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试验旨在克隆猪SMYD3(SET and MYND domain-containing protein 3)基因并对其进行序列分析,研究其对猪成纤维细胞增殖的影响。首先克隆猪SMYD3基因,根据其他物种SMYD3基因siRNA和shRNA序列,经同源性比对分析,获得两条猪SMYD3基因shRNA序列,分别构建pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA1/shRNA2表达载体,转染HEK293T细胞,利用实时荧光定量PCR分析干扰效率,筛选出抑制效率较好的shRNA,并构建pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3及pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA真核表达载体,同时分析SMYD3基因对猪成纤维细胞的增殖作用,检测细胞Nanog、DNMT1及DNMT3a基因表达情况。结果显示,试验克隆得到1 404 bp的猪SMYD3基因编码区序列,生物信息学分析发现,德保猪SMYD3基因与野猪、山羊和野耗牛相应氨基酸序列的同源性分别为99.5%、93.8%和92.9%。shRNA1/shRNA2均能显著抑制SMYD3基因表达(P0.05),抑制效果分别是34%和54%,选择pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA2进行后续研究。通过脂质体转染法将构建的pLVX-IRES-ZsGreen1-SMYD3及pSicoR-GFP-SMYD3 shRNA真核表达载体导入HEK293T细胞,均可观察到清晰的绿色荧光。慢病毒感染细胞及实时荧光定量PCR结果显示,与空白对照组及阴性对照组相比,过表达SMYD3基因促进猪成纤维细胞增殖,Nanog和DNMT1基因表达显著升高(P0.05);抑制SMYD3基因表达,细胞增殖受到抑制,Nanog、DNMT1、DNMT3a基因表达显著降低((P0.05),说明SMYD3基因的表达与猪成纤维细胞的增殖显著相关。 相似文献
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随着小麦联合收割机“南征北战”易地作业的开展,大量麦秸从地里尽快回收已成为当务之急。为了赶农时,约有2/3以上的麦秸被焚烧或废弃,既造成资源的极大浪费,又形成新的环境污染。针对机收麦茬高,以及二次切割下的麦秆短且表面光滑,打捆成型难的特点,山西省农机研究所研制开发了麦秸切割、铺条、捡拾、打捆联合作业机具———4LSK—50型麦秸联合收捆机。该项成果已通过了省级科研成果鉴定,达国际先进水平(该机已获国家专利)。1.主要结构及工作原理该机主要结构如图1所示。作业时,拖拉机动力分两路输出,一路通过链传… 相似文献
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为了研究致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中的mRNA表达情况,采用Taqman探针法和SYBR GreenⅠ染料法分别分析了缝隙连结蛋白43和31(Cx43、Cx31)、上皮钙调素蛋白(E-cad)3个基因在水牛体外成熟卵母细胞及培养的早期胚胎中的mRNA表达。结果发现,Cx43基因在水牛成熟卵母细胞中表达量最高,显著高于后3个发育阶段(P0.05);Cx31基因mRNA表达趋势与Cx43相反,成熟卵母细胞中表达量最低,囊胚期最高,随体外胚胎发育Cx31mRNA表达量逐渐增高;E-cad基因在体外培养的各阶段胚胎中mRNA表达无显著差异(P0.05)。以上结果表明,3个致密化相关基因在水牛体外培养早期胚胎中均有表达,但是具有明显不同的mRNA表达方式。 相似文献
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木屑(ARALIAL.)植物为五加科(ARALIACEAE)落叶小乔木或多年生草本。其根的根白皮是民间广泛使用的草药。现代药理试验证明,木属植物的根与人参相似,具有"适应原"样作用,但其毒性技人参、刺五加等大10倍左右。其嫩芽则是著名的山野菜,营养丰富,具特殊的香气,在国际市 相似文献
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利用光学显微镜,扫描电镜和透射电镜对木属(AraliaL.)植物的花粉形态进行了观察,根据花粉形状,木属花粉可划分为5个类型:①长圆球形;②近圆球形;③圆球形;④扁圆球形;⑤近扁球形。花粉形态的研究澄清了木属一些植物类群的分类学问题。 相似文献
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李湘萍 《世界热带农业信息》2018,(1)
正1月25日,随着最后一方混凝土浇筑到位,自治区重大项目广西新媒体中心(一期工程)主体结构全面封顶。该中心是中国——东盟信息港和中国-东盟网络视听产业基地的重要组成部分,被自治区人民政府纳入数字经济基地建设范畴,项目一期工程预计在今年8月底实现整体竣工验收并投入使用,为自治区成立60周年献礼。 相似文献
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为了解转录激活与信号转导因子5(STAT5)在水牛乳腺发育及泌乳生理中的功能,对水牛STAT5a和STAT5b基因的5′调控区启动子序列进行了克隆,并比较其活性.根据GenBank已公布的牛STAT5a和STAT5b基因序列设计特异性引物,以广西本地水牛乳腺组织基因组DNA为模板,通过PCR法分别扩增不同长度STAT5a和STAT5b基因启动子片段并进行生物信息学分析.结果表明:克隆得到的水牛STAT5a基因启动子片段(P1和P2)大小是500bp,700bp,STAT5b基因启动子片段(P3,P4和P5)大小是500bp,800bp,1 500bp.在线分析结果显示,仅P2片段中存在高甲基化位点,且富含SP1,AP2等转录因子结合位点.将构建的不同长度启动子片段分别连入pGL3-Basic载体,分别转染水牛乳腺上皮细胞,检测荧光素酶表达水平.与未转染组相比,P1~P5质粒转染组的荧光素酶比值均显著提高(p0.05);添加5mg/mL质量浓度催乳素(PRL)处理乳腺上皮细胞,P3质粒转染组的荧光素酶比值显著高于其他各组(p0.05).以上结果表明,水牛STAT5a和STAT5b基因启动子活性均受到PRL调节,两者表达水平在水牛乳腺上皮细胞中不同,且STAT5b基因表达受PRL调控更为明显. 相似文献