丹参对奶牛脂肪变性肝细胞NF-κB和CYP450表达的影响

为探讨丹参对脂肪变性奶牛肝细胞的作用机制,采用胶原酶两步灌流法分离培养奶牛肝细胞,不同浓度DL-乙硫氨酸处理,油红染色观察其脂滴数量,MTT法测定肝细胞的活性,生化法检测TG含量。用不同浓度的丹参处理变性肝细胞后,生化法检测ALT、AST、TG、SOD、MDA的含量或活性,ELISA法测定TNF-α的含量,Western blot法检测NF-κB和CYP450的蛋白表达水平。结果显示,筛选出2 mmol/L的DL-乙硫氨酸作用24 h作为体外造模的最佳条件。用丹参处理后,能降低ALT、AST、TG和MDA的活性或含量,抑制TNF-α的释放,增加SOD活性。随丹参浓度增加和处理时间的延长,CYP450的表达呈逐渐降低的趋势。24 h时,丹参对NF-κB的表达无明显影响;48 h时,随丹参浓度的增加,NF-κB的表达呈逐渐降低的趋势。这表明丹参对奶牛脂肪肝有一定的治疗作用,其作用机制与促进脂质代谢、抑制肿瘤细胞坏死因子、抗脂质过氧化及降低NF-κB和CYP450的表达密切相关。     

川楝素对妊娠小鼠子宫组织中CD4+/CD8+T细胞和F4/80+巨噬细胞的影响

为探讨CD4+、CD8+ T淋巴细胞和F4/80+巨噬细胞在流产发生机制中的意义,研究中药单体成分川楝素诱导小鼠流产的作用及机理,本试验给妊娠5 d小鼠连续3 d腹腔注射不同剂量的川楝素溶液,对照组以等量的蒸馏水代替,于妊娠9 d处死.在给药后发现随着注射川楝素剂量的增加,小鼠的流产率逐渐上升,CD4+、CD8+ T淋...     

保胎无忧散对小鼠诱导性流产的保胎作用

选择保胎无忧散预处理试验小鼠,观察保胎无忧散对米非司酮(RU486)诱导流产作用的抑制效果.结果显示,使用RU486在孕7d,颈部注射后,试验小鼠的流产率达到了100％；应用中药方剂保胎无忧散能有效对抗RU486诱导的小鼠流产,试验中动物模型的流产率从100％下降到40％；组织学观察发现,RU486诱导流产小鼠子宫内膜出现明显损伤,而在中药方剂组,试验小鼠子宫得到了有效的保护.     

小鼠子宫内膜细胞炎症模型的建立

用0.25％胰酶-EDTA消化法分离培养小鼠子宫内膜细胞,用细菌脂多糖(LPS)诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准.以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段的细胞,用RT-PCR的方法测定细胞中IFN-γmRNA的表达丰度.结果表明,100 ng/mL LPS是体外培养...     

"益母生化散"对胎衣不下奶牛胎盘激素含量的影响

随机选择1～4胎龄健康黑白花奶牛10头,设为健康对照组(A组);选择1～4胎龄产后健康黑白花奶牛17头,产后立即灌服"益母生化散"250 g,为中药预防组(B组);选择1～4胎龄产后胎衣不下奶牛10头,为胎衣不下组(C组);选择1～4胎龄产后胎衣不下奶牛26头,产犊后12 h灌服"益母生化散"500 g,设为中药治疗组(D组).采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测奶牛胎盘组织中孕酮、雌激素、前列腺素和血管紧张素的含量,探讨奶牛胎衣不下的发生机理及中药"益母生化散"的防治效果.结果表明,奶牛胎衣不下的发生与胎盘组织中孕酮、雌激素、前列腺素(PGE2)和血管紧张素Ⅱ含量变化关系密切,胎盘组织中孕酮含量的升高,雌激素、前列腺素和血管紧张素含量的降低是胎衣不下发生的重要机理之一."益母生化散"对奶牛胎衣不下有较好地防治效果,其机制可能与"益母生化散"具有调节胎盘组织的激素分泌等作用有关.     

不同中药对奶牛乳房炎病原菌抑菌效果的观察

本试验采用琼脂平板扩散法(打孔法),研究了黄芩等21种中药对从乳房炎奶牛乳汁中分离出的3种主要致病菌的体外抑菌情况。结果发现,大肠杆菌对黄芩高度敏感,对丹参、青翘属中度敏感;金黄色葡萄球菌对黄芩、青翘、丹参、地榆、红花、蒲公英高度敏感,对枳壳、忍冬藤、萹蓄、苦地丁、蟾酥、木通中度敏感;无乳链球对地榆、当归属高度敏感,对青翘、黄芩、蒲公英、丹参、苦地丁、红花、川芎、枳壳中度敏感。为防治奶牛乳房炎有效中药复方的筛选提供了理论依据。     

孕鼠暴露双酚A对仔鼠存活率、生殖激素及相关基因的影响

为了研究孕鼠在孕期暴露双酚A（bisphenol A,BPA）对仔鼠生殖激素及相关基因的影响,试验将40只昆明孕鼠随机分为A、B、C、D共4组,每组10只。其中A组为对照组,饲喂普通鼠粮;B、C、D组孕鼠整个妊娠期（妊娠1 d至分娩）分别按每只鼠每天50、500、2 500 mg/kg体重给予BPA,待孕鼠自然分娩,观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠性成熟（56日龄）剖杀仔鼠,摘取睾丸或卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化,ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮（T）、促卵泡素（FSH）及雌二醇（E₂）水平,免疫组织化学方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax、Bcl-2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测仔鼠睾丸StAR、CYP11a或卵巢AMH、Kitlg mRNA表达。结果显示,孕鼠暴露BPA极显著增加了仔鼠死亡率（P<0.01）,显著降低了仔鼠睾丸重（P<0.05）。ELISA检测结果表明,孕鼠暴露BPA极显著降低了仔鼠T（♂）及FSH（♀）含量（P<0.01）,极显著升高了仔鼠（♀） E₂水平（P<0.01）。HE染色结果显示,随BPA剂量增加,仔鼠睾丸组织损伤严重,间质细胞减少;卵巢组织结构随BPA剂量增大,空泡逐渐增多,黄体颗粒数量逐渐减少。免疫组化结果显示,孕鼠暴露BPA增加了仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达,减少了Bcl-2阳性蛋白表达,显著降低了雄性仔鼠StAR mRNA表达量（P<0.05）;B、D组雄性仔鼠CYP11a mRNA表达量极显著降低（P<0.01）,而C组CYP11a mRNA表达量极显著升高（P<0.01）;C、D组雌鼠Kitlg mRNA表达极显著降低（P<0.01）,AMH mRNA表达量显著升高（P<0.05）。本试验结果表明,孕鼠妊娠期暴露不同剂量BPA增加了仔鼠死亡率,扰乱了生殖激素平衡和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白及生殖基因表达。     

己烯雌酚对体外培养仓鼠生精细胞毒性作用的研究

为研究己烯雌酚(DES)对仓鼠生精细胞毒性作用机制,试验采用原代培养的仓鼠睾丸生精细胞,用10、30、90μmol/L DES处理,倒置显微镜观察生精细胞生长状况,MTT法测定处理后8 h生精细胞存活率,分光光度法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果贴壁培养的生精细胞用DES处理后,细胞活力显著降低,与正常对照组比较差异极显著(P0.01),随着DES剂量的增加,细胞中SOD、GSH-Px含量显著下降,MDA显著上升。说明DES对体外培养生殖细胞毒性作用与ROS密切相关,DES通过降低抗氧化酶水平,增加ROS含量,干扰生精细胞正常功能,表明氧化损伤可能是环境雌激素生殖毒性的作用机制之一。     

地锦草水煎液对昆明小鼠非特异性免疫功能的影响

地锦草为常用中药材,我国各地均有分布,资源十分丰富,也称地锦、血见愁、红茎草、铺地锦、奶汁草、斑鸠窝、地瓣草、血筋草.地锦草系大戟科植物,一年生匍匐小草本,有白色乳汁,生于田野、路旁.地锦草在医学临床上主要用于治疗菌痢腹泻,其针剂则用于治疗急性支气管炎和慢性支气管炎,其单方用于治疗急慢性肝炎效果显著.     

胶体金标记抗体的制备及Dot-IGSS检测IBDV方法的建立

胶体金标记是当前生物学研究中比较理想的标记技术.1984年,Moremans等首次建立了固相载体上的斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS),莫照兰等[1]以亲和素胶体金为标记物建立了检测鸡传染性法氏囊病毒的斑点免疫金银染色技术.