新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

【目的】探明新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌流行情况及耐药性,为该地区生乳中金黄色葡萄球菌的监测及保障生乳质量安全提供理论依据。【方法】试验随机从南北疆规模化奶牛场采集110份生乳样品。采用增菌培养、分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定及PCR法对奶样中金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并利用微量肉汤稀释法及PCR方法对金黄色葡萄球菌进行16种抗菌药物的耐药表型及耐药基因分析。【结果】从110份奶样中分离出18株金黄色葡萄球菌,分离株呈浅黄色、光滑凸起的圆形菌落,革兰氏染色镜检呈紫色、短链状排列的革兰氏阳性菌,生化试验结果符合金黄色葡萄球菌生化特点,经16S rDNA及nuc基因PCR扩增鉴定为金黄色葡萄球菌,分离率为16.36%(18/110)。药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离株对氨苄西林、青霉素及磺胺异噁唑具有较高的耐药性,耐药率分别为100%、83.33%和77.78%,而对万古霉素、复方新诺明、苯唑西林、头孢噻吩、头孢噻呋、利福昔明及环丙沙星7种抗菌药物高度敏感,敏感率分别为100%、100%、94.44%、94.44%、94.44%、94.44%和94.44%。其中有14株金黄色葡萄球菌为多重耐药菌,多重耐药率为77.78%。耐药基因检测结果显示,大环内酯类耐药基因ermB检出率最高,为50.00%,其次为β-内酰胺类耐药基因mecA,检出率为27.28%,磺胺类耐药基因Sul1的检出率为22.22%。【结论】新疆奶牛场生乳中分离的金黄色葡萄球菌的流行及耐药情况仍较严重,且存在多重耐药现象,因此,对生乳中金黄色葡萄球菌耐药性的监测有重要意义。     

牛源无乳链球菌耐药性与毒力基因的表达量差异分析

【目的】 研究无乳链球菌对抗菌药物的耐药性,分析无乳链球菌毒力基因与耐药基因的携带情况。【方法】 分别采用微量肉汤稀释法和普通PCR的方法,检测牛源无乳链球菌对16种抗菌药物的耐药性和相关耐药基因及毒力基因,并且采用荧光定量PCR技术对不同菌株的8种毒力基因的表达量差异进行分析。【结果】 （1）无乳链球菌对11种药物的敏感性达到了65%以上,其中敏感性最高的是氟苯尼考（92.4.%）和头孢噻呋（88.4%）,对氨苄西林、红霉素、克林霉素的耐药率均达到了50%以上,对磺胺异恶唑的耐药率也达到了45%以上。（2）无乳链球菌耐药基因gyrA、sul1、ermB、ermC的检出率分别为100%、 86.67%、 93.3%、 33.3%,而ermA、sul2、sul3及parC 4种耐药基因未检出。（3）无乳链球菌毒力基因pavA、cfb、fbsA、bibA、cspA、sip、iagA、hylB的检出率为100%,rib检出率为13.3%,bca的检出率为53.3%,cyl E检出率为73.3%;未检测到bac、lmb、scp B这三种毒力基因。（4）不同菌株之间毒力基因的表达量有显著性差异（P<0.05）。【结论】 无乳链球菌对红霉素和克林霉素的耐药率较高,无乳链球菌毒力因子是宿主感染疾病的重要因素。     

牛乳中硝基呋喃代谢物检测技术研究进展

本文对牛乳中硝基呋喃类抗生素及其代谢物的残留危害和检测方法进行综述。介绍了样品前处理和仪器测定方法,包括高效液相色谱、液相色谱质谱联用、液相色谱串联质谱和酶联免疫吸附分析。同时综述了我国现有的关于硝基呋喃代谢物的检测方法,比较了各种方法的工作原理、适用范围以及各自的特点。     

无血清条件下UC-MSCs和BMECs共培养对IGF-Ⅰ表达的影响

试验旨在探讨无血清条件下脐带间充质干细胞（UC-MSCs）和奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）共培养对类胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）表达的影响,将UC-MSCs和BMECs按1：2直接共培养,对比单纯培养的两种细胞,48 h时利用ELISA法检测各组上清IGF-Ⅰ浓度水平,再利用Transwell小室将两种细胞分离培养,实时荧光定量 PCR检测各组细胞IGF-ⅠR、IGF-Ⅰ mRNA的表达。结果显示,共培养中IGF-Ⅰ浓度显著高于UC-MSCs组（P < 0.05）,极显著高于BMECs组（P < 0.01）;UC-MSCs/BMECs、BMECs/UC-MSCs组IGF-Ⅰ mRNA表达值均极显著高于单纯培养组（P < 0.01）,BMECs/UC-MSCs组显著高于UC-MSCs/BMECs组（P < 0.05）;UC-MSCs/BMECs、BMECs/UC-MSCs组IGF-ⅠR mRNA表达值显著或极显著高于单纯培养组（P < 0.05;P < 0.01）,BMECs/UC-MSCs组较UC-MSCs/BMECs组差异显著（P < 0.05）。综上,体外无血清培养条件下,UC-MSCs和BMECs共培养可显著提高IGF-ⅠR及IGF-Ⅰ mRNA表达,IGF-Ⅰ浓度水平和IGF-ⅠR mRNA的表达具有一致性,IGF-Ⅰ主要存在于UC-MSCs中。     

不同浓度奶牛乳腺上皮细胞和奶牛脐带间充质干细胞共培养对细胞增殖作用的研究

研究在不同浓度下奶牛脐带间充质干细胞和奶牛乳腺上皮细胞共培养对共培养体系细胞增殖的影响。将P3代UC-MSCs与P3代BMECs按照浓度比例为1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶10、1∶50、1∶100、1∶1000、2∶1等不同比例随机混合培养,同时设立UCMSCs与BMECs单纯培养组为对照组,并分别于0h,24h,48h,72h,96h,120h和144h时观察各组细胞的形态变化,用MTT法检测细胞增殖。将UC-MSCs和BMECs按照不同浓度比混合共培养后,细胞生长状态良好,无抑制作用;MTT检测增殖发现各组OD值在72h时均达到最大,其中1∶2浓度组OD值最大,细胞增殖最快。UC-MSCs和BMECs混合共培养,两种细胞之间无抑制作用,生长状态良好,同时能够促进共培养体系的细胞增殖。     

无乳链球菌毒力基因与耐药性的相关性研究进展

乳房炎是奶牛养殖业中最常见的一种疾病，会造成奶牛乳腺发炎肿胀，使产奶量大幅下降。作为一种多因素性疾病，奶牛乳房炎发病原因复杂，饲料污染、病原菌感染以及环境因素均可以导致乳房炎的发生。无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）作为奶牛乳房炎的主要致病菌，常会造成乳腺组织的局部炎症，随着无乳链球菌分离率的增加以及抗菌药物的滥用，其对抗菌药物的耐药性逐步攀升，给临床治疗带来了一定的困难。此外，无乳链球菌能够定植于宿主体内，破坏宿主的免疫系统，而其自身毒力因子会引起宿主机体疾病的产生。随着相关研究的深入，发现毒力与耐药性本身互为关联，耐药性的增强以不同的方式影响毒力，表明了耐药性与毒力因子之间存在着一定的相关性。笔者主要回顾了国内外链球菌以及其他细菌毒力基因与耐药性之间相关性的研究进展，从无乳链球菌毒力因子及耐药性等多种角度入手，分析了无乳链球菌的毒力机制以及毒力基因，并对近5年国内不同地区无乳链球菌耐药性进行统计，从细菌种类、环境和相关机制对链球菌的毒力和耐药性之间的关系展开综述，以期为无乳链球菌所引起的临床症状筛选出合理的抗菌药物并对毒力基因与耐药性的相关性研究提供理论参考。     

饲喂恰麻古对奶牛生产性能、体细胞数及血清抗氧化水平的影响

为提高奶牛生产性能、降低乳中的体细胞数、控制乳房炎发病率,选择体况接近、胎次相同、产奶量和产犊日期接近的荷斯坦母牛50头,随机分成对照组和试验组,试验组在对照组日粮基础上每天饲喂恰麻古300 g。预试期10 d,试验期90 d,每3 d测日采食量,每5 d测日产奶量,每30 d静脉采血待测。结果:饲喂恰麻古可以显著提高泌乳牛的产奶量、采食量(P0.05);可以提高血清中总抗氧化能力(P0.05)和超氧化物歧化酶的活力(P0.05),显著降低血清中丙二醛含量(P0.05)。表明恰麻古可促进饲料中营养物质的吸收和代谢,提高抗氧化能力,保障奶牛健康。     

新疆乌昌地区与喀什地区规模化牛场嗜冷菌分离鉴定及污染源分析

试验旨在了解南北疆地区规模化牛场嗜冷菌污染情况,为制定有效的防控措施提供科学依据。在气温（TM）和相对湿度（HR）相似情况下,采集新疆乌昌地区与喀什地区的6个牛场8个采集点样品共计396份,采用GB 4789.2-2016《食品国家安全标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》进行嗜冷菌分离与培养,并进行BLAST序列鉴定。鉴定结果显示,从乌昌地区与喀什地区共分离嗜冷菌276株,通过%ID鉴定确定优势嗜冷菌15株,分别为苏云金芽孢杆菌、假单孢菌属、蜡状芽孢杆菌、芽孢杆菌属、不动杆菌属、环状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜冷杆菌属、血链球菌、巨大芽孢杆菌、节杆菌属、荧光假单胞菌、链球菌属、类芽孢杆菌、微小杆菌属。比较两地区间的差异,结果表明,乌昌地区与喀什地区在卧床土、饲料、空气中所分离的菌种类型总量最多;喀什地区除管道口环境外其余7个环境点嗜冷菌数量均低于乌昌地区,其中喀什地区卧床土、奶罐口和饲料中的菌量极显著或显著低于乌昌地区（P<0.01;P<0.05）,而管道口菌量极显著高于喀什地区（P<0.01）。综上所述,在温度、湿度、光照条件相似情况下,管理水平对南北疆地区牛场嗜冷菌污染有很大影响,应对不同地区分别建立有针对性的防控措施。本研究为探究南北疆地区生鲜乳污染溯源提供了理论依据。     

多生态复合益生素对仔猪生长及其育肥性能影响的研究

试验旨在探讨相同日粮条件下添加多生态复合益生素对仔猪生长及其育肥性能的影响。选取体质、年龄、健康程度相似的断奶仔猪杜洛克、约克夏和长白共1 1 0头和1 36头生长育肥猪,随机分为试验组和对照组;两组基础日粮一致,仔猪的试验组在基础日粮中添加0.35%多生态复合益生素,育肥试验组添加0.32%多生态复合益生素。断奶仔猪试验结果表明:试验组与对照组在试验中期体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重增长了52.1 7%;末期时体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重提高了20.93%。育肥猪试验结果表明:试验组与对照组在试验中期时体重、体长差异极显著(P<0.01);末期时体重、体长差异极显著(P<0.01),平均日增重提高了1 4.7%。表明,多生态复合益生素能减少仔猪死亡率、提高生长速度,并且提高育肥猪日增重、降低料重比、较大幅度减少异臭和苍蝇数量。     

生鲜乳中微生物检测技术研究进展

我国现阶段乳品科技发展迅速,随之衍生一些乳品安全问题。目前,微生物引发的乳品污染问题仍然是乳品质量安全的重点和难点,生鲜乳质量安全影响着终端奶业发展,相关机构和部门都在探寻简单、便捷、廉价、高效的乳品微生物检测方法。本文就生鲜乳中微生物检测技术现状和进展进行简要综述,以供相关行业借鉴参考。