基于参与式教学的创意农业课程设计探索

创意农业课程是农学学科各专业开设的一门创新思维能力课程，目的是培养大学生运用创意的思维有效创新农业生产经营。改进课程教学方法能有助于提高教学质量，如参与式教学的运用能以学生为主体、教师为引导，大幅度提高学生学习主动性。创意农业课程引入了参与式教学法，重点把学生的学习态度和创新思维能力作为考核要素，建立了配套的考核方式，对培育乡村振兴人才起到了推动作用。     

四川地区一株传染性造血器官坏死病毒的分离鉴定及系统发育分析

2014年5月,四川省都江堰市某虹鳟养殖场暴发一种传染性疾病,幼鱼和鱼苗死亡率分别高达40％和80％.为探究此次疾病病因和流行规律,将病料进行解剖及细菌学检查、病理组织观察、人工感染实验、病毒分离、多重RT-PCR鉴定和系统发育分析.结果显示,病鱼主要临床症状表现为腹部膨大,体表发黑,肛门拖淡黄色黏液便,解剖见鳔壁、腹膜出血,胃胀气膨大和明显肠炎;细菌学检查为阴性;组织病理学上,头肾、肾脏和脾脏造血组织广泛性变性、坏死,肠黏膜下层嗜酸性颗粒细胞浸润与坏死,肝细胞变性、坏死形成局灶性的坏死灶,并在一些肝细胞胞浆内见嗜酸性包涵体.将病鱼的肝脏、脾组织研磨过滤灭菌后,腹腔注射20尾健康虹鳟,注射组均表现为急性死亡(累积死亡率=75％),并出现与自然发病鱼相同的症状.取病鱼组织匀浆滤菌液接种到鲤上皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprini,EPC),盲传3代出现典型的细胞病变效应(cytopathic effects,CPE).针对IHNV、IPNV与VHSV的多重RT-PCR检测显示自然发病鱼、人工感染病鱼和病变细胞均为IHNV阳性,扩增序列与IHNV核蛋白(nucleoprotein,N)基因同源性为99.9％.对分离株的糖蛋白基因“Mid-G”区域进行系统发育分析,结果显示该分离株与亚洲分离株聚为一支,属于JRt基因型.本研究首次报道我国西南地区养殖虹鳟中IHNV感染引起的疾病.     

西伯利亚鲟海豚链球菌的分离鉴定及毒力基因检测

2013年8-9月,四川雅安汉源湖养殖的西伯利亚鲟发生一种以体表溃疡、内脏出血和心外膜囊肿为特征的传染病.为明确其病因,本研究从自然发病鱼的肝、脾和肾进行了病原菌的分离、人工感染、分离菌的表型特征和分子生物学特征的检测.结果从患病鱼体内分离到一株G+链状球菌(Ab130920),人工感染实验证实了其病原性,生理生化特性与海豚链球菌(ATCC29178)基本一致;16S rDNA序列(GenBank登录号:KJ162337)与GenBank中S.iniae 16S rDNA序列同源性最高,在以16S rDNA序列及其GenBank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链球菌聚为一支;同时,在基于S.iniae lctO基因的特异性PCR检测中,从分离株基因组DNA扩增出预期大小的870 bp条带,进而鉴定分离菌Ab130920为S.iniae.在对cpsD、simA、sagA、pdi和scpI等5种S.iniae毒力基因的多重PCR检测中,分离菌均扩增出相应大小的特异性片段,表明其为一毒力较强的菌株,与人工感染实验的高致病性结果相佐证;药物敏感性检测发现其对阿莫西林、强力霉素、氟苯尼考等抗菌药物敏感,但对新生霉素、利福平、氧氟沙星耐药.     

南方鲇拟态弧菌的分离、鉴定及其感染的病理损伤

南方鲇的溃疡病是近年来发生的一种严重危害南方鲇的病原不清楚的传染病,2013年7月与9月从四川南方鲇养殖区自然感染发病的南方鲇体内分离到2株G-弧形,极生单鞭毛短杆菌(SCCF05与PYD)。其在TSA平板上28℃培养48h,形成表面光滑,边缘整齐,微隆起,乳白色圆形菌落,在TCBS平板上形成绿色菌落。根据分离菌株的形态学和生理生化特性初步判定其为弧菌(Vibrio sp)。16SrDNA与gyrB序列分析表明,2分离株16SrDNA序列(KJ001822、KF907127)与GenBank中V.cholerae 16SrDNA序列同源性最高;而gyrB序列(KC503054、KF998569)与V.mimicus gyrB序列同源性最高。在以分离菌16SrDNA序列及其GenBank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,2分离菌与V.cholerae和V.mimicus聚为一族;在以gyrB基因序及其GenBank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,2分离株与V.mimicus聚为一族。在基于弧菌系统发育标志性鉴别基因dnaJ的双重PCR检测中,2分离株基因组DNA中均特异性扩增出约为177bp条带,与预期V.mimicus扩增片段一致,进而鉴定2株分离菌为V.mimicus。2株V.mimicus对链霉素、罗红霉素、丁胺卡那、氟哌酸、氟苯尼考和氧氟沙星等抗菌药物敏感,对头孢曲松与强力霉素耐药。病理学观察发现,V.mimicus感染南方鲇对多组织器官都造成明显的病理损伤,尤其是肌肉、肝、脾、肾的损伤较为严重,表现为明显的出血、变性和坏死以及炎症细胞浸润等。     

鸡新城疫的检疫与防疫概述

鸡新城疫(ND)是一种以呼吸道、消化道和神经系统损伤为主要症状的急性、高度致死性传染病,又称亚洲鸡瘟、伪鸡瘟,给全球养禽业造成了巨大损失。本文分析了鸡新城疫的发病现状和流行特征,对鸡新城疫的检疫方法进行了综述,同时对新城疫的防疫提出个人见解,旨在为鸡新城疫的有效防控提供理论参考。     

四川省非洲猪瘟流行病学分析及综合防控

2018年11月宜宾市高县发生了四川省首例非洲猪瘟疫情,随后疫情在其他几个区县相继发生,且有继续扩散的风险,给四川省的生猪养殖带来了巨大的经济损失,严重阻碍了养猪业的健康发展。本文对四川省非洲猪瘟的发病情况、流行特点、病原特点、传播和诊断等进行了总结分析,提出符合本省疫情特点的针对性防控措施,以期为四川省非洲猪瘟的防控提供参考。     

一株似鲇高原鳅源蛙病毒的分离与鉴定

从四川乐山某养殖场自然发病的似鲇高原鳅(Triplophysa siluroides)体内分离到一株病毒FYL140220。病毒感染鲤上皮瘤细胞系(epithelima popuasum cuprini,EPC)后,细胞呈现圆缩、坏死、脱落、明显空斑的病变特征。将自然发病鱼组织过滤除菌液和细胞培养病毒液分别接种健康似鲇高原鳅,试验鱼出现与自然发病鱼相同的症状,死亡率分别为30%和40%,而对照组无异常。对经FYL140220感染出现典型细胞病变(CPE)的EPC细胞制备超薄切片进行电镜观察,发现病毒呈正六边形,对称20面体,对角线直径约(103±7)nm;提取细胞培养病毒液、自然发病鱼和人工感染发病鱼的内脏器官总DNA进行蛙病毒主要衣壳蛋白(maior capsid protein,MCP)基因保守区域的PCR扩增,均能扩增出预期大小约500 bp的特异性条带。MCP基因同源性与遗传进化分析表明,分离株FYL140220与蛙病毒属成员聚为一支,尤其与大鲵蛙病毒与沼泽绿蛙病毒同源性最高,分别达99.8%和99.6%。结合PCR检测、电镜观察和系统发育分析,确认分离病毒FYL140220为蛙病毒,这是首次报道蛙病毒可自然感染似鲇高原鳅并致死。     

人工养殖鲟鱼细菌性病原的研究现状

<正>我国对鲟鱼疾病的研究起步较晚，1972年苏培义等开展了野生长江鲟鱼的调查，开启了我国鲟鱼疾病的研究序幕，此后鲟鱼的疾病不断被发现和报道，以细菌性疾病危害最为严重。目前，对鲟鱼细菌性病害的研究大多集中于病原的分离鉴定、病理损伤、临床诊断和药物敏感性测定等方面，细菌性疾病的发病机理、生态防治、综合防控技术等方面的关注还不够。     

齐口裂腹鱼无乳链球菌的分离鉴定及其感染的病理损伤

2012–2013年四川齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)养殖场流行一种临床特征为突眼、体表出血和神经症状的传染病, 在肝、肾涂片检查中发现链状G⁺球菌。从自然发病齐口裂腹鱼分离到2株形态与涂片检查一致的G⁺球菌(DML120817, YZH130830), 其在脑心浸液培养基(BHI)平板上28℃培养48 h, 形成白色圆形、表面光滑、边缘整齐的针尖大小菌落。经人工感染实验证实分离菌株为该病的病原菌。根据分离菌株的形态学和生理生化检测结果初步判定其为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae); 16S rRNA基因序列分析表明, 2分离株 (GenBank登录号分别为KF773744和KF761304) 与GenBank中无乳链球菌(S. agalactiae)16S rDNA序列同源性达96.5%以上。在以分离菌16S rDNA序列 (GenBank登录号分别为KF773744和KF761304) 及其GenBank中同源性较高的链球菌16S rDNA序列构建的系统发育树上, 分离菌与无乳链球菌聚为一族; 同时在基于无乳链球菌cfb基因进行的特异性PCR检测中, 分离菌均为阳性, 进而鉴定2株分离菌为无乳链球菌。2株无乳链球菌对强力霉素、阿莫西林、先锋霉素V、氧氟沙星和左氧氟沙星等均敏感, 但在新霉素与丁胺卡拉霉素上存在差异。病理学观察发现, 无乳链球菌感染齐口裂腹鱼对多组织器官都造成明显的病理损伤, 尤其是肝、肾、脑的损伤较为严重, 表现为明显的变性、坏死以及炎症细胞浸润, 且细菌侵入肝、肾、脾以及神经元细胞内, 导致线粒体、内质网等细胞器损伤。