野生反刍动物心水病研究进展

心水病是由反刍动物埃立克体引起的一种急性、致死性的蜱传反刍动物传染病。该病不但可以使家养反刍动物发病,还可以使野生反刍动物发病,对野生动物及野生环境造成极大的危害和污染。论文从心水病的历史及地理分布、病原学、流行病学、临床症状、检测方法、发病机制、疫苗,进口野生动物传入心水病的风险分析及口岸防控措施等方面进行了综述,旨在为野生反刍动物心水病的检测与防控研究提供参考。     

四川省猪高致病性蓝耳病灭活疫苗临床应用效果调查

2009年下半年,分别对四川省14个市的55个规模场和15个村的散养户开展了猪蓝耳病疫苗临床应用效果调查。采用问卷调查的方式进行了免疫副反应的调查,问卷统计显示,高致病性猪蓝耳病灭活疫苗免疫效果良好,但也存在不同程度的免疫副反应。对其中的31个规模场和3个散养村采集的595份猪血清用ELISA试剂盒检测猪蓝耳病抗体,抗体阳性461份,阳性率77.48%。     

四川省列规定动物疫病区示范区兽医实验室现状

四川省无规定动物疫病区建设从1998年开始至今，已先后在14个市、96个县（县级市、区）和两个省级单位展开，并在成都、德阳等31个市（县、区）进行了无规定动物疫病区示范区建设。10年来，示范区通过加强兽医基础设施建设，建立健全各级动物疫病监测诊断体系。动物疫病防治工作水平得到了大幅度提高．基本建成了动物疫病控制、防疫监督、疫情监测、防疫屏障四大体系。示范区内已连续多年未发生重大动物疫情。动物疫病诊断监测体系的建设保证了四川畜牧业的健康发展，在维护公共卫生、畜产品安全和人民身体健康等方面发挥了巨大作用。     

四川省无规定动物疫病区示范区兽医实验室现状

四川省无规定动物疫病区建设从1998年开始至今,已先后在14个市、96个县(县级市、区)和两个省级单位展开,并在成都、德阳等31个市(县、区)进行了无规定动物疫病区示范区建设。10年来,示范区通过加强兽医基础设施建设,建立健全各级动物疫病监测诊断体系,     

四川猪圆环病毒病的诊断

2003年8月至12月,四川德阳、绵阳、成都等地的某些种猪场和规模化养殖场,在断奶仔猪中发生一种以呼吸困难、咳嗽、腹泻、渐进性消瘦,死亡率增高为特征的传染病。根据流行病学调查、临床症状、剖解病变及PCR试验,诊断为Ⅱ型圆环病毒(PVC-Ⅱ)感染。1发病情况2003年8月,四川德阳市某养猪场,存栏能繁种母猪200余头,断奶后仔猪420多头。8月下旬该猪场猪只开始发病,首先是55日龄以后的保育舍仔猪相继出现腹泻,其粪便开始呈灰绿色,后期为黄绿色,个别呈水样稀粪。病猪消瘦,吃食减少,被毛粗乱,眼睑水肿。大部分猪出现呼吸道症状,咳嗽,流鼻液,部分…     

羊群绵羊肺炎支原体抗体间接ELISA 检测方法的建立

利用绵羊肺炎支原体国际标准株Y-98,制备全细胞抗原,作为包被抗原,建立了一种间接ELISA方法。对4个不同羊场进行了血清学调查,确定了MoP抗体阳性率各为90%、70%、83.3%和73.9%。同间接血凝试验和鼻腔拭子培养结果相比,间接ELISA方法更加特异敏感,检出率更高,从而对该病的诊断和免疫程序的制定具有重要意义。     

同时注射口蹄疫和猪瘟疫苗对免疫效果的影响

猪O型口蹄疫灭活疫苗(Ⅱ)和猪瘟弱毒脾淋疫苗分别单独免疫注射和混匀后免疫注射35日龄左右健康仔猪,观察其免疫反应,并用ELISA评价免疫效果.试验结果表明,两种疫苗同时分点注射,相互间的干扰很小,在生产实际中是可行的;两种疫苗混合后注射,免疫效果均显著降低,生产上不可采用.     

幼犬泄泻的诊治

正泄泻是粪便中固形物相对减少而呈稀薄样或水样,排便次数增多的一类疾病,幼犬素体虚弱,此病较多见。笔者等用中成药结合艾条温灸治疗幼犬泄泻,疗效显著提高。1病因多因养管不当,饥饱不均,或喂食残羹剩饭,逐渐伤及脾胃,脾阳减弱,清浊不分而泻下。幼犬自身抵抗力弱,胃肠道内菌群失调。外感寒湿,由表及里,入传脾胃,下注于肠,而致气虚肠冷,肠中水湿运化乏力而泄泻。2临床症状脾虚泄泻型:表现为毛焦肷吊,形体消瘦,粪便溏薄,     

非洲猪瘟病毒主要抗原p54-1的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定

为进一步深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的主要抗原表位及抗原性质,本试验根据GenBank中p54基因序列(登录号:NC_001659.2)设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接表达载体pGEX6p-1构建pGEX6p-1-p54-1原核表达质粒;将该质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,切除GST标签后采用阴离子柱纯化目的蛋白并鉴定;将纯化蛋白与佐剂混合乳化后作为免疫原,免疫小鼠制备p54-1蛋白多克隆抗体;采用ELISA和Western blotting检测抗体的效价和反应特性。结果显示,重组p54-1融合蛋白以可溶形式表达,切除标签后的纯化蛋白能够与ASFV阳性血清发生反应,而与PRRSV和PCV3不发生反应。利用该蛋白免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶128 000。Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能够识别ASFV p54蛋白。表明本研究成功获得了较高纯度的p54-1蛋白,制备的p54-1多克隆抗体具有较高反应性和特异性,为后续非洲猪瘟双抗夹心ELISA检测方法的建立提供依据。     

A型塞内卡病毒VP2蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备

本研究旨在表达A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)的衣壳蛋白VP2,并制备其多克隆抗体。以SVA GD01/2017分离株RNA为模板,RT-PCR扩增VP2基因序列,并克隆至原核表达载体pET-30a(+)中构建重组质粒pET-30a-SVA-VP2。经测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达。在非变性条件下,利用Ni-NTA琼脂糖树脂从菌体裂解液上清中纯化重组SVA VP2蛋白,并免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用Protein A Sepharose CL-4B树脂从兔血清中亲和层析纯化多克隆抗体,并对其进行间接免疫荧光分析。结果显示,重组SVA VP2蛋白以可溶性和包涵体两种形式在大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞内进行表达,分子质量约为47ku;制备的兔抗VP2蛋白多克隆抗体效价高达1∶64 000,该多克隆抗体仅识别SVA,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、脑心肌炎病毒、猪瘟病毒和猪伪狂犬病病毒等常见猪病原无交叉反应,表明制备的多克隆抗体具有良好的特异性。重组SVA VP2蛋白及其多克隆抗体的成功制备为猪塞内卡病毒病血清学检测方法的建立提供了良好的生物材料。