光照、氧气、pH和盐度对沼泽红假单胞菌2-8菌株生长和亚硝酸盐消除的影响

以1株具有亚硝酸盐消除能力的沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）2-8菌株（简称2-8菌株）为材料,研究了不同光照和氧组合、pH、盐度对菌株生长和亚硝酸盐消除能力的影响。结果发现,光照厌氧条件最利于2-8菌株的生长,该条件下菌株亚硝酸盐消除能力最强,25h消除率达（91.33±1.27）%;菌株在pH7.0时生长和亚硝酸盐消除能力最强,25h亚硝酸盐消除率达到（95.58±4.34）%,在pH9.0以上和5.0以下时基本不生长;菌株在w（NaCl）为0和0.4%的培养基中生长和亚硝酸盐消除能力最强,在w（NaCl）为0.8%～2.0%的培养基中,生长和亚硝酸盐消除能力随w（NaCl）增高而减弱。测定的4个环境因子主要通过影响菌株的生长来影响其对亚硝酸盐的消除能力。     

利用16S rDNA结合gyrA和gyrB基因对生防芽孢杆菌R31的快速鉴定

克隆16S rDNA、DNA促旋酶A亚基编码基因gyrA和B亚基编码基因gyrB对分离自石斛兰（Dendrobiumsp.）叶片的广谱抗真菌生防芽孢杆菌R31进行鉴定。首先通过生理生化测定和克隆16S rDNA序列,分析显示其属于芽孢杆菌属（Bacillus）,但不能准确鉴定到种;然后分别利用克隆的gyrA基因和gyrB基因以及其BLAST分析结果构建系统发育树,最终将该菌株确定为枯草芽孢杆菌（B.subtilis）。结果显示利用16S rDNA与gyrA基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌,利用16S rDNA与gyrB基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌及其近缘种。     

温度对西芹黄萎病病原菌生长和繁殖影响的研究

田间流行病学调查发现,气温高于25℃时,西芹黄萎病容易发生和流行.为了解温度对西芹黄萎病流行的影响,室内研究了不同温度下西芹黄萎病病原菌(Fusarium oxyporum f.sp.apii,FOA)的生长和繁殖情况.结果显示,PDA培养的FOA菌丝在25℃时生长最好;埋放在土壤中的FOA小型分生孢子在35℃时萌发率最高;利用土壤浸提液培养的FOA在25℃时菌丝生长速度显著高于其他温度,总孢子产量在30℃和35℃时显著高于其他温度,小型分生孢子在高于25℃时是最主要的孢子.温度高于25℃的确有利于FOA的生长、繁殖,有利于病害在田间流行,与流行病学调查的结果吻合.表明温度是影响西芹黄萎病流行暴发的关键生态因子.     

西芹黄萎病防治药剂筛选和毒力测定

本文针对西芹黄萎病病原菌开展室内防治药剂筛选和药剂毒力测定。按照药剂最大推荐剂量从14种供试药剂中初筛出8种有效药剂,以进口多菌灵、菌哥、新世生、瓜果类太宝、太医最佳,对菌丝生长的抑制率达100%。8种药剂对病原菌菌丝生长的EC50依次为进口多菌灵（0.0063 mg/ml）＜太医（0.0073 mg/ml）＜活根菌灭（0.0077 mg/ml）＜枯萎灵（0.0079 mg/ml）＜瓜果类太保（0.0092 mg/ml）＜根腐宁（0.0103 mg/ml）＜新世生(0.0192 mg/ml) ＜菌哥（0.0844mg/ml）,进口多菌灵和活根菌灭对病原菌孢子萌发的EC50分别为1.50×10-4 mg/ml和1.55×10-4 mg/ml。     

二氧化氯对香蕉枯萎病菌和细菌性软腐病菌的消毒效果研究

研究不同浓度二氧化氯(ClO2)对土壤和水体中香蕉枯萎病菌小型分生孢子和水体中香蕉细菌性软腐病菌的杀灭效果,为控制香蕉枯萎病和软腐病的传播提供依据.通过统计分析消毒前后镰刀菌孢子和细菌的数量发现:3 mg/L以上ClO2可将待测镰刀菌孢子100％杀灭;20mg/L的ClO2淹土不能100％杀死土样中的镰刀菌孢子;800 mg/L以上ClO2浇灌粉蕉根系周边的土壤可有效减少镰刀菌数量,高于1 500mg/L ClO2消毒液可将土壤中镰刀菌100％杀灭.二氧化氯消毒显著降低土壤中细菌的数量,显著增加土壤真菌的数量,并明显减少土壤细菌和真菌的种类.5 mg/L的ClO2可将水体中香蕉细菌性软腐病菌100％杀灭.研究结果表明,高于5 mg/L的ClO2进行水体消毒可有效预防枯萎病和软腐病通过水源传播,对发病蕉穴土壤的消毒可以使用1 500 mg/L以上的C]O2处理以达到清除病原的目的.     

棕榈科植物叶斑病病原菌的生物学特性及药剂筛选试验

对引起银海枣(Phoenix sylvestris)、加拿利海枣(P.canariensis)、酒瓶椰子(Hyophorbe lagenicaulis)和棍棒椰子(H.verschaffeltii)叶斑病的病原真菌拟盘多毛胞(Pestalotiopsis palmarum)开展了生物学特性研究和防治药剂筛选。试验结果表明,该菌的最适生长温度为20～25℃;12 h光暗交替有利于子座的形成;菌丝生长最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨;甲基托布津、代森锰锌、多菌灵、扑海因、腈菌唑等对该菌的菌丝体生长均有较强的抑制效果,尤其以50%扑海因悬浮剂对其有较好的抑制效果,其EC50值为0.5625 mg/mL。     

饲用地衣芽孢杆菌的生物学特性研究

从饲料应用学的角度对地衣芽孢杆菌的各项特性进行测试,并总结出一套可行的试验方法和结果判断标准.通过对地衣芽孢杆菌的形态和生化培养性质观察,不同梯度的温度、酸度、胆盐和人工胃液处理对地衣芽孢杆菌存活率的影响,及常用药物添加剂和微量元素对地衣芽孢杆菌的影响,及地衣芽孢杆菌对几种致病菌和抗营养因子的影响进行研究.结果表明,地衣芽孢杆菌对各种试验处理呈现出特征性表现,这说明,地衣芽孢杆菌具备良好的饲料学特性,是优良的益生菌菌株.     

化学农药与芽胞杆菌M3、S11菌株对西芹黄萎病的防治效果

利用化学药剂与生防菌结合，对由尖孢镰刀菌芹菜专化型引起的西芹黄萎病进行综合防治研究。结果表明：苗期使用50 %多菌灵可湿性粉剂（WP）、50 %福美双•多菌灵WP（活根菌灭）或40 %噁霉灵WP（噁霉敌）灌根均能显著消除育苗基质中的病原菌孢子，孢子下降率达99.00 %以上；大田继续使用上述3种化学药剂或改用生防菌芽孢杆菌S11和M3，都能够显著降低西芹黄萎病发病率，防治效果最高为85.98 %；其中持续单独使用50 %多菌灵WP或苗期使用50 %多菌灵WP、大田改用生防菌芽孢杆菌对西芹的生长没有不良影响。     

绿色荧光蛋白标记的枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖研究

为了更直观地了解植物内生枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖情况，评估其定殖能力，为西芹黄萎病生物防治提供依据。通过原生质体转化法将携带绿色荧光蛋白基因的质粒pHT315-gfp导入枯草芽胞杆菌R31细胞中，对菌株进行gfp标记，然后利用gfp标记菌株灌根处理西芹苗，研究其在西芹根际的定殖形式和能力。结果获得了携带pHT315-gfp质粒的R31-gfp菌株，该质粒可以在R31细胞中稳定表达，标记菌R31-gfp在蓝光激发下可以稳定发出强的绿色荧光。利用标记菌接种西芹幼苗后，可以在根系表皮检测到绿色荧光膜。对其定殖量的检测发现，接种3天后标记菌在根表和根际土中稳定定殖，定殖量分别达到1.4×104 cfu/g和7.6×104 cfu/g，并长期以该水平稳定定殖，到第65天仍可在根表和根际土检测到9.1×104 cfu/g和3.17×105 cfu/g的R31-gfp。由此得出，R31可以在西芹根表形成菌膜，并在根际长期稳定定殖。     

西芹黄萎病防治药剂筛选和毒力测定

针对西芹黄萎病病原菌开展室内防治药剂筛选和药剂毒力测定。按照药剂最大推荐剂量从14种供试药剂中初筛出8种有效药剂，以进口多菌灵、菌哥、新世生、瓜果类太宝、太医最佳，对菌丝生长的抑制率达100％。8种药剂对病原菌菌丝生长的EC50依次为进口多菌灵（0．0063mg／ml）〈太医（0．0073mg／ml）〈活根菌灭（0．0077mg／ml）〈枯萎灵（0．0079mg／ml）〈瓜果类太保（0．0092mg／ml）〈根腐宁（0．0103mg／ml）〈新世生（O．0192mg／ml）〈菌哥（O．0844mg／ml），进口多菌灵和活根菌灭对病原菌孢子萌发的EC50分别为1．50×10^-4mg／ml和1．55×10^-4mg／ml。