化表达产物,通过梯度透析进行复性。采用Western Blot及间接ELISA法检测复性后重组蛋白的免疫学活性。[结果]重组质粒pET-ORF7在大肠杆菌中以融合形式成功表达,融合表达产物主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE检测所表达的重组蛋白分子量为33 kD左右,与预期大小相符。Band-scan软件对表达蛋白分析发现,表达产物约占菌体蛋白的50%。Western Blot及间接ELISA法显示复性后的重组蛋白与PRRSV阳性血清有特异性结合反应,表明其具有良好的免疫学活性。[结论]该试验将为进一步研制PRRSV单克隆抗体及诊断试剂盒奠定基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）为不分节段、聚腺苷酸化、有囊膜的单股正链RNA病毒。其基因组长约15kb，含有8个开放的阅读框架（ORFs）。PRRSV基因组的顺序依次为：5’-ORFla-ORFlb-ORF（2—6）．ORFT-3’。鲁韦韦等分析表明，PRRSV的ORF7基因保守性较好，变异较小。此外，ORF7编码的核衣壳蛋白（N蛋白）具有良好的免疫原性及反应原性，机体产生的PRRSV抗体主要是针对N蛋白的。因此，N蛋白常可作为诊断抗原来检测PRRSV。     

鲤鱼竖鳞病病原和病理的研究

嗜水气单胞菌为该病的条件致病菌。在适宜的条件下，该菌可通过体表伤口进入鱼体引起疾病。该病以体表炎性水肿、竖鳞和出血性败血症为主要病理学表现，以各器官功能衰竭为致死原因。     

一起疑似鸡传染性支气管炎继发大肠杆菌病的诊治

鸡传染性支气管炎 (ＩＢ)是由支气管炎病毒所引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病。大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌所引起的人畜共患传染病。鸡传染性支气管炎和大肠杆菌病有时会同时或相继发生 ,给一些养殖场或养鸡户造成巨大的经济损失。 2 0 0 0年 ,通辽市唐家乡某鸡场产蛋鸡突然暴发了以呼吸系统病变和产蛋减少、蛋质下降为主要特征的传染病 ,初步确诊为鸡传染性支气管炎继发大肠杆菌感染。1　发病情况和临床症状该鸡场饲养黄金褐产蛋鸡 2 10 0只 ,经检查约有 160 0余只鸡发病 ,只有少数病鸡有张口喘气、甩头等症状。病鸡怕冷聚堆 ,食…     

谨防掠夺养殖财富的"黑手"--直面猪禽继发性免疫缺陷病及其危害

继发性IDD常无特征性临床症状和病理变化,临床上仅表现猪禽发育不良、抵抗力低下、对特定疫苗无免疫反应,易反复感染、多重感染且治疗效果不佳,但其威胁是存在着机会性感染而引起严重后果。猪禽继发性IDD的原因非常复杂,包括感染性因素和非感染性因素,其中感染、淋巴组织来源的恶性肿瘤、细胞毒药物、某些抗茵药物及应激则是重要因素。而感染尤其是病毒性感染又是最重要、最常见、最严重的因素。专家指出,一些病毒感染猪或禽后,虽然有些耐过不死,但却对免疫系统造成了程度不同的损伤,引起暂时性或永久性的免疫缺陷。病毒对肌体的免疫损伤主要表现在干扰免疫系统对抗原的提呈;抑制自然杀伤细胞（NK）的功能及吞噬细胞吞噬功能和灭菌能力;通过干扰淋巴因子的生成、淋巴介导信号和淋巴因子效应功能而抑制淋巴因子的作用,通过干扰抗体反应功能和补体反应功能而逃避体液免疫反应对其作用,从而使接种疫苗效果甚微或无效,导致免疫防疫无法实现,例如患猪因免疫缺陷可继发其他疾病,猪瘟的继发感染是造成乳猪和保育猪高死亡率的主要原因;继发Ⅱ型环状病毒感染是造成保育后期猪至生长前期猪（7周龄～13周龄）死亡率升高的原因。Ⅱ型环状病毒也是中大猪呼吸道疾病综合征的重要病原之一;猪副嗜血杆菌的继发感染,是造成10周龄以前的小猪死亡率升高最重要的细菌性致病因子,而猪副嗜血杆菌的严重感染又成为蓝耳病存在的“指示病”。进而加重病情,使死亡率明显上升,因此,猪继发性IDD可造成养殖企业（户）损失惨重。及时、准确首诊和防制猪、禽病毒性传染病,以防止继发性免疫缺陷病已显得十分重要。 本文中就猪、禽继发性免疫缺陷病（IDD）降低猪禽免疫功能,抑制特定疫?     

羊附红细胞体病的诊断和治疗

附红细胞体病是由于附红细胞体寄生于动物血液,发生溶血、贫血、黄疽、体温偏高和全身皮肤粘膜出血的一种疾病。国内关于猪、家兔、奶牛、马、羊的附红细胞体病已有报道。近发现由澳大利亚引进的美利奴种公羊有本病,报告如下。发病情况:哲里木某种畜场,1985年10月由澳大利亚引进美利奴公羊3只,其中     

鳙鱼尾鳍软纤维瘤一例

关于鱼类肿瘤研究历史较短,全世界已记录的仅有600多例,国内报道更少.有关鳙鱼尾鳍软纤维瘤组织病理研究尚未见报道.1990年作者于内蒙古的东五家子水库采到一尾尾鳍上长有肿瘤的鳙鱼(Aristichthys nobilts).体长为21.0     

脂多糖诱导小鼠肾小管上皮细胞和肺泡巨噬细胞IL-12和TNF-α表达的研究

为了研究脂多糖(LPS)诱导小鼠肾小管上皮细胞和肺泡巨噬细胞IL-12和TNF-α表达的关系,试验采用不同浓度LPS以不同时间体外刺激肾小管上皮细胞(TEC)和肺泡巨噬细胞(AM),用ELISA法分别检测上清液中IL-12和TNF-α的分泌量。结果表明:用2μg/mLLPS刺激TEC,其分泌IL-12的量于24小时达到峰值(P0.01);随着LPS浓度的增加,TEC分泌IL-12的量逐渐增大,当LPS浓度增加到20μg/mL时IL-12的分泌量达到峰值。用10μg/mLLPS刺激AM,AM分泌TNF-α的量于2小时达到峰值(P0.01),随后逐渐下降;随着LPS浓度的变化,TNF-α分泌水平有明显不同。说明在一定的剂量范围内,IL-12和TNF-α的分泌量与LPS呈剂量及时间依赖关系,但随着LPS刺激时间及浓度的增加,IL-12和TNF-α的分泌量逐渐减少;不同浓度的LPS与细胞因子的产生效价有相关性。