短尾派线粒体基因组特征及基因差异位点分析

分析了短尾派14个物种线粒体基因组全序列,初步揭示了短尾派线粒体基因组的基本特征。短尾派线粒体基因组的基因排列与泛甲壳动物线粒体基因组相比,发生了大规模的基因重排;然而,trnH基因的易位是短尾派14个物种所共有的,从而可以视作短尾派线粒体基因组的一个共同衍征。绒螯蟹属和青蟹属所有13个线粒体蛋白质编码基因的Ka/Ks比值均远远低于1,显示出很强的纯化(负)选择。从线粒体基因组13个蛋白质编码基因和2个核糖体RNA基因的差异位点分析可以看出,在短尾派和青蟹属群体遗传学的研究中,nad5、nad4和nad2基因可以作为coxl基因辅助的分子标记;而在绒螯蟹属群体遗传学的研究中,nad5和nad4基因可以作为coxl基因辅助的分子标记。     

养殖青蛤体内6种重金属在5种组织中分布差异及安全评估

利用原子吸收法对海州湾养殖池塘内成体青蛤体5种组织(斧足、外套膜、闭壳肌、鳃和肝胰腺)中的6种重金属(Cd、Cr、Pb、Ni、Cu和Zn)含量进行了测定,并与相关的标准进行比较,作出安全评估.试验结果表明,斧足和肝胰腺是青蛤重金属选择性富集的主要器官,肝胰腺中Ni、Zn、Cu、Cr的相对含量最高,分别为11.756、110.970、16.931 μg/g和11.772μg/g,与其余组织均差异显著(P＜0.05);而Cd、Cr、Ni和Cu在斧足中的含量最低.青蛤对重金属选择性积累最多的重金属为Zn,5种组织内高达77.856～110.970μg/g,其次为Cu,含量为0.100～16.931μg/g,而Cd的含量最低(0.058～0.229μg/g).用单因子指数法对海州湾养殖青蛤成体进行了污染状况评价,发现Ni为青蛤体内主要的重金属污染物,污染指数为1.55～8.91,其他重金属污染程度较轻或均未超标.     

6种帘蛤科贝类18SrRNA基因全序列比较分析

对文蛤（Meretrix meretrix）、青蛤（Cyclina sinensis）、江户布目蛤（Protothaca jedoensis）、薄片镜蛤（Dosinia corrugata）、紫石房蛤（Saxidomus purpuraus）和菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）6种帘蛤科（Veneridae）贝类的18S rRNA基因序列进行了PCR扩增并测序,以期获得这一序列的基本特征,评估其种间变异程度,探讨这一序列在种类鉴定和分子系统发育等研究中的应用价值。测序结果表明,文蛤、青蛤、江户布目蛤、薄片镜蛤、紫石房蛤和菲律宾蛤仔18S rRNA基因序列全长分别为1900bp、1838bp、1831bp、1831bp、1829bp和1833bp。序列中A、T、C和G碱基的平均含量分别为24.0%、24.0%、24.2%和27.8%。用MEGA软件对6种帘蛤18S rRNA基因全序列进行了分析,对位排列后的总长度1 906 bp,其中变异位点210个,简约信息位点28个,si/sv=1.4（46/32）。从GenBank下载了7种帘蛤科贝类18S rDNA全序列,与本研究实测的6种帘蛤一起用MegAlign软件对其18S rDNA序列进行了比对,物种间序列相似百分比为88.7%-99.7%。文蛤与其他12物种间序列差异较大,序列差异百分比均超过了10%,其他各物种间序列差异百分比不超过3%。以异韧带亚纲（Anomalodesmata）笋螂目（Pholadomyoida）的Lyonsia floridana和Cardiomya costellata为外群,采用相邻连接法（NJ）和最大简约法（MP）构建了帘蛤科贝类的系统发育树,其拓扑结构显示雪蛤亚科（Chioninae）、帘蛤亚科（Venerinae）和镜蛤亚科（Dosiniinae）的种类首先聚在一起,形成一个聚类簇;缀锦蛤亚科（Tapetinae）、卵蛤亚科（Pitarinae）、仙女蛤亚科（Callistinae）、青蛤亚科（Cyclininae）和文蛤亚科（Meretricinae）的种类先后分别单独聚成一枝;最后所有帘蛤科物种聚为一枝,与外群相区别,说明18S rDNA序列适合作为帘蛤科系统发育研究的分子标记。     

帘蛤科四种蛤的同工酶研究

采用不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳研究了文蛤、青蛤、菲律宾蛤仔和硬壳蛤4种组织(肝胰脏、鳃、后闭壳肌、外套膜)的EST和MDH同工酶,结果表明,不同蛤的同工酶谱有明显的差异,同种蛤不同组织间的EST和MDH同工酶有一定的组织特异性。EST和MDH位点丰富,可用于不同物种的鉴定,肝和鳃酶活性较高,是进行同工酶分析的理想材料。     

草鱼乙酰辅酶A羧化酶β基因全长cDNA分子克隆与表达分析

本试验采用反转录PCR(RT-PCR)和c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得草鱼乙酰辅酶A羧化酶β(ACC2)基因全长c DNA,并采用实时荧光定量PCR技术研究ACC2基因在肝胰脏、脾脏、大脑、前肠、中肠、后肠、肾脏、肌肉、心脏和肠系膜脂肪等组织中的表达,同时,还对饲喂不同脂肪源饲料12周后草鱼肝胰脏和肌肉中以及饥饿再次投喂后3、6、12和24 h肝胰脏中ACC2 mRNA的表达变化进行了研究。结果显示:草鱼ACC2基因c DNA全长7 533 bp,含1个7 149 bp的开放阅读框,编码2 382个氨基酸,ACC2蛋白计算分子质量为268.34 ku,等电点为6.13。草鱼ACC2基因存在可变剪接,形成另外1个同工型(isoforms),比分子质量为268.34 ku的ACC2蛋白少8个氨基酸。ACC2基因在所有检测组织中均有表达,ACC2 mRNA的相对表达量在肌肉中最高,为29.13,在肝胰脏中最低,仅为1.90。肌肉中ACC2 mRNA的相对表达量与大脑、前肠和心脏差异不显著(P0.05),但显著高于其他组织(P0.05)。投喂不同脂肪源饲料对草鱼肝胰脏及肌肉中ACC2 mRNA相对表达量无显著影响(P0.05);饥饿再投喂后草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA相对表达量在12 h达到高峰值,为6.17,之后明显下降,24 h时仅为2.84。本试验成功克隆了草鱼ACC2基因全长c DNA,其主要的功能位点ATP结合位点、生物素结合位点与其他脊椎动物相比基本保守。草鱼ACC2基因主要在肌肉等脂肪分解活跃的组织中表达,投喂不同脂肪源饲料对草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量无显著影响;饥饿再投喂后,肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量在投喂12 h后最高。     

日粮中血粉替代鱼粉对草鱼生长和肌肉氨基酸组成的影响

试验旨在研究血粉替代部分鱼粉对草鱼生长及肌肉营养成分的影响。以含鱼粉12%日粮为对照组,以血粉分别替代对照组饲料中25%、50%和75%的鱼粉,配制3种试验饲料,投喂平均体质量194.0 g的草鱼64 d。结果表明,各试验组草鱼摄食量下降,增重率显著低于对照组(P<0.05),但25%血粉替代组草鱼饲料系数、肝体比、脏体比、肌肉粗脂肪的含量与对照组无显著性差异(P>0.05),而50%和75%血粉替代组的饲料系数、肌肉粗脂肪明显升高;与对照组相比较,各血粉替代组的粗蛋白含量、粗灰分含量、必需氨基酸总量和鲜味氨基酸总量均无显著性差异(P>0.05)。综合分析表明,血粉代替草鱼日粮中鱼粉的量为25%时,可以获得较好的效果。     

脱毒蓖麻饼代替部分豆饼养殖鲤鱼研究

蓖麻饼是蓖麻籽榨油后的副产品,含粗蛋白质32～35%。我国年产量约20万吨(1990),内蒙古地区是主产地,年产约7万吨,仅决于葵花饼。由于蓖麻饼含有毒性成分(毒蛋白、蓖麻碱、变应原等),直接饲用易导致动物中毒,因此蓖麻饼在饲用前需进行脱毒。近年来,人们广泛开展了蓖麻饼脱毒方法的研究,其中热喷脱毒法因脱毒效果好,易于工厂化生产而得到推广,热喷脱毒饼在畜禽日粮中的应用研究也取得了良好效果。为此,我们采用热喷脱毒蓖麻饼进行了代替部分豆饼饲喂鲤鱼的试验,探讨蓖麻饼饲喂鱼类的可行性。     

脱毒蓖麻饼在鲤鱼日粮中的应用研究

蓖麻饼(Castor bean meal),含有35%左右的粗蛋白和丰富的氨基酸.但是蓖麻饼中含有毒蛋白、蓖麻碱和变应原等对家畜有害的物质,从而影响了其饲用价值.目前,蓖麻饼的脱毒技术已经解决,但脱毒后的蓖麻饼在饲料中的用量受残毒和过高的粗纤维限制.脱毒蓖麻饼在陆生动物日粮中的添加量是:羊10%(Purushothan、N P,1986),鸡10%(Okorie,A.u等,1987),猪10%(蒋万春等,1989).而在鱼饲料中的使用还未见报道.     

池蝶蚌与三角帆蚌及其杂种F1的同工酶鉴别

通过对外来种池蝶蚌(C)、三角帆蚌(S)及其正反杂种F1的肝脏同工酶进行垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了肝脏的SOD和EST同工酶谱带。结果表明,这两种蚌及其正反杂种F1同工酶的表达既呈现出一些相似的特征,又有明显差异。这四种蚌中分别有2~5个SOD位点,其中SOD-1为一强带且仅见于F1SC中,SOD-2在F1SC中为强带,但在F1CS中较弱,而其双亲中则无该带;SOD-3为一强带均保守的见于四种蚌中,SOD-4为一强带但仅在杂种F1SC中无表达,SOD-5为一强带但仅在池蝶蚌中未检到;在两亲本与其杂种F1中分别检测到4~6个EST同工酶位点,其中EST-4仅见于杂种F1SC中,EST-5在杂种F1CS中无表达,其余均有不同强弱的表达。     

枝角类适种探索和休眠卵的利用

实验表明多刺裸腹蚤是最易培养的淡水枝角类。适宜条件下接种后６ｄ可达５０００个／Ｌ的生一,人为改变饵 料及水温条件可获得大量休眠卵。休眠卵无休眠期,适宜条件下可卵化。孵化时数与水温的为Ｈ＝４７４．３２５９－２９．４５１５Ｔ＋０．４７８３Ｔ＾２。干燥低温保存休眠卵效果较好。１年后的孵化率可达６０％。