转基因奶牛胚胎移植技术的试验研究

2006年6月至2010年3月以来,北京奶牛中心与中国农业大学合作,在北京奶牛中心良种场开展了转基因牛胚胎移植试验研究。本试验利用中国农业大学培育的转基因母牛作为供体,进行超数排卵生产体内胚胎,将获得的胚胎移植给15～15.5月龄荷斯坦母牛受体。截止2010年3月21日,累计移植转基因奶牛胚胎87枚,移植受体牛87头,妊娠48头,移植妊娠率为55.17%;产犊43头,成活34头,犊牛成活率为79%;经中国农业大学研究人员检测,有14头公牛携带转入目的基因,这14头公牛已全部进入北京市种公牛站饲养。目前,有10头公牛到了试采精月龄,精液经农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心(北京)检测,质量符合国家标准。     

进口奶牛胚胎移植效果研究

2007年5月至2010年9月以来,在北京奶牛中心良种场及中国农机院小王庄牛场移植进口奶牛胚胎。引进美、加系优质荷斯坦奶牛胚胎主要目的是选育优秀后备种公牛和种子母牛。截止2010年9月,累计移植受体牛345头,使用胚胎351枚,妊娠219头,平均移植妊娠率为63.47%。移植结果说明,本研究成功建立了一套进口胚胎移植技术方法。     

不同激素组合、不同日龄对犊牛活体采卵效果的试验研究

本试验主要研究了不同诱导激素组合、不同日龄对犊牛活体采卵效果的影响。结果表明,在埋植CIDR的同时肌注E20.5mg,第6天、第7天递减注射FSH,可以获得较多的可用卵母细胞;不同犊牛对激素反应差异较大,约24%的犊牛经过激素诱导获得了约60%的可用卵母细胞;对犊牛进行激素诱导活体采卵,最佳时间是在8周龄左右。     

牛性控精液及其应用

近年来．牛性控精液的商业化进程发展很快。然而，与常规精液比较，性控精液分离技术成本高，操作复杂，且受胎率低。虽然分离精液的公牛头数有限．但是许多国家仍在进行牛性控冷冻精液的商业化生产。目前，性控精液主要应用于青年母牛配种和超数排卵生产性控胚胎，以生产母犊。由于精子分离速度慢，与传统精液比较，性控精液精子数量少．使用性控精液输精常常会导致受胎率略有下降，获得可用胚胎数量减少。为确保使用性控精液成功．必须对牛加强饲养管理。处理精液小心谨慎，而且输精人员技术要熟练。随着成本的降低，性控精液将不断扩大应用于牛、马以及其他物种的繁殖中。     

奶牛非手术法冲卵技巧

在奶牛胚胎移植(ET)技术中，供体的超数排卵、非手术法冲卵、胚胎的质量评定和分级、胚胎的冷冻和解冻、受体牛的选择、同期发情、发情鉴定、非手术移植技术等，一环扣一环，都需要实践的积累。由于技术环节多，某一环节的失误或不足都可能导致移植效率的下降和失败。     

应用性控冷冻精液生产性控胚胎试验

在供体奶牛超排时,应用X性控冷冻精液进行输精,生产体内性控胚胎.超排处理72头供体母牛(每头输4支精液),获可用胚335枚,平均每头供体牛获可用胚4.65枚.对照组共处理供体牛68头,采用常规冷冻精液输精(每头牛输精2支),获可用胚415枚,头均获可用胚6.1枚.     

奶牛超排前卵巢状态对超排效果的影响

本试验初步研究了超排前卵巢状态对超排效果的影响。据直肠检查结果将供体奶牛分为两组 :1组供体卵巢上只有黄体存在 ;2组供体卵巢上不仅有黄体存在还有卵泡存在。经超排处理后 ,1组中 2头供体无发情表现 ;2组中 6头供体无发情表现。 2组供体的不发情率 2 7 3 %显著高于 1组的 6 3 %(P <0 0 5)。两组供体在平均获胚数和平均获可用胚数无显著差异 (P >0 0 5)。     

牛胚胎玻璃化超快速冷冻一步法移植试验

应用 30 %乙二醇 0 .3mol/ L 蔗糖 - m- PBS液 (VS1)、30 %乙二醇 0 .3m ol/ L 蔗糖 5 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m-PBS液 (VS2 )、30 %乙二醇 0 .3mol/ L蔗糖 10 %葡聚糖 (T- 5 0 0 ) - m- PBS液 (VS3)玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎 ,一步法移植。结果显示 ,VS1、VS2、VS3组玻璃化超快速冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率分别为 10 0 % (2 0 / 2 0 )、95 %(19/ 2 0 )和 5 5 .6 % (5 / 9) ;培养存活率分别为 70 % (14 / 2 0 )、75 % (15 / 2 0 )和 2 2 .2 % (2 / 9) ;囊胚孵化率分别为 0、2 0 % (4/2 0 )和 0。VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的形态正常率极显著地高于 VS3组 (P<0 .0 1) ;VS1、VS2组玻璃化冷冻奶牛胚胎解冻后的培养存活率分别显著 (P<0 .0 5 )和极显著 (P<0 .0 1)地高于 VS3组。 VS1组冷冻的胚胎经一步法移植了 5头 (1枚 /头 ) ,未获得妊娠 (0 / 5 ) ;VS2组冷冻的胚胎用一步法移植了 10头 (1枚 /头 ) ,结果获得 2头妊娠(2 / 10 ) ,并产下 2头正常犊牛。     

孕激素阴道栓在奶牛繁殖和胚胎移植上的应用

孕激素阴道栓目前国内主要是“牛欢”,还有部分国外生产的CIDR和PRID等。它们均为同一类的孕激素缓释装置,是解决养牛业中调整产犊季节、集中发情配种、治疗某些奶牛繁殖疾病的理想药物。同时,在奶牛的胚胎移植上,用于供体牛的超数排卵和受体牛的同期发情。“牛欢”的主要成分是氟孕酮,支“牛欢”中含氟孕酮250 mg,其附着载体为黑色圆柱状海绵。在使用时为了更好地发挥其缓释作用,并减少海绵表面对阴道壁的刺激,使用灭菌的植物油浸润,再通过阴道开张器将其送入阴道深部。1在奶牛繁殖上的应用1.1母牛产后乏情或长期不发情母牛产后不发情…