饲料受黄曲霉毒素污染的危害与防控

正饲料受霉菌污染较普遍,霉菌污染后饲料产生异味、结块、色泽异常、质地发生变化。营养价值和适口性下降,蛋白质溶解度降低,部分维生素遭破坏。霉菌产生的毒素可引发畜禽中毒。霉菌产生的毒素种类甚多,本文主要选择危害较普遍的黄曲霉毒素予以介绍。1黄曲霉毒素的危害黄曲霉毒素及其衍生物多达20余种,其中黄曲霉毒素B1(AFB1)数量最多。不同品种、年龄、性别和营养状况的畜禽对黄曲霉毒素的敏感性表现不同,其中低龄、营养不     

西瓜花叶病毒抗血清制备及其应用

 西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus, WMV)是危害葫芦科作物的重要病毒。制备特异性强、效价高的抗血清对快速准确检测和鉴定WMV具有重要意义。本研究将WMV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV获得pEHISTEV-WMV-CP。将pEHISTEV-WMV-CP转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,成功表达出分子量约为36 kDa的蛋白,与预期WMV CP大小一致。切胶回收WMV CP,与等体积弗氏不完全佐剂充分乳化后免疫健康新西兰大白兔。Western blotting结果表明,制备的抗血清与WMV CP有反应,与同属的番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV)和烟草花叶病毒属的黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)均无反应。酶联免疫吸附测定(PTA-ELISA)结果表明,本研究制备的WMV抗血清效价为1∶8 192,并且能够检测稀释512倍的病毒汁液。利用该抗血清对田间采集的10个RT-PCR检测为阳性的样品进行检测,全部呈现阳性。本研究利用大肠杆菌表达的CP制备的WMV抗血清具有较高的特异性和灵敏度。研究结果为WMV的快速检测和鉴定奠定了基础。     

一种基于RPA的番茄褪绿病毒检测方法

番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)引起番茄褪绿病毒病,给番茄生产造成严重危害。开发快速准确的检测方法对该病害的防控具有重要意义。利用番茄褪绿病毒外壳蛋白(CP)基因序列,设计特异性引物,建立了ToCV的重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)检测方法,同时分析了该方法的灵敏度和特异性。结果表明,建立的ToCV-RPA方法在38℃恒温下40 min可从ToCV阳性的番茄样品中扩增出246 bp的特异性条带。扩增时间短,对设备要求低,且与番茄其他病毒无交叉反应,特异性好,灵敏度可达到PCR方法的10倍,适用于ToCV的快速检测。     

ToCV和TYLCV复合侵染番茄后部分病毒基因序列分析及实时荧光定量PCR分析

番茄褪绿病毒病(ToCV)和番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)存在复合侵染的现象,其发病率逐年递增,成为一种新的威胁番茄产业的病毒病害。为了研究复合侵染样品中2种病毒的互作和基因变异情况,对天津番茄产区发生的TYLCV全基因组和ToCV的CP基因和HSP基因进行了克隆和序列分析。结果表明,与单独侵染样品进行比对,TYLCV的基因序列在复合侵染的样品中共有6处碱基发生了变异,分别为73位A→C、92位A→G、347位C→T、1 209位C→T、1 618位A→G、2 107位A→T,除73位和92位的变异未在编码区,其余的变异碱基均在ORF框内,其中1 209位为同义突变,其他均发生了错义突变。ToCV的CP基因有1处同义突变,ToCV的HSP基因共有4处碱基变异,其中826位由T→C和1 166位由G→A均为同义突变,1 395位和1 630位均由A→G,为错义突变。利用实时荧光定量PCR技术对单独侵染和复合侵染的番茄样品中TYLCV和ToCV病毒积累量进行分析。结果表明,在田间单独侵染和复合侵染的样品中, TYLCV的拷贝数差异不显著,ToCV的拷贝数在单独侵染和复合侵染的样品中差异也不显著。在复合侵染的样品中,TYLCV的拷贝数约为ToCV的262～436倍。     

近200年来新疆安迪尔地区红柳沙包稳定氧同位素特征与气候变化

干旱区红柳沙包是一种地质计年材料,并且是记录古气候环境信息的有效载体。文中在通过多种定年方法综合确定研究区红柳沙包沉积纹层年代序列后,实验分析得出红柳沙包沉积纹层中的δ~(18)O含量,使用SPSS软件对δ~(18)O含量与气候要素进行相关性分析和逐步回归分析,并重建安迪尔地区近200年来气候变化序列。结果表明:对δ~(18)O变化影响最明显的是2月份日照时数和11月份平均气温;1792年以来,安迪尔气候总体上由冷干向暖湿方向发展,其中1792～1828年和1850～1917年为冷干期,1829～1849年和1918～2010年为暖湿期。     

卵黄抗体五种提取工艺比较及初步应用

为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli)毒素STxB蛋白(rSTxB),与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用改良的聚乙二醇沉淀法提取高免卵黄抗体,采用SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,通过Western blot检测卵黄抗体和血清抗体效价。结果表明,辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法提取效率分别为96.00、81.99、155.50、65.34、46.00 mg/mL,其中聚乙二醇沉淀法的提取纯度最高。重组STxB蛋白分子量大小约25 kDa,血清中抗体效价最高达到64 000倍,卵黄抗体最高稀释倍数为16 000倍。综合评估,聚乙二醇的提取法相对较优,且提取的卵黄抗体具有良好的免疫活性。     

北京市2015年养殖鱼类精准用药监测情况分析

为了更加准确地掌握病原菌耐药性变化规律,合理指导养殖生产精准用药,减少抗菌药物滥用,避免病原菌产生耐药性,同时提高治疗效果,减少生产成本,确保水产品质量安全,北京市水产技术推广站2015年通过非定点和定点两种方式对北京市养殖鱼类开展了精准用药监测工作。全年非定点监测40余个渔场,对55个样品进行了分析;分离病原菌以嗜水气单胞菌和温和气单胞菌为主;采用K-B法检测的病原菌药物敏感性显示:病原菌对氟喹诺酮类药物(奥复星、左氧氟沙星、诺氟沙星和恩诺沙星)的敏感率较高,普遍在90.74%以上;酰胺醇类(氟苯尼考)次之,为85.19%;四环素类(四环素、强力霉素)分别为75.93%和72.22%;两种磺胺类药物(磺胺异恶唑和甲氧苄啶)较低,分别为14.81%和24.07%。全年定点监测冷水鱼(虹鳟)和观赏鱼(金鱼)各2个渔场,分离60株气单胞菌;监测结果显示,北京市虹鳟鱼源和金鱼源的气单胞菌对磺胺类药物耐药最为严重,耐药率均在90%以上,耐药浓度在512μmg/mL以上,其次是氟苯尼考和甲砜霉素,耐药率约为30%,而乳酸诺氟沙星、烟酸诺氟沙星和盐酸多西环素,耐药率分别为3.3%、1.7%和1.7%。     

北京市2015年养殖鱼类发病情况分析

2015年北京市水产技术推广站组织开展了养殖鱼类病害监测工作。在全市13个区县共设置监测点110个,监测总面积755 hm~2,占全市水产养殖总面积的20.6%。监测品种12种,分别为鲤、鲫、草、青、鲢、鳙、鲂、罗非鱼、观赏鱼(金鱼、锦鲤)和冷水鱼(虹鳟、鲟鱼);监测疾病种类5大类30种。监测结果显示:全年监测19种疾病,其中细菌性疾病8种,病毒性疾病5种、寄生虫疾病3种、真菌性疾病1种,不明原因疾病2种。易发病品种有草、鲤、虹鳟、鲟、锦鲤、金鱼。全年监测点月平均发病率约为22.5%,发病率最高的为7、8月份,分别为27.8%和30.2%。其中从患病鲑鳟鱼体内分离到的鲑肾杆菌,在我国尚未有报道。据各区县初步统计,2015年北京市水产养殖因病苗种死亡2 859.88万尾,成鱼死亡189.526 t;因苗种死亡造成的经济损失541.8万元,因成鱼死亡造成的经济损失174.5万元。造成损失的疾病种类以细菌性和病毒性疾病为主。由于药物滥用现象普遍,导致病原产生耐药性,以及水产苗种流通缺少有效监管导致疾病传播迅速,均给疾病防控增加了难度。     

基于专家审稿意见的综合性农业学术类稿件问题实证分析

专家具有学术权威性,其评审使刊物的学术水平得到保证,基于《华北农学报》稿件的专家评审意见,对稿件内题目、摘要、关键词、引言、方法、数据、图表、结论与讨论、参考文献等出现的问题进行了实例分析,对编辑工作提出了完善送审稿件,认真领会,学会归纳,选好审稿人等建议,以期对编辑和作者提供帮助,并促使综合性农业类学术期刊的学术水平得到进一步提升.     

酵母代谢物对杂交鲟主要免疫指标及其抗病力影响的研究

正夏季高温鲟鱼易发生细菌性疾病,研究发现高水温可使杂交鲟非特异性免疫降低,分析这个原因可能是导致其抗病力降低的主要原因。因此,2015年本团队研究了三种温度下投喂添加8‰酵母培代谢物的饲料对杂交鲟主要免疫指标及其抗病力影响的研究。测定了红细胞、白细胞数量、吞噬细胞免疫学指标