贵州香猪睾丸发育中支持细胞和生精细胞数量变化观察

为了解香猪睾丸发育过程中生殖细胞和支持细胞数变化规律,用手术取出30,40,50,70,90和110日龄(每个年龄组n=3～4)香猪右侧睾丸,经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片采用免疫组化SP法,用单克隆抗体GATA-4检测睾丸支持细胞的特异生长转录因子-4,经DAB显色、苏木素复染。光镜下核呈棕色者为支持细胞,核呈蓝色者则为生殖细胞;经显微照相并用Scion image软件测量生精小管及管壁面积。结果:30～110日龄睾丸支持细胞数维持在稳定水平(P>0.05),而生殖细胞数随日龄增加而增多,70日龄生殖细胞数快速增多(P<0.05),持续到110日龄。同样,从70日龄开始睾丸生精小管和管壁面积显著性增大(P<0.05)。香猪睾丸支持细胞快速增殖发生在30日龄前,而生殖细胞数随着日龄的增长而增多。     

香猪睾丸发育的形态学变化

为了解香猪睾丸发育过程中的形态学变化,外科手术取30、40、50、60、90、110日龄（每个年龄组n=3～4）香猪右侧睾丸经中性多聚甲醛固定,石蜡包埋,组织切片采用HE染色,40倍物镜下观察细胞数量变化,经显微照相后用Scion image软件测量生精小管、输出小管和附睾管的管壁面积。结果发现30～50日龄时睾丸生精...     

禽呼肠孤病毒血清学相关性及S3基因序列同源性分析

采用血清学交叉中和试验方法,分析了4株禽呼肠孤病毒株CL(鸡源禽呼肠孤病毒)、YH和YB(鸭源禽呼肠孤病毒)及S1133(禽呼肠孤病毒标准株)之间抗原的相互关系;并对CL株的S3基因进行克隆测序,用DNAsis和Prosis等分析软件进行序列比较及推导氨基酸序列分析.结果表明:4株禽呼肠孤病毒株之间具有共同的群特异抗原,但不同病毒株间存在中和抗原位点的不对称性;血清学相关性与S3基因序列及其推导的σB蛋白氨基酸序列同源性不一致,表明禽呼肠孤病毒诱导机体产生特异性中和抗体的病毒蛋白不止σB蛋白一个,σB氨基酸序列同源性与血清学相关性没有必然的直接联系.     

苯甲酸雌二醇对小鼠生殖器官肥大细胞的影响

为研究苯甲酸雌二醇（E2）对小鼠生殖器官肥大细胞数量和分布的影响，将4周龄小鼠随机分成2个对照组和3个试验组，每组10只（雌雄各半），连续腹腔注射E2（0．05、0．5、5mg&#183;kg^-1&#183;d^-1）7d后手术采取各组睾丸、附睾、卵巢和子宫，组织经PBS配置4％多聚甲醛固定24h，石蜡包埋，5μm厚切片，采用改良甲苯胺蓝染色法（MTB）观察生殖器官中肥大细胞数量分布。结果表明，注射0．05mg&#183;kg^-1&#183;d^-1剂量使子宫肥大细胞增多，注射0．5mg&#183;kg^-1&#183;d^-1和5mg&#183;kg^-1&#183;d^-1剂量均使子宫肥大细胞减少；注射这3种剂量均使卵巢肥大细胞增多；注射0．05mg&#183;kg^-1&#183;d^-1和0．5mg&#183;kg^-1&#183;d^-1剂量使睾丸和附睾肥大细胞增多，注射5mg&#183;kg^-1&#183;d^-1剂量却使睾九和附睾肥大细胞减少。     

外源性己烯雌酚对雄性香猪外周血细胞的影响

雌激素是体内重要激素之一,通常通过其受体(ER)发挥生物学作用;ER有ERa和ERβ两个亚型并广泛存在于免疫和造血系统中,在小鼠、大鼠及人类的脾脏细胞、胸腺细胞基质成分和胸腺细胞、造血细胞和骨髓均发现有ER表达[1],表明雌激素与免疫和造血系统存在紧密关系.     

己烯雌酚对幼年香猪睾丸肥大细胞数量的影响

为研究己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)对幼年雄性香猪睾丸肥大细胞数量的影响,随机将20只20～25日龄的幼年雄性香猪分成4组(1个对照组和3个实验组),对照组只注射生理盐水,每个实验组连续9d经腹腔分别注射不同剂量的己烯雌酚(0.03mg/kg,0.3mg/kg和3mg/kg)后,外科手术取出左侧睾丸并经卡洛氏液固定20h,石蜡包埋后制成5μm组织切片,用改良甲苯胺蓝染色法(MTB)观察己烯雌酚(DES)对幼年香猪睾丸肥大细胞数量的影响.结果表明:与对照组相比,不同剂量的DES都具有促进睾丸和附睾中肥大细胞增多的作用,且具有剂量相关性.但相同剂量的DES对睾丸白膜和间质,附睾头、附睾体和附睾尾中肥大细胞数量的作用效果不同,说明己烯雌酚对肥大细胞数量的影响存在组织差异性,且与剂量有关.     

鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官肥大细胞的影响

为研究鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官的影响,连续对小鼠灌胃不同剂量鲟鱼硫酸软骨素2周后,外科手术取出胸腺和脾脏,并依次进行称重、卡洛氏固定、石蜡包埋、组织切片、甲苯胺蓝染色,40倍物镜下观察鲟鱼硫酸软骨素对小鼠免疫器官肥大细胞数量的影响。结果表明：鲟鱼硫酸软骨素能促进小鼠免疫器官重量指数增大,并能显著促进免疫器官中肥大细胞数量的增长。其中,600 mg/kg剂量下小鼠胸腺指数显著( P<0．05)增大,胸腺中肥大细胞数量极显著( P<0．01)增加,60 mg/kg剂量下小鼠脾脏重量的增加最为明显( P<0．01),6 mg/kg剂量下小鼠脾脏中肥大细胞数量的增加最为明显( P<0．01)。     

己烯雌酚对幼年香猪睾丸细胞的影响

为了认识己烯雌酚(DES)对幼年雄性香猪睾丸生殖细胞和支持细胞数的影响,将20只20～25日龄幼年雄性香猪分成4组,对照组只注射生理盐水,试验组连续9d(每天1次)经腹腔分别注射不同剂量(0.03、0.3、3mg·kg-1)己烯雌酚后,最后一次注射24h后取左侧睾丸,入40g·L-1多聚甲醛固定24h,常规制备5μm石蜡切片,用免疫组织化学方法对睾丸支持细胞特异性蛋白生长转录因子4(GATA4)进行检测。显微镜下分别计数支持细胞和生殖细胞数,并统计分析。结果发现:己烯雌酚用量为0.3和3mg·kg-1能促使睾丸生殖细胞数显著增多(P0.05);而使睾丸支持细胞数量显著减少(P0.05);首次发现DES能促进幼年香猪睾丸生殖细胞增殖而抑制其支持细胞增殖。DES的作用因细胞类型不同而有所不同,但其机制还需进一步研究。     

已烯雌酚对贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶活性的影响

采用比色法测定已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对性未成熟贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性的影响.结果表明:DES能够使贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性显著增强(p＜0.01).睾丸中NOS和cNOS的活性在DES用量为0.3 mg/kg时最强(p＜0.01);当增大到3 mg/kg用量时,二者活性又降低(p＜0.01).诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性在DES为0.03 mg/kg时最强(p＜0.01);当DES在0.3 mg/kg和3 mg/kg时,其活性显著降低(p＜0.01).DES使附睾中NOS活性显著减弱(p＜0.01),随着DES用量的增多,附睾中NOS活性增强.主要表现在对结构型一氧化氮合成酶(cNOS)活性有显著增高作用(p＜0.01),但其活性还是低于对照组(p＜0.01).研究结果认为DES能增强性未成熟贵州香猪睾丸中NOS的活性而抑制附睾中NOS的活性.     

贵州香猪不同发育阶段睾丸组织肥大细胞观察

为了解贵州香猪不同发育阶段睾丸肥大细胞(MC)数量的变化情况,试验采用外科手术法取出30,40,50,60,90,110日龄(每个日龄段3～4头)香猪右侧睾丸,卡洛氏液固定,石蜡包埋处理并作5μm厚连续切片,用改良甲苯胺蓝(MTB)染色法观察睾丸发育过程中MC的形态和数量变化。结果表明:90日龄前香猪睾丸MC数量随日龄增加而增多,到90日龄时MC数量达到最多,而110日龄时MC数量减少,极显著低于50,60,90日龄睾丸中MC数量(P<0.01)。说明性成熟(90日龄)前香猪睾丸MC数量增多,而性成熟后MC数量减少,这种变化规律有利于睾丸的发育和精子的生成,但其作用机制还需进一步研究。