谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响

为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-CMyc基因cDNA全长814 bp,开放阅读框(ORF)为285 bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达,并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。     

探究羊人工授精操作过程中的注意事项

1器械准备在羊的人工授精工作开展之前,需要对具体操作过程中的应用设备进行系统化的管理,在准备好开膣器、镊子、剪子、调节器设备后,使用碱水进行清洗,完成消毒后向设备上涂抹凡士林,使其处于正常的使用状态。例如,在开膣器、镊子、剪子等金属物质的消赤处理中,可以使用65%的酒精棉球完成消毒处理,也可以使用酒精灯进行火焰消毒。     

浅析养羊场免疫失败因素

正近年来,随着羊肉价格持续稳定上升,羊的饲养量得到快速增加,促进了畜牧业的发展,丰富了人民生活的需求。长期以来,羊病一直是影响羊业健康发展的重要因素之一,羊因发病死亡造成的损失不可估量,虽然造成这种损失的原因很多,涉及管理、药物、疫苗等诸多因素,但是免疫失败或免疫保护是其中重要因素之一。保障养羊业健康持续发展,羊病免疫注射是必须的。影响免疫效果失败因素有多种,主要包括防疫意识,疫苗注射,疫苗接     

伴有跛行症状的猪病及诊治

猪佝偻病、软骨病与骨质疏松症,这些病在临床表现上都有一个共同的症状;跛行。骨髓炎与脊柱脓肿是由病原菌(尤其是化脓隐秘杆菌)引起。骨软骨病和腿无力是导致猪跛行和种猪淘汰的主要原因。创伤与用力过度有关,可造成母猪内侧肱骨上踝和股骨大转子肌腱分离和增生性骨炎,导致猪跛行。对这类疾病需了解病因和临诊表现,采取必要的应对措施。     

罗氏沼虾细胞色素P450家族CYP302a1基因克隆及其在蜕皮周期中的表达

蜕皮是甲壳动物重要的生理活动,与其蜕皮激素的合成密切相关,细胞色素P450(CYP)302a1是甲壳动物蜕皮激素合成通路中的关键酶之一。本研究克隆了罗氏沼虾CYP302a1基因(Mr-CYP302a1),cDNA全长1859 bp,开放阅读框(ORF)为1629 bp,编码543个氨基酸(aa),分子量大小为61.09 ku,等电点为8.42。氨基酸序列分析显示CYP302a1基因的保守结构域含有5个P450基因家族特征保守区域:heme-binding、helix-K、helixC、helix-I及PERF。系统进化分析结果显示Mr-CYP302a1首先与绿虾CYP302a1聚为一支,然后与凡纳滨对虾及三疣梭子蟹等十足目甲壳动物的CYP302a1聚为一支,与甲壳动物的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测表明Mr-CYP302a1在罗氏沼虾的多个组织中均有表达,其中在Y器官中的表达量最高,性腺中次之。同时研究发现,MrCYP302a1基因在罗氏沼虾的蜕皮后期(A期和B期)表达量很低,蜕皮间期(C期)表达量开始上升,在蜕皮前期D1亚期达到峰值。对Mr-CYP302a1进行蛋白表达及多克隆抗体制备,蛋白印迹法(Western blot,WB)检测表明Mr-CYP302a1蛋白在罗氏沼虾Y器官中的表达量最高,在蜕皮过程中的蜕皮前期D1亚期达到峰值。综上所述,该基因在罗氏沼虾的蜕皮过程中扮演着十分重要的角色。     

风湿祛痛胶囊中地龙药材的鉴定

目的地龙是巨蚓科动物参环毛蚓Pheretima aspergillum (E.Perrier)、通俗环毛蚓Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛蚓Pheretima guillelmi (Michaelsen)或栉盲环毛蚓Pheretima pectinifera Michaelsen的干燥体。具有清热定惊,通络,平喘,利尿的功效。近年来,由于需求量大,出现地龙掺假的现象,于是采用分子生物学方法来鉴定地龙的真伪,同时建立一种鉴定地龙的方法。方法提取地龙粉末、地龙水提物、地龙醇提物、风湿祛痛胶囊的DNA,采用PCR方法得到PCR产物,并电泳鉴定其产物大小,鉴定地龙真伪,通过实验验证方法的稳定性。结果研究发现含有地龙的制剂的PCR产物均在260bp之间有单一条带,并摸索得出鉴定的条件为:95℃预变性5 min,35个循环(95℃变性30 s,58℃30 s,72℃30 s),72℃延伸5 min,经过验证具有稳定性。     

风湿祛痛胶囊对大鼠急性痛风性关节炎及环氧化酶(COX-2)的影响

目的:研究风湿祛痛胶囊(Fengshi Qutong Jiaonang,FQJ)对急性痛风性关节炎(Acute Gouty Arthritis,AGA)大鼠的抗炎作用及其作用机制。方法:通过尿酸钠(MUS)诱导大鼠急性痛风性关节炎动物模型以及环氧化酶-2(COX-2)抑制剂体外检测方法,考察风湿祛痛胶囊对急性痛风性关节炎大鼠的足肿胀以及大鼠血清中尿酸(UA)的含量的影响,并考察风湿祛痛胶囊体外抗炎作用。结果:风湿祛痛胶囊能明显减轻急性痛风性关节炎大鼠足肿胀度,能明显降低炎性大鼠血清中UA含量,并且能够抑制COX-2的活性。结论:风湿祛痛胶囊治疗急性痛风性关节炎有确切疗效,可能与降低UA含量,抑制COX-2的活性有关。     

珠三角河网初级生产力时空差异及其影响因素

为评价珠三角河网初级生产力,于2015年3月、6月、9月、12月对其进行取样调查,采用多元统计方法研究初级生产力时空差异及其与环境因素关系。结果表明,珠三角河网初级生产力(碳,C)为98.81~927.21mg·(m~2·d)~(-1),均值为346.51 mg·(m~2·d)~(-1)。调查区域初级生产力季节变化明显,总体上表现为春季冬季夏季秋季。各站位初级生产力均值以珠江桥站位最高[600.61 mg·(m~2·d)~(-1)],市桥站位最低[232.60 mg·(m~2·d)~(-1)]。初级生产力与透明度、氮磷营养盐、叶绿素a呈正相关关系(P0.01,n=52),与硅酸盐呈负相关关系(P0.01,n=52),与水体富营养化综合指数(EI)呈线性相关关系。珠三角河网以中营养、富营养为主体,与其他水域相比,初级生产力较低,污染程度较严重,需防止其向富养化发展。     

泥鳅的人工繁殖及苗种培育技术研究

文章介绍了泥鳅生物学特性,阐述了泥鳅人工繁殖及苗种培育技术,分析了相关注意问题,从而为广西保护和开发利用泥鳅提供技术支撑。