碱地黑牛ELOVL2和ELOVL5基因的克隆测序及表达分析研究

超长链脂肪酸延长酶（Elongation of Very Long Chain Fatty Acids,ELOVLs）是合成脂肪酸过程中的关键酶,与脂类的合成以及脂肪酸的代谢密切相关。本实验旨在研究碱地黑牛ELOVL2、ELOVL5基因CDS区序列及其在机体各组织中的表达情况,探讨ELOVL2、ELOVL5基因理化性质及表达规律。通过克隆获得的碱地黑牛ELOVL2和ELOVL5基因CDS区分别为885、900 bp,编码294、299个氨基酸,均为疏水性蛋白;进化树显示碱地黑牛ELOVL2、ELOVL5基因与牛、山羊、绵羊同源性最高。α-螺旋和无规则卷曲是主要的二级结构,对二者三级结构及氨基酸序列进行对比,发现ELOVL2氨基酸序列中第234位的半胱氨酸等同于ELOVL5中第231位的色氨酸,ELOVL2 C234和ELOVL5等效位置的W231对底物结合的特异性有影响,若将ELOVL5 W231替换到ELOVL2中的等效位置,ELOVL2将DPA转化为24:5n-3的能力丧失。亚细胞定位结果显示ELOVL2、ELOVL5蛋白主要定位在内质网上,荧光定量PCR实验结果显示二者均在肝脏中...     

碱地黑牛FADS1基因克隆测序及表达分析

实验旨在研究碱地黑牛脂肪酸脱氢酶1基因（FADS1）CDS区序列和表达情况，并探讨FADS1基因理化性质及表达规律。本研究通过克隆测序构建FADS1的系统进化树并进行生物信息学分析，用免疫组化技术对FADS1蛋白进行定位分析，免疫印迹检测FADS1蛋白在实验组织的表达情况。生物信息学结果显示碱地黑牛FADS1 CDS区长1 083 bp，编码360个氨基酸。FADS1不存在信号肽。FADS1进化树显示碱地黑牛FADS1与牛的遗传距离较近（99.9%），与鸡的遗传距离较远（80.0%）。结构预测表明FADS1中α螺旋占48.61%,β折叠占3.61%，延长链占13.06%，无规则卷曲占34.72%,4个α螺旋构成四螺旋束并在螺旋肽段之间形成一个疏水性的空腔，整体呈中空的桶状。互作网络解析显示：FADS1与ACSL1、ACSL3、ELOVL2、ELOVL5、PTPLA、PTPLB、ACOX1、ACOX2、ACADM、FASN、TECR等蛋白互作，参与FADS1-ELOVL5-HSD17B12-ACADM-ACOX1、FADS1-FASN-ACADVL-ACOX2等脂肪酸合成、代谢、脂滴生成...     

浅谈中国对虾人工越冬的几个技术问题

自1985年以来,黄渤海的对虾人工越冬已初具规模,初步掌握了亲虾越冬期的生物学规律及一般越冬生产技术和管理措施,并且有相当数量的越冬亲虾投入了育苗生产。虽然取得     

黄河干流中上游水生生物资源调查研究

In order to protect scientifically the fishery resources and eco-environment of Yellow River , nine investigatioins on hydrobios in the middle and upper reaches of main Yellow River had been carried out since 2002 according to The Standard for the investigation of inland fishery resources. The investigations showed the present status of the fishery resources in these reaches are as follows ：87species （genera）and 8 phylum of phytoplankton,42 species and 6 phylum of zooplankton, 14 species（genera） of banthic organism , 5 species of hydroplant, 38 species of fish. A comparative analysis,With the results of ＂the Yellow River Fishery Resources Survey in 1982＂,shows that the general trend of the plankton is that the average biomass is getting apparently decreased, the aboriginal fishes are endangered intensifically, and there must be some problem of aquatic biological invasion in these reaches. A granual miniaturization of fishes in main Yellow River has been noticed. The authors proposed to carry out investigation and researches on hydrobios resources in main Yellow River , and develop plans to protect the fishery resources in yellow River, which will be an important basis for rehabilitation of the Yellow River waters and it＇s ecological environment, for the maintenance of biological diversity of Yellow River＇s waters. And this work will be of great significance for people＇s life and sustainable development of economics in Yellow River basin.     

布莱凯特黑牛MYPN基因克隆测序及表达分析

实验旨在研究布莱凯特黑牛MYPN基因CDS区序列和表达情况,探讨MYPN基因理化性质及表达规律,为探究其与肌肉生长发育关系奠定基础。克隆结果表明：MYPN基因CDS区全长2 841 bp;进化树结果显示：布莱凯特黑牛MYPN基因与牛（100%）、绵羊（97.57%）、山羊（97.50%）同源性高;生物信息学分析表明：MYPN编码946个氨基酸,为亲水性不稳定碱性蛋白;qRT-PCR结果显示：MYPN在背最长肌中表达量最高;免疫组化显示：MYPN主要在肌浆内的肌原纤维中表达;Western Blot结果显示：MYPN蛋白在肌肉中表达量最高。综上,MYPN参与肉牛肌肉生长发育的调节,可作为肉质性状辅助标记基因。     

bta-miR-145通过负调控MYO5A参与布莱凯特黑牛骨骼肌发育的机制研究

骨骼肌的发育是畜禽生长过程中的重要阶段，miRNA作为肌肉生成和骨骼肌再生的基本调节因子具有重要作用，本研究旨在探究bta-miR-145参与调控布莱凯特黑牛背最长肌发育的分子机制。采集布莱凯特黑牛和鲁西黄牛背最长肌进行sRNA建库，通过GO功能注释和KEGG富集分析筛选与骨骼肌功能相关的bta-miR-145，生信分析进行保守性分析及预测其靶基因；以布莱凯特黑牛骨骼肌细胞为细胞模型，转染btamiR-145 mimic和inhibitor,48 h后2%马血清诱导并观察分化过程，CCK-8试验和EdU染色法检测细胞增殖率；qRT-PCR检测靶基因MYO5A以及增殖分化标志基因（PCNA、CDK2、Myf5、Myh1）的表达量。结果表明，转染bta-miR-145 mimic可降低布莱凯特黑牛骨骼肌细胞分化（Myf5、Myh1）和增殖（PCNA、CDK2）标记基因的表达（P<0.01），抑制MYO5A的表达（P<0.01），转染bta-miR-145 inhibitor则促进骨骼肌细胞分化和增殖标记基因的表达（P<0.05），促进MYO5A的表达（P<0.01）...