大鳞副泥鳅mtDNA Cytb基因序列分析及分子系统发育研究

对15尾大鳞副泥鳅的线粒体细胞色素b基因进行PCR扩增和正反测序,获得长度为1140 bp的细胞色素b基因同源片断。所有序列中共检测到15种单倍型,序列中共出现81个变异位点,总变异率为7.1%。各单倍型的变异全部是转换或颠换,无插入和缺失,转换/颠换比为6.36。变异位点在3位密码子中的分布呈现偏倚,密码子第3位的变异占总变异的85.18%,而第1和第2位均只占7.41%。A、T、C、G碱基的平均含量分别为27.4%、30.8%、26.5%、15.3%,A+T>C+G。在所得序列中,密码子第1位上4种碱基使用较为均衡;第2位上碱基T的使用率高达41%,碱基G的使用率低至13.2%;第3位上碱基A的使用率为37.9%,而碱基G的使用率仅为7.0%。以红尾副鳅为外群用邻接法构建分子系统进化树。结果显示,在系统地位上大鳞副泥鳅与黑龙江泥鳅有较近的亲缘关系。     

泥鳅线粒体DNA控制区结构分析及遗传多样性研究

采用PCR和DNA测序技术对4个泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）群体的线粒体DNA控制区序列进行比较，研究其遗传多样性和控制区的结构。结果显示，用于分析的线粒体DNA控制区片段序列为918～920bp。32个序列中共发现了56个多态位点，其中32个转换位点，19个颠换位点，5个转换与颠换同时存在的位点，定义了32种单倍型。同时对控制区结构进行分析，识别了其终止序列区（ETAS）、中央保守区（CD）和保守序列区（CSB）的关键序列。4个地理群体的单倍型多样性（Hd）、核苷酸多样性（Pi）和平均核苷酸差异数（K）分别为0．992、0．012和10．698。群体间的平均Kimura双参数遗传距离（Kimura 2-parameter distance，K2-P）、遗传分化指数（Fst）、基因交流值（Nm）和分子方差分析（AMOVA）均表明4个泥鳅群体具有较高的遗传分化，基因交流贫乏。利用核苷酸序列构建的NJ分子系统树揭示4个群体分为2个谱系，除范县群体外，其余各群体间相互交叉聚集。     

泥鳅苗种扩繁技术

按照泥鳅亲本标准严格进行挑选,投放在亲本培育池塘中,采取投喂泥鳅亲本专用饲料强化培育,平均放养密度400 kg/667m2,水温20℃时使用DOM、S-GnRH-A等进行人工催产,利用环道大批量生产泥鳅鱼苗,受精率92%以上,孵化率90%以上.70 d时间共繁殖45批次,获苗5.2亿尾.     

泥鳅的捕捞与运输技术研究

泥鳅是生活在淡水中的小型经济鱼类，属鲤形目、鳅科、泥鳅属，泥鳅的学名为Misgurnus anguillicatus。泥鳅分布较为广泛，经济价值较高，是我国人民喜食水产品，因其味道鲜美，营养价值很高，并具有一定的药用保健作用，越来越受到人们的喜爱和关注。随着国内外市场需求量不断上升，各地纷纷开展了泥鳅养殖。在泥鳅养殖过程中捕捞与运输是末尾环节，却是非常重要的一个环节，它直接关系到当年产量、经济效益等。有关泥鳅的养殖、繁殖方面的报道很多，但是关于人工养殖泥鳅的捕捞和运输方面的报道却很少见，因此开展泥鳅的捕捞以及运输这一课题研究具有重要现实意义。     

提高鳜鱼幼苗成活率的有效措施

鳜鱼从幼苗期开始,到全长4cm以上可以下塘养殖这一期间,最容易死亡,出现这种状况的主要原因有：先天性发育不足、繁殖水温不适应、孵化操作不慎、饵料适口性差、病虫害等。根据多年生产经验,总结出以下几项提高鳜鱼苗成活率有效措施,供鳜鱼苗种生产单位参考。     

3个群体泥鳅mtDNA D-loop的PCR-RFLP分析

采用PCR-RFLP方法,对采自安徽怀远、河南范县及安徽舒城的3个群体共112尾泥鳅（Misgurnus anguilli-caudatus）线粒体DNA（mtDNA）的D-loop区段进行PCR扩增,使用11种核酸限制性内切酶进行酶切。结果显示,在11种内切酶中,8种有酶切位点,4种存在个体间变异,共产生7种单倍型。怀远、范县和舒城群体的核苷酸多样性指数为0.0033、0.0083、0.0011,单倍型多样性指数分别为0.6048、0.8370、0.2344。范县与怀远、舒城群体间的Rogers遗传距离分别为0.3456和0.6847,怀远和舒城群体间的Rogers遗传距离为0.6326。SspⅠ的酶切类型C组成的单倍型在舒城群体中占87.5%,而在范县群体中为0;同时发现,SspⅠ的酶切类型C、D和XspⅠ的酶切类型B分别组成的单倍型仅在范县群体中存在。     

3个群体泥鳅mtDNA D-loop的PCR-RFLP分析

采用PCR-RFLP方法,对采自安徽怀远、河南范县及安徽舒城的3个群体共112尾泥鳅(Misgurnus anguilli-caudatus)线粒体DNA(mtDNA)的D-loop区段进行PCR扩增,使用11种核酸限制性内切酶进行酶切。结果显示,在11种内切酶中,8种有酶切位点,4种存在个体间变异,共产生7种单倍型。怀远、范县和舒城群体的核苷酸多样性指数为0.0033、0.0083、0.0011,单倍型多样性指数分别为0.6048、0.8370、0.2344。范县与怀远、舒城群体间的Rogers遗传距离分别为0.3456和0.6847,怀远和舒城群体间的Rogers遗传距离为0.6326。SspⅠ的酶切类型C组成的单倍型在舒城群体中占87.5%,而在范县群体中为0;同时发现,SspⅠ的酶切类型C、D和XspⅠ的酶切类型B分别组成的单倍型仅在范县群体中存在。     

大鳞副泥鳅人工催产试验

一、材料与方法 1．亲本标准与来源 大鳞副泥鳅雌体体重25克以上，体长14～18厘米，雄体体重要求不严，一般12克以上、体重10厘米以上。要求体表色泽正常，光滑无病斑，体型匀称，活动敏捷，年龄2龄以上。亲本来源主要是从上年的成鳅池中挑选，也可从附近市场上选购。