高压静电场对小鼠骨组织钙沉积的影响

为了探讨正负高压静电场对小鼠骨骼组织的影响,将21只健康C57BL/6小鼠随机分为正高压静电场组A、负高压静电场组B以及空白对照组C.A、B组分别置于电场强度为1.2 kV/cm的正、负高压静电场中,于7、14、21 d取小鼠两侧股骨.结果表明,正、负高压静电场组与对照组相比,骨小梁的密集程度显著升高(P<0.01)、骨钙浓度及血钙浓度上升(P<0.01).一定强度的高压静电场增加了骨小梁密集程度,引起骨钙及血钙浓度上升,对骨小梁的形成和骨组织钙化具有促进作用.     

FNDC5在小鼠老龄化过程脂肪组织中的表达变化

本研究旨在探讨Ⅲ型纤连蛋白域包含蛋白5（type Ⅲ fibronectin domain contains protein 5,FNDC5）在小鼠老龄化过程中脂肪组织中的表达变化,以小鼠老龄化过程中不同发育阶段的健康小鼠为研究对象,通过HE染色、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR和Western blotting等技术研究小鼠老龄化过程中脂肪组织FNDC5的表达以及定位。结果发现,FNDC5在小鼠老龄化过程中各个发育时期的脂肪中均有不同程度的表达并呈现明显的差异性。HE染色发现,随着年龄的增长,脂肪细胞的大小呈现先逐渐增大后萎缩的趋势。免疫组织化学染色发现,FNDC5在幼年小鼠的脂肪组织中表达水平最高,在性成熟的脂肪组织中表达水平次之,老年的脂肪组织中的表达水平低于性成熟时期,体成熟的脂肪组织中表达水平最低。实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果也与免疫组织化学染色趋势相符。以上结果表明,FNDC5基因可能在脂肪组织中发挥一定的作用,为研究脂肪代谢以及肥胖相关的疾病提供新思路。     

优化水稻种植技术提高水稻种植效益

水稻种植对于地方经济建设具有至关重要的作用,为有效增强水稻种植效益,必须对水稻种植技术进行优化。该文浅析了水稻叶龄栽培技术以及水稻种植"三控技术"的优化,以期为水稻种植提供借鉴。     

小鼠不同生长阶段骨骼肌组织中Myf5的表达

肌源性因子5(Myf5)是转录因子基本螺旋-环-螺旋家族的一员,它作为肌原性因子,对肌细胞的分化具有重要作用,在肌肉分化或肌细胞生成中也具有关键作用。试验分别选取幼年、性成熟、体成熟和老年期4个发育阶段的健康小鼠,采用HE染色、免疫组织化学、荧光定量PCR等方法主要研究Myf5在小鼠不同生长时期骨骼肌中的表达情况。结果显示,小鼠骨骼肌细胞核及肌纤维的生长在不同发育时期明显不同,其中,幼年小鼠的细胞核多位于细胞中央且排列较密,肌纤维的横切面近似圆形,性成熟、体成熟、老年的小鼠发育指标依次降低;Myf5主要在细胞核中表达,幼年期表达量高,老年期表达量最低;Myf5 m RNA在小鼠的不同发育阶段均有表达,但在不同阶段的表达量存在差异,其中,老年阶段的表达量最高,幼年、性成熟、体成熟阶段小鼠骨骼肌中Myf5表达水平极显著低于老年小鼠。Myf5的表达量与小鼠的生长发育阶段具有一定的相关性。     

高压静电场对小鼠血液生化指标的影响

目的通过高压静电场作用小鼠后,分析高压静电场对小鼠血液主要生化指标的影响。方法试验选用21只小鼠,随机分为正高压(120 kV/m)静电场组(A组,n=9)、相同强度的负高压(120 kV/m)静电场组(B组,n=9)以及空白对照组(C组,n=3),经正电组与负电组分别作用7 d,14 d,21 d后,检测小鼠血液生化指标的变化。结果在高压静电场的作用下,小鼠血清中的血糖、淀粉酶和白蛋白含量产生显著变化。结论长时间暴露在高压静电场下可能会对小鼠胰脏和肾脏造成损害,从而引起血液中相关活性成分的变化,同时负高压静电场的损害可能高于正电场。     

江西水稻种植田间管理与病虫害防治措施

为了提高水稻的产量与品质,推动农业快速发展,加强水稻种植田间管理与病虫害防治非常重要。近年来,国家对农业重视度逐渐升高,高产量、高品质的水稻一直是农业部门的研究重点。该文对高产水稻田间管理与病虫害防治技术进行探讨,从水稻的日照长短、气候、温湿度、选种、施肥和有效的防治虫害等方面展开探讨。     

Myf5在不同生长阶段小鼠心肌中的定位与表达

Myf5是生肌调节因子MRFs家族的重要成员,在肌细胞的增殖和发育过程中发挥着重要的调控作用。通过对心肌组织进行HE染色和免疫组化试验,观察心肌纤维细胞核的大小和数量、肌纤维体积和肌纤维之间的间隙变化,了解心肌组织不同发育阶段的显微结构,对比各组的阳性着色部位和着色程度的变化,从而对Myf5因子在不同发育阶段小鼠心肌组织的表达进行初步定性、定量和定位分析。并通过实时荧光定量PCR技术对小鼠的不同发育阶段中的心肌组织的Myf5基因表达做出准确的定量分析。结果表明,在小鼠心肌组织发育的不同阶段,Myf5均显示阳性,幼年鼠表达量最高;Myf5 m RNA表达量幼年鼠最高,性成熟鼠最低,呈现先降低后缓慢上升的趋势,并且幼年阶段与性成熟、体成熟阶段呈现极显著差异,与老年阶段无明显差异。研究表明,Myf5表达与小鼠心肌组织发育具有相关性,可进一步揭示Myf5在心脏发育的病理状况差异性和调控机制。     

Myogenin在不同发育阶段小鼠骨骼肌中的表达差异

Myogenin是骨骼肌生长发育过程中的重要调控因子之一。采用H.E.染色法观察小鼠骨骼肌组织不同发育阶段的形态特征,通过免疫组织化学法观察在不同发育阶段因子是否表达,并通过实时荧光定量PCR技术对Myogenin在不同发育时期的表达量进行分析,旨在研究不同发育阶段小鼠骨骼肌中Myogenin的表达差异。结果表明,Myogenin在不同发育阶段小鼠骨骼肌的表达位置均为细胞质,且在4个阶段的表达量间存在显著差异,幼年时期表达量最高。     

表达PRRSV GP3蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株的构建

构建表达猪PRRSV GP3蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。将去信号肽序列的PRRSV ORF3基因插入到表达载体pYA3341(Asd+)中,构建重组质粒pYA3341-ORF3。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(Asd-、Cya-、Crp-),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-ORF3)。体外鉴定重组菌表达的GP3蛋白、重组菌特性并进行小鼠免疫试验。酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳及Western blot检测有GP3特异性蛋白条带,小鼠免疫后可检测到GP3蛋白抗体。成功构建能稳定表达PRRSV GP3蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株。     

miR-140-5p对前脂肪细胞3T3-L1成脂分化的机制研究

【目的】研究miR-140-5p在前脂肪细胞（3T3-L1）成脂分化过程中的功能及其作用机制。【方法】待3T3-L1细胞汇合度达100%时诱导其成脂分化，收集分化第―1（诱导分化前1 d）、0、1、2、3、5、7天的细胞，用实时荧光定量PCR检测miR-140-5p相对表达量；将miR-140-5p mimics、NC转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化，油红O染色观察脂滴形成情况，实时荧光定量PCR检测成脂标志基因CAAT增强子结合蛋白β（C/EBPβ）、CAAT增强子结合蛋白δ（C/EBPδ）与过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）相对表达量；利用miRandn和TargetScan在线网站预测miR-140-5p的靶基因；通过对比序列差异分析P300/CBP相关因子（PCAF）的3'-UTR序列中与miR-140-5p的结合位点序列在小鼠、人等不同物种间的序列保守性。将miR-140-5p mimics、inhibitor、NC转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化，实时荧光定量PCR检测miR-140-5p、PCAF相对表达量，Western blotting检测PCAF蛋白水平；将PEGFP-N1-PCAF、PEGFP-N1转染3T3-L1细胞，油红O染色观察脂滴形成情况，实时荧光定量PCR检测PCAF、C/EBPδ、PPARγ基因相对表达量，Western blotting检测C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ蛋白表达水平。将3条PCAF siRNA（siRNA1、siRNA2、siRNA3）、siRNA NC转染3T3-L1细胞，Western blotting法检测PCAF蛋白水平，筛选最佳PCAF siRNA。将最佳PCAF siRNA和siRNA NC转染3T3-L1细胞，油红O染色观察脂滴形成情况，实时荧光定量PCR检测PCAF、C/EBPβ、C/EBPδ与PPARγ基因相对表达量，Western blotting检测C/EBPβ、PPARγ蛋白表达水平。分别将miR-140-5p mimics、NC与PGL0-PCAF 3'-UTR载体和PGLO空载体共转染293T细胞，用双荧光素酶报告试验检测miR-140-5p与PCAF的靶向关系。【结果】在诱导3T3-L1细胞成脂分化过程中，与诱导分化前1 d相比，在细胞成脂分化第1、2天时miR-140-5p相对表达量极显著升高（P＜0.01），在分化第3天时显著升高（P＜0.05）。与NC组相比，miR-140-5p mimics组脂滴数量明显增加，miR-140-5p mimics组成脂标志基因C/EBPδ与PPARγ相对表达量均极显著升高（P＜0.01）。靶基因预测结果表明，miR-140-5p与PCAF存在预期结合位点；保守性分析结果表明，靶基因PCAF结合位点序列在不同物种间具有高度保守性。与NC组相比，mimics组miR-140-5p和PCAF相对表达量均极显著升高（P＜0.01），inhibitor组miR-140-5p极显著降低（P＜0.01）、PCAF显著降低（P＜0.05），PCAF蛋白表达量显著升高（P＜0.05）。与PEGFP-N1组相比，PEGFP-N1-PCAF组脂滴数量增多，PCAF、PPARγ基因相对表达量和C/EBPβ、C/EBPδ蛋白水平极显著升高（P＜0.01），PPARγ蛋白水平显著升高（P＜0.05）。PCAF siRNA1、siRNA2与siRNA3均极显著抑制PCAF蛋白的表达（P＜0.01），siRNA3的效果最显著，因此选择siRNA3进行后续试验。与NC组相比，PCAF siRNA3组3T3-L1细胞中脂滴数量较少，PCAF、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ基因相对表达量和C/EBPβ蛋白水平均极显著下降（P＜0.01）。双荧光素酶报告试验结果显示，miR-140-5p与PCAF基因之间无靶标关系。【结论】内源性miR-140-5p在3T3-L1细胞分化过程中表达升高，miR-140-5p可能通过间接上调PCAF基因表达促进3T3-L1细胞成脂分化。